禽流感、人流感、人间禽流感第二军医大学长征医院缪晓辉

禽流感、人流感、 人间禽流感 第二军医大学长征医院 缪晓辉 2005.9.1,禽流感： 是野生鸟类和家禽感染了一种甲型流感病毒，即禽流感病毒以后引起的以体温升高、打喷嚏、头部水肿、呼吸困难、产蛋率明显减少、腹泻等症状呼吸道传染病。被国际兽疫局定为甲类传染病，由称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟。按病原体不同，禽流感可分为高致病性、低致病性和非致病性三大类。,一、定 义,人流感： 也是由流感病毒感染人类引起的一种呼吸道传染病，称“流行性感冒”，或简称“流感”。引起流感的病毒包括甲、乙、丙三型。甲型流感病毒可以感染人类和动物，乙、丙型流感仅感染人类。,一、定 义,人间禽流感： 是由于禽流感病毒感染人类引起的呼吸道传染病，人类感染率不高，但是一旦致病，病死率很高。,一、定 义,禽流感： 1878年，意大利发生鸡群大量死亡（鸡瘟的由来），1955 年证实其致病病毒为甲型流感病毒。此后，这种疾病被更 名为禽流感 19831984在美国、19921995在墨西哥、19992001在 意大利均发生禽流感的爆发流行 1997年香港发生了禽流感流行，150万鸡被宰杀，病毒为 H5N1 2003年月荷兰发生禽流感病毒H7N7流行 2003年12月5日禽流感在韩国爆发，疫情蔓延迅速，至今 该病毒已经在亚洲10个国家和地区出现过不同程度的流行,二、历史回顾,人流感： 19181919年发生的流感大流行，估计全世界约死亡4000 万5000万人 此后在世界各地每隔68年发生一次小流行。,二、历史回顾,人间禽流感： 1997年香港禽流感流行时出现了人间禽流感。当年5月1例 3岁儿童死于不明原因的多器官功能衰竭，同年8月经美国 CDC以及WHO荷兰鹿特丹国家流感中心鉴定为禽甲型流感病 毒A(H5N1)引起的人类流感。18人发病，其中6人死亡。 2003年2月香港第二次发生人间禽流感，一个家庭内出现2 例病人，1例死亡。 2003年月荷兰发生禽流感病毒H7N7流行，出现轻症病 人83例，名兽医死亡。 2003年12月5日禽流感在韩国暴发，至今该病毒已经在亚 洲10个国家和地区出现过不同程度的流行，至少52人因感 染该病毒死亡,二、历史回顾,流感病毒属于正粘病毒（Orthomyxovirus），大多呈球形颗粒状。正、副粘病毒的区别是以其核酸是否分节段为标准，分节段者为正粘病毒，不分节段者为副粘病毒。事实上，正粘病毒只有流行性感冒病毒一种。,三、流感病毒,结构： 病毒的直径为80120nm，内有一直径约为70nm 的电子致密核心，是病毒的核衣壳。流感病毒的结构主要包括内部的核心（即核衣壳）和外面的包膜（即病毒囊膜）两部分。核酸为单股负链RNA，甲、乙型流感病毒为8 个节段，丙型为7个节段，每一个节段就是一个基因， 决定流感病毒的遗传特性。根据核蛋白抗原性的不同，可把感染人的流感病毒分为甲、乙、丙三型。,三、流感病毒,分型： 病毒囊膜由内向外可分为内膜蛋白、类脂和糖蛋白三层，其中糖蛋白层由两种糖蛋白刺突组成，一种是神经氨酸酶（Neuraminidase，A），一种是血凝素(Hemagglutinin，HA)。神经氨酸酶是由4 条相同的糖基化多肽所组成的蘑菇状四聚体，具有酶活性，可水解宿主细胞表面糖蛋白末端的N-乙酰神经氨酸，有利于成熟病毒的释放（抗神经氨酸酶抗体能抑制病毒从细胞释放，但没有中和作用）；HA有15个、NA有9个血清型，可以组合成150多个病毒亚型。,三、流感病毒,变异： RNA病毒容易发生变异，有两种形式： 1.抗原漂移（Antigen drift）:病毒自身核酸序列的突 变，包括点突变、插入或缺失突变，致使HA或NA抗原决 定簇发生某些改变，并在免疫人群中被选择出来，这种 变异幅度小，属于量变。变异后可引起中小流行。 2.抗原转换(Antigen shift)：一般是两个病毒株的基因片 断重新组合，形成HA 和/或NA 完全与前次流行株失去联 系的新的亚型，系质变，这种抗原性的转变幅度大,使人 群原有的特异性免疫力消失，可以引起大规模甚至世界 性的流感流行。,三、流感病毒,Influenza Type A Viruses: Antigenic Shift 1889-1977,Year Subtype Common Name Source 1889 H2N2 ? 1900 H3N8 ? 1918 H1N1 Spanish flu Avian 1957 H2N2 Asian flu Avian1 1968 H3N2 Hong Kong flu Avian1 1977 H1N1 Russian flu ? 1Reassortant with avian virus,命名： 1.病毒亚型命名：根据病毒HA和NA组合： H1N1（人） H5N1、H7N7（禽) 2.同一株不同实验室的发现： 由5个部分组成：型、感染动物、发现地（首次 流行地）、流行株序号、分离年限和病毒亚型 表示方法如：A/鸡/广东/174/04（H5N3）,三、流感病毒,灭活： ·经过56，30分钟、60，10分钟处理均 会丧失活性；加热到6570时只要2 分钟即失活 ·对紫外线敏感，用紫外线直接照射病毒可 以依次破坏其感染力、血凝素活性和神经 氨酸酶活性 ·在阳光直射下流感病毒4048小时即失活,三、流感病毒,四、流行病学(禽、人禽流感),流行特征： ·冬春季节易发生大流行，其他季节可以散发气候 突变、冷刺激、饲料中营养物质缺乏均能促进该 病的发生 ·除野鸟外，各种家禽、猪、马、家猫都能够被感 染，猪、猫等可能成为“中间宿主”，禽流感是一 种典型的“人畜共患”疾病 ·由于高变异速度和变异率，同一时间不同地区流 行的毒株可能存在差异，同一地区不同时间也可 以存在差异 ·人群普遍易感，儿童多见（原因？），所幸目前 感染率不高。禽类接触者为高危人群,四、流行病学(禽、人禽流感),传播途径： ·飞沫经呼吸道传播（与SARS冠状病毒育别） ·接触传播：经口，黏膜，破损皮肤 ·经口传播：污物口，粪口 ·垂直传播？,四、流行病学(禽、人禽流感),传播链： ·禽 禽 ·禽 人 ·人 人？,如果广义地看待禽流感的问题，可以理解为历史上任何一次的流感暴发都源于禽流感，而且无论是人流感病毒，还是其流感病毒，都是甲型流感病毒，不难理解，如果禽流感传播到人，也就是一个新型人流感的诞生，因此其临床特征应该是相似的。,五、临床特征,人类流感的临床特征（一般表现） 潜伏期：13天（数小时至4天）。 症 状：急性高热，全身症状较重，呼吸道症状不严重。表现为畏寒、发热、头痛、乏力、全身酸痛等。体温可高达3940，一般持续23天后减退，全身症状逐渐好转，但鼻塞、流涕、咽痛、干咳等上呼吸道症状仍较显著，少数患者可有鼻衄、纳差、恶心、腹泻、便秘等轻度胃肠症状。 体 征：疾病面容，面颊潮红，眼结膜轻度充血和眼球压痛，眼充血，口腔黏膜可有疱疹，肺部听诊呼吸音粗糙，偶闻及胸膜摩擦音。,（一）症状和体征,临床特征,人类流感的临床特征（分型） 单纯型：最常见，热程34天，上呼吸道症状持续12周，轻症者类似普通感冒。 肺炎型：病变沿上呼吸道向下蔓延累及肺实质，发热持续时间较长，咳嗽、胸痛较剧烈。可持续干咳，也可有淡灰色痰。严重者有剧咳、血痰，气急紫绀。肺部影像学检查见散在云片状因影。病程长达34周。注意：肺炎型和并发肺部细菌或真菌感染是两回事。 中毒型：高热、循环衰竭。可出现休克、DIC、ALI、ARDS，病死率很高,临床特征,（一）症状和体征,禽流感的临床特征 早期症状：类似流感：发热、全身不适、上呼吸道症状（卡他症状不明显）。部分患者有恶心、腹痛、腹泻等消化道症状，眼结膜充血。 重症表现：病情发展迅速，病变迅速蔓延至下呼吸道，胸闷、气促，继续发展为严重的呼吸困难，出现广泛肺炎、ALI、ARDS、肺出血、胸腔积液、TSS，可导致多个脏器功能损害，甚至多脏器功能衰竭（MODS）。 体 征：根据病情的轻重，可出现与器官损害相应的各种体征，其中有半数病人有肺实变体征。,临床特征,（一）症状和体征,1997年香港18例H5N1病毒感染病例临床特征,可行胸部X线摄片或CT检查 ·轻型患者肺部没有异常 ·半数患者胸呈单侧或双侧肺炎，严重者呈实变 （白肺），肺部病变与病情相关 ·少数病人伴有胸腔积液 ·心衰者心影增大和肺部淤血,（二）胸部影像学检查,临床特征,血液常规： 急性期，白细胞总数计数不定，可正常或略有减少，淋巴细胞相对增加，或绝对计数减少。血小板减少。并发感染后白细胞计数升高。 生化检查： 如导致肝、肾功能损害，可出现相应的指标异常。高热、液体补充不足、过度利尿等可能出现电解质紊乱。 血气分析： 轻型患者正常，或因过度通气出现代偿性呼碱，严重者根据病情，可以出现各种呼吸性或代谢性酸碱失衡。,1. 一般实验室检查,临床特征,（三）实验室检查,(1)病毒分离 ·金标准 ·采用SPF级鸡胚或敏感细胞系(如Vero、MDCK) ·通常采用鼻咽拭子、含漱液、气管/肺胞灌洗液等 ·病毒分离后需经核酸检测和/或血清检测证实 ·病毒分离后可通过基因测序以确定所分离毒株与既 往分离毒株间的关系,1.病原学检测,临床特征,（三）实验室检查,(2)核酸检测 技术：RT-PCR、NASBA等 RT-PCR：目前常用技术。 NASBA： Collins RA. et al. (2002). Journal of Virological Methods. 2002, 103( 2): 213-225. Songhua Shan等(上海出入境检验检疫局/2003) Biochemical and Biophysical Research Communications. 2003 , 302: 377383. 目的基因：H5(HA1、HA0)、NP、NS等。 结果判定: 阳性：存在AI病毒。 阴性：不能依据阴性结果排除AI。,1.病原学检测,（三）实验室检查,临床特征,3.抗体检测 抗体：抗血凝素(HA)抗体、抗H5特异性体、抗神经氨酸酶 (NP)抗体、等。 方法：免疫荧光技术、 ELISA、血凝抑制试验（关于血凝试验 和血凝抑制试验）。 意义：检测病毒特异性IgM 抗体，单份血清阳性可作为早期诊 断依据检测。检测急性期和病后第34 周双份血清(血 清总抗体)，抗体效价增长4 倍以上，提示近期感染。,4.抗原检测 采用酶、荧光或其他标记单克隆抗体染色，可检出感染细 胞内相应的病毒抗原，作为早期特异性诊断。,（三）实验室检查,临床特征,AI病原学检测的常用临床标本,临床特征,生物安全问题：美国CDC推荐, 抗原抗体检测：under BSL 2 (test for influenza), 核酸检测：BSL 2 work practices (Class II biological safety cabinet),病毒分离：BSL 3+ laboratory conditions,（BSL：Biosafety Level）,临床特征,（三）实验室检查,病原学检测由上海市CDC开展，需要有两个实验室平行检测，可与其他具有一定条件的实验室协同。 禽流感疫情的确认要由国家禽流感参考实验室（哈尔滨兽医研究所）检测鉴定。,（三）实验室检查,临床特征,1.流行病学 当地有禽类流感的流行，在禽类中检测出高致 病性的甲型流感病毒。 有禽类接触史，其中在流行季节，禽类养殖、 运输、宰杀、销售（包括扑杀人员）是高暴露 人群，询问病史时应特别注意。 12岁以下儿童是禽流感告发人群高发有待探索。 2.临床表现 3.实验室检查结果 病原学检查结果尤为重要,六、诊断依据,（一）诊断,留院医学观察： 有流行病学史和较典型的临床表现。 疑似病例： 有明确的流行病学史和典型的临床表现者，经4872小时医学观察后仍不能排除人间禽