天然药毒物和毒品法医毒物分析课件

潘爱华,Tel:87330563（o） Email:panah666163.com,第六章 天然药毒物,天然药毒物的特点：,1. 中毒原因复杂,2. 毒物来源复杂,3. 化学成分复杂,4. 化学结构和理化性质差异大,5. （药）毒理作用各异且毒性差异较大,6. 检材的性状、组成和含量各异,天然药毒物分析的特点：,1. 确定分析目的物难,2. 筛查毒物难,3. 提取分离毒物难,4. 检测毒物难,对策： 了解常见有毒动植物和中草药的名称和俗称、来源、成分、形态、分布、用途； 了解其毒性大小、中毒症状、体内过程等方面的知识； 了解案情、分析案情，以寻找检验方向、合理制定分析方案。,第一节 形态学检验,天然药毒物案例，其体外检材往往都保留有原植物的部分形态特征。针对天然药毒物检材的这一特点，可应用形态学方法对天然药毒物进行检验。,第一节 形态学检验方法,1外观性状鉴别： 形状，大小，颜色，表面特征，质地，折断面，气和味。 2显微形态鉴别： 通过对组织结构、细胞形态、细胞后含物等某些特征进行鉴别。细胞后含物是细胞中的非生命物质，是新陈代谢的积累物。后含物：营养物、代谢后废物可见形状（淀粉）；溶解状态无形物（生物碱，甙类，鞣质）形态和成分是观察的重点（特征性）。,显微形态鉴别,第二节 天然毒品,一、阿片类,中枢神经抑制剂 主要包括:阿片类生物碱 海洛因（二乙酰吗啡） 二氢可待因酮 二氢吗啡酮等。,半合成,鸦片类生物碱：吗啡(morphine)、可待因(codeine)、那可汀(narcotine)、罂粟碱(papaverine)、蒂巴因(thebaine) 吗啡是鸦片的主要成分，具有麻醉镇痛作用；可待因是鸦片中镇咳止痛的有效成分。,种植地域： （原产地：小亚细亚） 经世界卫生组织批准，只允许印度、土耳其等少数国家种植限量的罂粟。 非法种植区： “金三角”：亚洲缅甸、泰国、老挝三国交界和“金新月”：阿富汗、巴基斯坦和伊朗交界,Heroin,Chasing Dragon,Injection,海洛因滥用情况简介,阿片类是当今滥用最为广泛、依赖性最强、对社会危害最大的毒品。海洛因的滥用尤为严重。,（一）毒品鉴定,1. 形态学检验,（1）罂粟果（壳） 的形态和性状,1）外观,与易混淆植物区别：野罂粟、丽春花（虞美人）,2）显微形态,（2）鸦片的外观性状,生鸦片：棕黑色膏状物 熟鸦片：棕色带金黄，光滑， 大量掺杂物,1-4号海洛因 颜色从黑色、暗褐色、棕色到灰白色、白色,（3）海洛因外观性状,（3）海洛因外观性状,常见非法贩卖形态： 粉末、压成长方块状，一般用塑料薄膜热封，外面通常用黄色不透明的胶带纸缠绕，有250g、350g等不同规格包装。零散毒品交易中的海洛因，一般用方形或长方形白纸包装，每包0.1g到1g不等。,2. 阿片生物碱的检验,（1）结构性质和检材处理,吗 啡：两性，只能在弱碱性(pH8.5-9.3)从水溶液游离 析出,不溶于氯仿,溶于氯仿-醇的混合溶剂；盐 酸盐溶于水，不溶于氯仿 可待因：不具两性,溶于氯仿、乙醚、乙醇等有机溶剂 海洛因：溶于氯仿，盐酸盐易溶于氯仿,碱水解成单乙酰 吗啡和吗啡，镇痛作用是吗啡的4-8倍 那可汀、蒂巴因 、罂粟碱：碱性,盐酸盐易溶于水或氯仿,（2）显色反应（预试验）,1）甲醛硫酸（Marquis试剂）反应,2）钼酸铵硫酸（Frohde试剂）反应 吗啡、海洛因，紫转灰紫；可待因，蓝绿,3）亚硒酸浓硫酸（Mecke试剂）反应 吗啡、海洛因显深绿色 可待因显蓝绿色 罂粟碱显暗蓝色,吗啡、海洛因、可待因，显紫红色或紫堇色,（3）薄层色谱法 灵敏度较低，仅适用于体外检材 改良碘化铋钾显色,（4）高效液相色谱法,固定相：C18最普遍，氰柱分离效果较好,色谱条件：YWG-C18柱(4 6mm×250mm）;流动相为甲醇 :水(3:7),内含0.5%三乙胺,用冰醋酸调pH=6.8；流速1mL/min；检测波长254nm；柱温30,（5）气相色谱法,色谱柱： OV-17（12m×0.53mm） 载气：氮气，流速 2ml/min； 柱温：起始温度 150（1min）10/min20020/min270(6min) 进样口温度 260 检测器温度 280 。 检测器：FID或NPD。,检测对象：吗啡、可待因、那可汀、蒂巴因 、罂粟碱,（6）海洛因中掺杂物的检验,用于海洛因中掺杂物分析的常用方法有GC/MS、IR、UV、原子发射光谱、溶解度试验和沉淀反应等。 主要掺杂物：有机小分子 掺杂物：扑热息痛、咖啡因、茶碱、苯巴比妥 分析方法：气质联用分析,气质联用分析,色谱柱：BPX-5（30m×0.22mm×0.25m） 载气：氦气，流速 1.5ml/min； 柱温：初温 160（1min)10/min280(23min) 进样口温度 280 传输线温度 260。 质谱条件：EI电离源，电子能量70eV，离子源温度 200，扫描范围40450amu。,（二）体内海洛因及其代谢物的检测,1. 体内代谢与取材,确认滥用海洛因的证据。,尿液：海洛因定性分析的最佳检材。 检出时限：不超过72hr。 组织和其它体液：中毒死亡案例，胆汁含量较高 血液：含量很低 毛发：一般在尿检阴性时， 需了解涉毒史,2. 筛查,尿液：免疫分析,3. 确证,（1）检材处理： 适于尿、血液、组织（匀浆） 游离吗啡、O6-乙酰吗啡检测 调节pH8.7,添加内标（如乙基吗啡） 二氯甲烷:异丙醇（9：1）提取 可酸反提净化(必要时） 挥干有机溶剂 衍生化（丙酰化、硅烷化等） 总吗啡、O6-乙酰吗啡检测 需在提取前水解。 若检测吗啡，可酸水解； 若检测O6-乙酰吗啡，需酶解，不能采取乙酰化衍生法,3. 确证,（1）检材处理： 毛发处理 依次用甲醇、水超声清洗2次，晾干，剪成1mm长小段 称取20-30mg，添加内标，水解 调节pH8.7 氯仿:异丙醇（9：1）提取 挥干有机溶剂 衍生化（丙酰化、硅烷化等） 残留物可做衍生化（如TFA法），备检。,（2）气/质联用确认,色谱柱：DB-5（30m×0.25mm×0.25m） 载气：氦气，流速 1.0ml/min； 柱温：初温 200（1min)10/min280(10min) 进样口温度 280 传输线温度 260。 质谱条件：EI电离源，电子能量70eV，离子源温度 250，扫描范围40450amu。,检测:6-乙酰吗啡，确证海洛因滥用,GC/MS：GC时衍生（甲基硅烷化）,二、大麻(marijuana，cannabis),简介 致幻药；盛产于亚洲与北美，以印度大麻最为著名。 主要活性成分为： 四氢大麻酚，THC (tetrahydrocannbinol) 大麻酚，CBN（cannabinol） 大麻二酚，CBD（cannabidiol） 大麻酚酸，cannabinolic acid,二、大麻(marijuana，cannabis),简介 吸食方式： 大麻草手卷烟 把大麻草/精放在普通香烟内燃吸 把大麻油涂于香烟顶端,1大麻的形态学检验,(1)植物形态,(2)大麻制品及性状：,大麻草：雌花、嫩叶、果实等活性成分量高部位加工而成，绿、黄、或褐色 大麻树脂：活性部位分泌的树脂样物质 大麻油：大麻草或树脂的有机溶剂萃取浓缩物,(3)显微形态： 碎片，水合氯醛透化,稀甘油封片 非腺毛(刚毛):单细胞长弯曲尖叶状,基部膨大处有碳酸钙钟乳体； 腺毛；薄壁组织中有细小草酸钙；花的乳突状毛绒,2. 大麻酚类化合物的检验,（1）化学结构和理化性质,不溶于水，易溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿等有机溶剂； 性质不稳定，双键、酚羟基易被氧化,四氢大麻酚 大麻酚 大麻二酚,（2）化学方法: 体外检材，筛选实验 荧光反应：紫外光下，石油醚提取物干燥后喷冰醋酸，显绿色荧光 快速Duguenois试剂：香夹兰素+乙醛的乙醇液，显绿色，加盐酸为紫色，氯仿萃取紫色 快蓝B反应：碱性，大麻酚类与快蓝B显红紫色 （快蓝B试剂：快蓝B和无水硫酸钠1:100固体混合）,（3）薄层色谱：,吸附剂：硅胶G 展开剂 （1）环己烷：丙酮：二乙胺（80：15：5） （2）正己烷：苯：二乙胺（20：70：10） （3）石油醚：丙酮：浓氨气（80：18：2） 显色剂：称50mg快蓝B溶解在20ml0.1M NaOH溶液中，注意现用现配,TLC分析结果：多个斑点（与已知品对照）,恒比洗脱HPLC色谱条件,（4）高效液相色谱法,梯度洗脱HPLC条件,HPLC：反相色谱，紫外检测、电化学检测器,a reversed phase column (Lichrocart, C18 125-4 mm, 5 m, Merck)；The mobile phase, a mixture of acetonitrilephosphate buffer (pH 5.0) (65:35(v/v);The flow rate, 1.5 ml /min,（5）气相色谱法,色谱柱： OV-17（30m×0.25mm×0.25m） 载气：氮气，流速 1mL/min； 柱温：起始温度 150（1min）10/min260(6min) 进样口温度 300 检测器温度 300 检测器：FID,（二）体内大麻酚类化合物的检测,1.THC的体内代谢过程 长期吸食可在脂肪中积蓄，体内排除较慢 尿中主要为四氢大麻酚酸，尿样常呈酸性。 2.检测采集与处理 一般采集尿、血或毛发，若可检出四氢大麻酚酸，则可作为吸食大麻的直接证据。 提取：先碱水解，己烷-乙酸乙酯混合溶剂提取。溶剂挥干，必要时衍生化。,THC的体内代谢途径,3.GC/MS分析(羧基和酚羟基衍生)：,方法1： 适于尿、血液 三种大麻酚分析和三种代谢物（各有两异构体） 取样1mL 添加内标，磷酸缓冲液调节pH6.8, 酶解 2mol/L HCl调节pH7-8，己烷:乙酸乙酯（7：1）提取 冰醋酸调节pH4-5，己烷:乙酸乙酯（7：1）提取 合并提取液，60挥干有机溶剂 衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）,方法1续： 适于尿、血液 大麻酚酸的提取 取样1mL 添加内标，磷酸缓冲液调节pH6.8, 酶解 调节至pH4-5 己烷:乙酸乙酯（7：1）提取 60挥干有机溶剂 衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）,方法2： 毛发处理（大麻酚酸的提取） 依次用二氯甲烷，晾干，剪成1mm长小段 称取50-100mg，添加内标 加1mL1mol/mL NaOH ，80水解20min 1mL冰醋酸酸化 己烷:乙酸乙酯（9：1）提取 挥干有机溶剂 衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）,气/质联用确认,色谱柱：DB-5（30m×0.25mm×0.25m） 载气：氦气，流速 1.0ml/min； 柱温：初温 150（1min)30/min240(0.5min) 3/min280(1min) 30/min300(0.5min) 进样口温度 290 传输线温度 280。 质谱条件：EI电离源，电子能量70eV，离子源温度 250，扫描范围40450amu。,体内主要代谢物THC-COOH衍生化质谱图,三、可卡因(cocaine),盛产于南美（古柯叶） 早在5000年前这种植物就出现在厄瓜多尔一带，被安第斯山的土著居民古印第安人奉为“圣草”， 1860年德国化学家尼曼(Alert Niemann)从古柯叶中分离,热带山地常绿灌木-古柯树，性喜温暖、潮湿，株高约2-4米，树叶茂密，叶片长3-7厘米，呈长椭圆形，边缘光滑，其形状和味道均类似茶叶。古柯树花小，每朵5瓣，花色黄白。果实呈红色，核内含一枚种籽。古柯树根系发达，生命力强，每年可采摘古柯叶3-4次，一般在3月、6月、9月、及11月采摘，每棵树约可采摘40年。,早期咀嚼古柯叶曾是王族的特权 16世纪后才普及到一般平民，