甘氨酸的制备实验报告

为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划甘氨酸的制备实验报告甘氨酸的含量测定电位滴定法生药1011第四组一、应用范围：本方法采用滴定法测定甘氨酸原料药中甘氨酸的含量。本方法适用于甘氨酸原料药。二、方法:供试品无水甲酸溶解后，加冰醋酸，照电位滴定法，用高氯酸滴定液滴定，并将滴定的结果用空白试验校正，根据滴定液使用量，计算甘氨酸的含量。三、原理：氨基酸分子中含有一NH2和一COOH，为两性物质，在水溶液中，它的酸式电-10离和碱式电离的趋势都很弱(如氨基乙酸其羧基上的氢Ka=25×10，氨基作为碱Kb=22×10-12)，因此无法准确滴定。但在非水介质(如冰乙酸)中，可以用HC104作滴定剂，结晶紫为指示剂准确滴定氨基酸，产物为氨基酸的高氯酸盐，呈酸性。结晶紫在强酸介质中为绿色，pH=2左右为蓝色，pH>3时为紫色，可以指示此反应的滴定终点。(由紫色到蓝色到蓝绿到绿色到黄色变化)四、实验材料1、试剂：冰醋酸无水甲酸高氯酸滴定液结晶紫指示液基准邻苯二甲酸氢钾2、仪器设备：电位滴定仪、酸度计或电位差计、容量瓶、烧杯、磁力搅拌器、搅拌子等五、操作步骤1.高氯酸滴定液试样制备配制：取无水冰醋酸750mL，加入高氯酸，摇匀，放冷，加无水冰醋酸适量使成1000mL，摇匀，放置24小时。若所测供试品易乙酰化，则须用水分测定法测定本液的含水量，再用水和醋酐调节至本液的含水量为%。2.结晶紫指示液取结晶紫，加冰醋酸100mL使溶解。3.标定：取在105干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约，精密称定，加无水冰醋酸20mL使溶解，加结晶紫指示液1滴，用本液缓缓滴定至蓝色，并将滴定结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液相当于的邻苯二甲酸氢钾。根据本液的消耗量与邻苯二甲酸氢钾的取用量，算出本液的浓度。4.酸度计的校正接通电源，开机预热5min。用蒸馏水冲洗电极，并用滤纸吸干，然后将电极放入pH已知的标准缓冲溶液中摇动烧杯，使电极前端玻璃球与标准缓冲溶液充分接触。转动标定旋钮，使仪器度数等于标准缓冲溶液的pH值。标定完成后将电极清洗干净，并用滤纸吸干。同样的方法再标定pH的标准缓冲液。5.供试品的电位滴定精密称取供试品约70mg，加冰醋酸25mL，照电位滴定法，用高氯酸滴定液滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液相当于的C2H5NO2。注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。六、实验结果1.原始数据标定所以，高氯酸滴定液浓度C=/L甘氨酸含量测定G+HC1O4HGC1O4甘氨酸含量=由二阶微分法知滴定终点为mL所以，甘氨酸含量=%电位滴定法将盛有供试品溶液的烧杯置电磁搅拌器上，浸入电极，搅拌，并自滴定管中分次滴加滴定液；开始时可每次加入较多的量，搅拌，记录电位；至将近终点前，则应每次加入少量，搅拌，记录电位；至突跃点已过，仍应继续滴加几次滴定液，并记录电位。滴定终点的确定用坐标纸以电位为纵坐标，以滴定液体积为横坐标，绘制EV曲线，以此曲线的陡然上升或下降部分的中心为滴定终点。或以EV为纵坐标，以滴定液体积(V)为横坐标,绘制-V曲线，与EV的极大值对应的体积即为滴定终点。也可采用二阶导数确定终点。根据求得的EV值，计算相邻数值间的差值，即为EV，绘制V曲线，曲线过零时的体积即为滴定终点。如系供指示剂变色域的选择核对，滴定前加入指示剂，观察终点前至终点后的颜色变化，以选定该品种终点时的指示剂颜色。电位滴定法选用2支不同的电极。1支为指示电极，其电极电势随溶液中被分析成分的离子浓度的变化而变化；另1支为参比电极,其电极电势固定不变。在到达滴定终点时,因被分析成分的离子浓度急剧变化而引起指示电极的电势突减或突增，此转折点称为突跃点。电位滴定仪作滴定分析时的使用方法：本仪器可以用于各种类型的电位滴定，用户根据不同的电极，插后面板的电极插孔，如有的电极不能直接插入Q9插孔中，则可用本仪器提供的Q9插头；连线用鳄鱼夹住电极头即可。A、按图1所示，装好滴定装置，将电磁阀两头的硅胶管分别用力套入滴定管和滴液管的接头上。B、将电磁阀插入仪器后部的插孔中，在滴定管中加入标准溶液。C、按“快滴”键，调节电磁阀螺丝，使标准液流下，赶走液路部分全部气泡。D、按“慢滴”键，同样调节电磁阀螺丝，使慢滴速度为每滴左右。?E、重新加满标准液，按短滴键，使滴定管中的标准液调节到零刻度。?F、选择开关置“预设”档，调节预设电位器至使用者所滴溶液的终点电位值，mv值和PH值通用，如终点电位为-800mv，则调节终点电位器使数显为-800，如终点电位为，则调节终点电位器使数显为850即可。?G、预设好终点电位后，选择开关按使用要求置mv或PH档，此时“预设”电位器就不能再动了。?H、用户在作滴定分析时，为了要保证滴定精度，不能提前到终点也不能过滴，同时又不能使滴定一次的时间太长，本仪器设有长滴控制电位器，即在远离终点电位时，滴定管溶液直通被滴液，在接近终点时滴定液短滴(每次约)逐步接近终点，到达终点时(±3mv或±)停滴，延时20秒左右，电位不返回即终点指示灯亮，蜂鸣器响。生物化学实验报告姓名：学号：专业年级：组别：生物化学与分子生物学实验教学中心实验名称氨基酸的薄层层析实验日期XX-10-22合作者评分实验地点指导老师第4实验室教师签名批改日期一、实验目的1.掌握薄层层析法的一般原理。2.掌握氨基酸薄层层析法的基本操作技术。3.掌握如何根据移动速率来鉴定被分离的物质。二、实验原理(一)薄层层析1.层析技术是利用化合物中各组分的物理性质的不同，使各组分不同程度地分布在两相中，随着流动相从固定相上流过，不同组分以不同速度而最终被分离。1)特点：分离效率高，能分离各种性质相类似的物质。不仅可用于少量物质的分离纯化，也可用于大量物质的分离纯化和制备。2)固定相：固定相是层析的一个基质。包括固体物质和液体物质，这些物质能与相关的化合物进行可逆性的吸附、溶解和交换作用。3)流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质移动的液体、气体等，都称为流动相。柱层析中一般称为洗脱剂，薄层层析时称为展层剂。4)分类按两相所处状态，可分为液相层析和气相层析，前者以液体为流动相，后者以气体为流动相。按操作形式不同，可分为柱层析、薄层层析和纸层析。按层析的原理不同，可分为吸附层析、分配层析、凝胶层析、离子交换层析和亲和层析等。今天要做的试验，根据原理属于吸附层析，根据操作形式又属于薄层层析，合到一起叫：吸附薄层层析。2.薄层层析法是色谱分析技术的一种一般是将固体吸附剂涂布在平板上形成薄层作为固定相。当液相在固定相上流动时，由于吸附剂对不同氨基酸的吸附力不一样，不同氨基酸在展开溶剂中的溶解度不一样，点在薄板上的混合氨基酸样品随着展开剂的移动速率也不同，因而可以彼此分开。3.硅胶吸附薄层层析1)吸附薄层中常用的吸附剂为氧化铝和硅胶:硅胶：表达式为SiO2·XH2O。层析用硅胶是一种多孔性物质，它的硅氧环交链结构表面上密布极性硅醇基，这种极性的硅醇基能和许多化合物形成氢键而产生吸附.2)硅胶吸附薄层层析的特点：硅胶的吸附能力比氧化铝稍弱，其吸附活性也与含水量呈负性相关。硅醇基显较弱的酸性，因而，硅胶只能用于中性、或酸性成分的分离，碱性成分不能用它分离。硅胶的活化温度通常为105110，不能过高。(二)氨基酸与茚三酮的显色反应茚三酮水化后生成水化茚三酮，它与氨基酸的羧基反应生成还原茚三酮、氨基醛，与此同时，还原茚三酮又与氨基茚三酮缩合生成紫红化合物而使氨基酸斑点显色。(三)混合氨基酸被分离后在薄层层析图谱上的位置用相对迁移率Rf值来表示。层析中，物质沿溶剂运动方向迁移的距离与溶液前沿的距离之比为Rf值。由于物质在一定溶剂中的分配系数是一定的，故移动速率也是恒定的，因此可以根据Rf值来鉴定被分离的物质。三、材料与方法：(一)1.1)2)3)4)5)6)2.1)2)3)4)5)6)(二)实验材料试剂分析样品：氨基酸混合液吸附剂：硅胶粘合剂：%的羧甲基纤维素钠氨基酸的异丙醇溶液丙氨酸、精氨酸、甘氨酸展开-显色剂仪器与器材层析板、尺子、铅笔烧杯、玻棒、量筒吹风机毛细管、层析缸药匙烘箱方法与步骤目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。