绪论-血液一般检验课件

1,实 验 诊 断 Laboratory diagnostics,实验诊断学教研室,2,概 论,Laboratory diagnostics： 运用细胞学、临床化学、免疫学、血液学、微生物学、寄生虫学、分子生物学等多学科的理论和实验方法与技术，对人体的血液、体腔、排泄物和组织细胞等标本进行各种实验检查，获得有关病原体、病理生化变化和脏器功能状态等的实验信息，为疾病的诊断与鉴别诊断、疗效方案选择、疗效检测、预后评估等提供客观依据。 实验诊断是临床诊断的一个重要组成部分。,3,实验诊断学的内容：,血液学检验: 血常规 生化检验：肝功能测定，肾功能测定 免疫学检验：乙肝“两对半” 病原学检验：细菌培养 细胞检验：肿瘤脱落细胞检查 分子生物学检验：丙肝的PCR定量检测 寄生虫学检验：血吸虫、疟疾等,内 容,4,血液：全血、血清、血浆 毛细血管血、静脉、动脉采血 骨髓标本： 脑脊液: 胸腹水: 尿、粪: 组织细胞:,标 本 的 种 类,实验诊断学的标本：,5,诊断：乙肝的核酸检查；两对半； 鉴别诊断：细菌感染和病毒感染； 治疗方案选择：药敏实验； 疗效监测：肝炎病人体内病毒含量及肝 功能评估；糖尿病血糖检测 预后评估：肾病患者的肾功能检测；感染性疾病病原体检测,作用,实验诊断学的作用：,6,大三阳,小三阳,7,临床实验室常用试验的分类,筛查试验：灵敏度高、简单、快速， 诊断试验：特异性较高，灵敏度可能低于筛查试验，,HIV筛查: 酶联免疫吸附测试验(ELISA),HIV确诊实验: 免疫印迹法（Western Blot）,8,二、实验诊断的影响因素,试验前影响因素：最难控制的环节。 试验中影响因素 试验后影响因素,9,试验前,试验中,试验后,通过对患者的分析，进行化验项目的选择和组合,检验申请、患者准备、原始样品的采集和运送,对标本进行细胞学、化学、免疫、病原体等分析、方法、仪器、人员、质控,咨询服务：结果解释及进一步检查咨询,系统性审核、结果报告与传递、样品的储存,10,生理因素与生活状态: 饮食、性别、年龄、运动等 标本采集与处理：时间、状态、温度等 项目选择与医嘱：合理选择项目 环境因素：居住环境、海拔 药物：Vc等,分析前,11,控制分析前影响因素的对策,(一)加强沟通 合理选择 (二)患者准备 至关重要 (三)标本采集 保证质量 (四)重视标本运输、储存,12,1.临床诊断实验的意义及干扰因素。 2.准确判断分析化验结果。 3.医师认真、完整地填写检验申请单。,(一)加强沟通 合理选择,13,例如诊断心肌梗死时有肌红蛋白、肌钙蛋白和磷酸肌酸激酶三项实验,肌红蛋白多:612h呈阳性 肌钙蛋白: 1232h阳性率最高 磷酸肌酸激酶: 2070h阳性率最高。,时效性,14,病毒窗口期：病毒进入人体后，需要经过一段时间血液才会产生病毒抗体，在此期间抗体检测呈阴性，这段时间即为窗口期 ，检查抗病毒的抗体的结果却是阴性，容易造成漏诊。,病毒,抗体,窗口期,15,(二）患者准备 至关重要,患者准备就是规范采集标本前患者的一切行为。 如何判断检验前的干扰物质? 如:药物的干扰能否消除?,16,激烈运动后：LDH、ALT、AST、GLU等的测定值升高 紧张、劳累、寒冷：WBC升高 一顿标准餐后：TG可50, BIL、GLU可15，ALT10, P、Ca、Na和TCHO可升高。,(二）患者准备 至关重要,安静状态下，空腹采集标本！,17,应尽量了解病人对刺激物(烟、酒、茶或咖啡)和成瘾性药物的接触史,供评价检验结果时参考。,(二）患者准备 至关重要,18,咖啡因：GLU、血管紧张素 烟草：脂肪酸、肾上腺素、WBC等 酒精：LA,UA,醛固酮,肾上腺素等 GLU，LDL 吗啡：AMY,脂肪酶,AST,ALT,BIL, ALP,胃泌素,催乳素等 胰岛素,去甲肾上腺素等,(二）患者准备 至关重要,19,Vc：实验诊断中最常见的干扰药物,干扰机制,强还原性：班氏尿糖定性假阳性，酶法测定葡萄糖、甘油三酯、总胆固醇， 弱酸性：可竞争尿胆原的排泄，使尿胆原下降。 药理特性：可以降低血清总胆固醇水平。,20,Vc对实验诊断的影响,21,对于某些检验指标来说,卧位采血与坐、立位采血结果是有区别的。 通常立位比卧位少12%左右，如Hb、WBC、RBC、HCT、脂类、蛋白质等。,(三)标本采集 保证质量,22,压脉带：如以结扎1min的样品结果为基数，则结扎3min，可使血浆总蛋白增加5，胆固醇增加5，铁增加6，胆红素增加8，乳酸则不能使用止血带,(三)标本采集 保证质量,23,(三)标本采集 保证质量,避免标本溶血。 区分是病理性溶血还是技术性溶血。 当乳酸脱氢酶、Hb、转氨酶或血钾等值异常增高时,应警惕溶血。,24,采血完成后,应尽量减少运输和储存时间,尽快处理并检测。,(四) 重视标本的运输和储存,时间过长：糖酵解使血糖降低、RBC中K+逸入使血清K+升高、Cl-与CO2在细胞内外的交换使血清Cl-增高、CO2逸散使其结果减低、以及血液pH值变化、酶活性的降低或丧失等等,25,坚持两个标本采集的原则：,1）必须满足检测结果正确性的各项要求； 2）检测结果必须能真实、客观地反映患者当前病情。,26,分析中,标本质量与处理 仪器与试剂 人员技能 操作技术与方法 质控物与标准品 安全性与成本,27,分析后,检测记录 结果书写 计算机输入 与临床的沟通等,28,三、参考范围，医学决定水平和危急值,参考区间（Reference interval ) ：用稳定、可靠的试验方法，在特定的条件下检测健康人群（或特定人群）所得的包括95%测定值（正态分布）的范围,选择参考个体，组成参考样本组 采集样品 分析样品，获得参考值 统计处理参考值，获得参考区间,29,30,医学决定水平（Medicine decide level ,MDL）是指不同于参考值的另一些限值，通过观察测定值是否高于或低于这些限值，可在疾病诊断中起排除或确认的作用，或对某些疾病进行分级或分类，或对预后作出估计，以提示医师在临床上应采取何种处理方式，如进一步进行某一方面的检查，或决定采取某种治疗措施等等,31,白细胞计数： 0.5×109/L： 低于此值，病人有高度易感染性。 3×109/L: 低于此值为白细胞减少症 11×109/L: 高于此值为白细胞增多，此时作白细胞分类计数有助于分析病因和分型，如果需要应查找感染源。 30×109/L: 高于此值，提示可能为白血病。,32,危急值：某些检验结果出现异常超过一定接线时，可能危及患者的生命，医生必须紧急处理，称之为危急值,33,34,1.掌握常用检验项目的概念和临床意义，标 本的采集。 2.了解检验项目的方法和原理。 3.学会用临床思维，进行实验的评价及结果分析。 4.注意全面分析、动态观察。,实验诊断学的学习要求,35,临床血液学检验,实验诊断学教研室 罗进勇,36,第一节 血液一般检测,血常规传统概念：RBC和WBC的量和质，即狭义的血常规（blood routine test）,包括：RBC,HB,HB,DC,血液成分常规检测(血常规),网织红细胞,红细胞沉降率,内容,37,全血细胞计数（complete blood count，CBC），广义的血常规。 血细胞分析及计数每升血液中红细胞、白细胞的血小板的量，测定血细胞的体积或某些生物学特性、血细胞内的某种物质含量等，由此判断血细胞的质与量有无异常,38,血液分析仪全血细胞计数参数： 红细胞分析参数： RBC, Hb, Hct, MCV, MCH,MCHC, RDW, Ret, 红细胞形态学 白细胞分析参数：WBC、DC 血小板分析参数：PLT, MPV, PCT, PDW, 血小板形态 红细胞与血浆成分相互作用关系：ESR,39,标本的采集和保存,1. 标本采集前的准备： 患者、环境温度、药物干扰 2. 抗凝管要求：EDTA.K2.2H2O 3. 采集方法：静脉、毛细血管 4. 标本保存：室温（低温影响PLT形态）,40,41,检测方法,42,全自动血细胞分析仪,半自动血细胞分析仪,43,44,一、红细胞分析参数,红细胞生理,促红细胞生成素 , EPO,睾丸酮,72h,48h,120d,Iron、protein,Bilirubin,Iron,叶酸，Vit B12,网织红细胞,45,双凹圆盘型,（1） 胞膜表面积大，有利于气体交换,（2） 胞膜有盈余，易于伸展变形,46,（一）RBC计数和Hb测定,1. 概念 RBC、Hb： 单位容积中红细胞数和血红蛋白量 常用于贫血诊断并判断程度,47,2. 影响检测结果的因素,病人全身血容量有无改变：如大失血，血 液浓缩，故RBC、Hb很难准确反映有无贫血 病人血浆容量改变：失水，水储留 性别、年龄、居住海拔差异,48,3. 参考区间（Reference interval ）,RBC （×1012/L） Hb（g/L） Hct（%） 成年男性 4.0-5.5 120-160 40-50 成年女性 3.5-5.0 110-150 37-48 新生儿 6.0-7.0 170-200,Notes：1.年龄与性别的差异 2.RBC和Hb为浓度单位： 注意全身血浆容量是否改变 急性大出血的时相：早期与数小时后,49,年龄（岁）,红细胞（×1012/L）,50,4. 临床意义（clinicsignificance),(1) RBC、Hb 单位容积中红细胞和血红蛋白低于参考值下限称贫血（anemia） (症状而非疾病）,生理学贫血,病理学贫血,51,生理学贫血,婴幼儿（生长过快，原料不足） 妊娠（血浆容量增加，稀释性） 老年人（造血功能下降）,52,病理学贫血,3. RBC丢失过多 急性失血 慢性失血,遗传性球形细胞增多症 输血后溶血、蛇毒、烧伤、脾亢,2. RBC破坏过度 RBC内异常（膜、酶） RBC外异常 （免疫、生物、理化和机械损伤）,再生障碍性贫血 缺铁性贫血 巨幼细胞性贫血,1. RBC生成减少 干细胞（造血功能障碍） Hb生成 DNA合成,主要临床类型,发病机制,53,增生减低性贫血:骨髓造血功能障碍所致贫血，其骨髓象中红细胞系减低,增生性贫血系骨髓以外的病因导致的贫血，表现为周围血象红细胞、血红蛋白减少，但骨髓象中红细胞系代偿性增生。,缺铁贫骨髓象,再障骨髓象,54,根据Hb减低的程度和临床表现对贫血分级：,55,（2）RBC，Hb,生理学增多,病理学增多,相对性增多,绝对性增多,高原居民，胎儿和初生儿， 剧烈运动后,各种原因所致血液浓缩： 严重呕吐、腹泻、大面积烧伤、出汗等,原发性-真性红细胞增多症（干细胞） 继发性-慢性心肺疾患、肾癌、肝癌,56,（二）血细胞比容（Hemocrit, Hct）测定,血细胞在血液中所占体积百分比 常用于贫血诊断并判断程度 也可用作红细胞平均指数计算指标 有助于贫血形态学分类,红细胞比积（packed cell volume，PCV）,57,Clinical significance,反映RBC的量，受血浆容量改变的影响 受RBC体积大小影响 增高：相对性（血液浓缩）；绝对性（真红） 减低：各种贫血，但与RBC不一定成正比,58,（三）红细胞平均值的计算,1.平均红细胞容积：每个红细胞的平均体积 (mean corpuscular volume,MCV) 2.平均红细胞血红蛋白含量：每个红细胞内所含 血红蛋白平均量（mean corpuscular hemoglobin,MCH) 3.平均红细胞血红蛋白浓度:每升血液中所含血红 蛋白平均浓度 （mean corpuscular he