实验室建设和管理培训第八章突发公共卫生事件应急检测

实验室在突发公共卫生 事件中的作用和任务 （微生物部分）,主 要 内 容 1. 突发公共卫生事件的主要有害 因素 2. 实验室在突发公共卫生事件中 的作用 3. 实验室在突发公共卫生事件中 的任务、应急检测技术、原则,1. 突发公共卫生事件 的主要有害因素,1.1 病原微生物 包括致病菌和病毒、细菌、螺 旋体、真菌等。,1.2 微生物产生的毒素 毒素是微生物体内的代谢 产物。,1.3 病原寄生虫 由于各种寄生虫引起的寄生 虫病。,1.4 病媒生物 如蚊子、蝇、虱、蟑螂等。,2. 实验室在突发 公共卫生事件中的作用,突发事件的处理，不仅是对疾 控机构，甚至是对一个城市医疗管 理水平和政府行政管理水平的严峻 挑战。,疾控机构应在最短时间内采取 规范、科学、符合标准要求的快速 行动，以判断原因，采取有效的对 策。,质量和速度是专业技术和管理 水平等综合素质、反应能力的整体 体现。,2.1.1 危险性评估 突发事件发生后，卫生行政部门应 组织专家进行综合评估，初步判断事件 类型，根据危害范围和程度进行分级。 危险性评估需要现代化的实验室、 快速的危险性评价技术等作为支撑。,2.1.2 危险性评估 提出是否启动突发公共卫生事件应 急预案的建议。 建立实验室网络，快速识别突发公 共卫生事件的病因。,2.2.1 实验室在传染病疫情中的作用 无论是基础研究还是应用研究都离不 开实验室的工作，这些工作主要包括病原 学、检测与诊断、预防与控制（包括疫苗 等）、药品研究等方面。 病原学研究包括病原的鉴定、病原体 分子生物学、病原体可能的来源、病原体 致病机理等。,2.2.2 实验室在传染病疫情中的作用 传染病的诊断需要综合实验室检验结 果，包括：流行病学资料、临床病史、体 格检查以及实验室检查结果,2.2.3 实验室在传染病疫情中的作用 病原体的检出是确诊传染病的主要依 据。每一种传染病都有特异的病原体，病 原体的检出是确诊的重要依据，应尽一切 可能分离到病原体。,3. 实验室在突发公共卫 生事件中的任务、应 急检测技术、原则,3.1 统一指挥、 明确职责和分工 现场流调人员和实验室人员之间 要紧密配合，相互沟通,3.2.1 检验技术能力的储备 不同级别的实验室应该具备的检测能力不 一样，省、地、县级疾病预防控制中心实验 室建设指导意见规定了省级疾病预防控制中 心实验室必须开展的项目和选做的项目；地级 疾病预防控制中心实验室必须开展的项目和选 做的项目；县级疾病预防控制中心实验室必须 开展的项目和选做的项目。,3.2.2 检验技术能力的储备 突发公共卫生事件有害因子的鉴别应该形 成一个自上而下的公共卫生实验室网络。 下级实验室鉴别不了的请示上级实验室支 持，疾控机构解决不了的问题应邀请其他部门 和研究机构加入公共卫生实验室网络，并建立 经常性的联系。 检验技术能力的储备也包括各网络内相关 实验室检测能力等信息的收集、整理。项目。,3.2.3 检验技术能力的储备 人员业务素质、仪器设备、技术 资料、检测试剂等。,3.3 实验室在处理 传染病疫情中的任务,主要内容： a)现场病原微生物标本的采集 b)病原微生物标本的保存 c)病原微生物标本的包装和运送 d)病原学检测 e)血清学检测 f)免疫学检测 g)核酸检测和序列分析 h)现场快速检测,a)现场病原微生物标本的采集 采样计划；采样时生物安全考虑； 采样时间；采样容器、标识等。,采样计划 根据暴发疫情和临床特点，首先 制定周密的采样计划。,采样时生物安全考虑 采样中避免污染对于人员和标本都 是至关重要的，应采用防护措施，注意 安全操作。,基本的安全要求如下 采样戴手套；采样中尽可能穿防护服； 消毒人员要穿戴防护服和厚橡胶手套；污染 的或材料应先消毒后清洗或先消毒后废弃； 使用口罩、护目镜、呼吸面罩，用于防止有 高度传染力的可吸入病原；特殊情况下可搭 建简易焚烧炉，焚烧后将废弃物深埋。,采样时间 怀疑细菌感染时应尽量在急性发作期 和使用抗菌素之前采集标本，进行细菌的 分离、培养。病毒分离培养和抗原检测的 标本应在发病初期（如 1-2天内）和急性 期采集。,采样容器、标识 采集标本应使用无菌容器，一个标本一个 容器。对容器基本要求是选耐用材料制成，容 器包装好后可防渗漏。能承受空中地面运送过 程中可能发生的温度和压力变化。 标本标签内容应齐全。在暴发调查中个案 调查的信息应和标本同时收集，并且能够互相 符合等。,b)病原微生物标本的保存 为分离标本中病原细菌或病毒，应选择合 适的培养基和保存液，并注意保存湿度。用于 分离培养病毒的标本一般应放在0 4的容 器内，不能超过48小时。如不能立即分离病毒 或无条件立即运送时应冻存保存，长期保存的 标本应放入-70。 用于检测抗原或抗体的标本可在4C8C 保存2428h，在20C保存时间更长。检测 抗体的血清可在4C保存约一个星期，最长10天；超过一周必须在-20C下冷冻。,c)病原微生物标本的包装和运送 根据国际空运和健康相关条例，菌毒种属 于运输中的感染性材料，这类材料的包装和运 输都必须符合世界卫生组织对传染性物质和诊 断性标本的安全运送指南 （WHO）1997。在运 送过程中的感染性物质分为A、B类两大类。,d)病原微生物的检测 直接涂片镜检 细菌分离、培养和鉴定 病毒分离培养（动物接种、鸡胚 培养、细胞培养）等,直接涂片镜检 直接涂片染色后镜检适用于形态和染 色上具有特征性的病原菌。 优点是方便快捷，缺点是适用范围小。,细菌分离、培养和鉴定 为了查明暴发疫情的原因对采集的标 本最好做病原分离和培养，并且要进行鉴 定。 细菌鉴定包括生化鉴定、血清鉴定与 分型。,病毒分离培养 动物接种是比较老的一种方法，如用于 流行性出血热的病毒分离。 鸡胚的组织分化程度低，选择适应途径 和部位接种病毒容易繁殖，操作简便。鸡胚 本身无菌，对接种的病毒不产生抗体，最常 用来分离流感病毒。 细胞培养是目前分离病毒中最常用的方 法。常用和细胞来源有两种：一是原代细胞 培养；二是传代细胞培养。,e)血清学检测 用于病程较长的传染病的诊断， 结果判断时一般需要取患者急性期和 恢复期双份血清标本。当恢复期血清 抗体效价比急性期高4倍或4倍以上时 才有诊断意义。,f)免疫学检测 免疫学检测是感染病原检测的首选办 法，简便快速，准确率也较高。 凝集反应包括直接凝集反应、间接凝 集反应、间接凝集抑制反应和协同凝集反 应。,g)核酸检测和序列分析 核酸诊断主要用于检测难以培养的微生物、或目前培养方法不敏感、花费高或耗时太久的情况。 优点：省时，灵敏性高。在严格控制实验过程的条件下，对于病因诊断有很好的作用。缺点：实验过程控制不严格时可能产生假阳性结果。实验条件、经验和试剂成本要求高。 因此在应用时要考虑对疫情控制的需要，考虑必要性和可行性。,序列分析是测定核酸一级结构的方 法，目前鉴定细菌或病毒特征的有效方 法。 对已知的病原体，通过特定序列测 定可以精确地鉴定出所属的亚型；对未 知的病原体，通过序列测定可以确定其 在生物分类学上的归属。,h)现场快速检测 快速检测方法操作过程简单，结果判断不需借助仪器或只需要小型的仪器。 适合现场应用，要求灵敏度高、对特异度的要求相对低些，以便能进行初筛。 胶体金层析检测卡优点是方便快速，标本处理简单、无需仪器、肉眼判定结果、并且一般在15min内完成，适于现场使用。但结果的可靠性需要证实。 此外，还有ELISA法、直接涂片法等 。,3.4.突发公共卫生事件检验原则 快速准确 日常监测与突发应急检验相结合的原则 多种检测方法并用及与试验结果相结合 的原则 检验结果与现场调查综合分析的原则,谢 谢 !,