大肠杆菌ppt
大肠菌群类检测方法介绍,大肠菌群(Coliform),粪大肠菌群(Fecal Coliform),大肠杆菌(E.coli),肠杆菌科(Enterobactericeae),肠杆菌科四种指标菌的范围 （隶属关系）,食品中大肠菌群类及其检验, 大肠菌群（coliforms）：指一群在36条件下培养48h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌群主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。, 粪大肠菌群（Faecal coliform）：系指一群在44.5培养24h48h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。, 大肠杆菌（Escherichia coli）：大肠杆菌广泛存在于是人和温血动物的肠道中，能够在44.5发酵乳糖产酸产气、 IMViC生化试验为+ + - -或- + - -。包括：产肠毒素（ETEC）肠致病性（EPEC）肠侵袭性(EIEC) 肠出血性(EHEC),主要菌型：O157:H7,大肠菌群类检测方法,GB,SN,日本方法,VRB固体平板法,Deso固体平板法,显色培养基法,3M Petrifilm 测试片法,MPN Table,革兰氏染色,24±2h,44.5±0.5,粪大肠菌群检测的GB法,乳糖胆盐发酵管产气的培养物,EC肉汤,不产气,粪大肠菌群阴性,产气,EMB平板,18-24h,有典型菌落报告为阳性,36±1,back,44.5±0.5,IMVIC,back,营养琼脂斜面18-24h,back,back,back,back,法国标准化协会（AFNOR）认证 美国农业部（USDA）认证 美国食品和药品管理局（US FDA）认证 美国食品安全与检测机构（USDA FSIS）认证 日本食品安全法规标准分析方法 北美国家认证 加拿大健康保护协会认证 澳大利亚和新西兰食品安全认可方法 波兰标准化委员会（PKN）认证 智利农业部（SAG）认证 中国的GB和SN即将发布实施,国 际 官 方 方 法,3M测试片法检测食品中大肠菌群和大肠杆菌,3M PetrifilmTM 大肠杆菌/大肠菌群测试片 的检测原理,四唑翁指示剂 （tetrazolium）,-半乳糖苷酶,大肠菌群及大肠杆菌3M Petrifilm 检测法,接种1ml样品匀液到每张PetrifilmTM大肠菌群测试片,计数红色带气泡的菌落,报告大肠菌群数,36C1C,检 样 25g(mL）样品+ 225mL稀释液,只检测大肠菌群,大肠杆菌和大肠菌群同时检测,24 h2h,10倍系列稀释,接种1ml样品匀液到每张PetrifilmTM大肠杆菌/大肠菌群测试片,计数蓝色带气泡的菌落,报告大肠杆菌数,36C1C,24 h2h或48 h2h,计数蓝色带气泡和红色带气泡的菌落,报告大肠菌群数,含有改良的VRB培养基 目标菌落为红点带气泡 36 1C , 24 2 h 培养时叠放片数小于20 计数范围15-150 AOAC官方方法,3M PetrifilmTM 大肠菌群测试片,24 h得出大肠菌群数 肉、家禽和海鲜，24 h得出大肠杆菌数 其它食品，48 h得出大肠杆菌数 E. coli O157表现为大肠菌群,3MTM PetrifilmTM大肠杆菌/大肠菌群测试片,谢谢大家!,将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染液，染1min，水洗。滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗。滴加95%乙醇脱色约1530s，直至颜色液被洗掉。不要过分脱色，水洗。滴加复染液，复染1min，水洗，待干，镜检。结果： 革兰氏阳性菌呈紫色革兰氏阴性菌呈红色,革兰氏染色法：,back,IMVIC,色氨酸肉汤：在36±1培养24±2h后，加Kovacs氏试剂0.2-0.3ml,上层出现红色为靛基质阳性反应。MR-VP培养基：在36±1培养48±2h。以无菌操作移取1ml至13×100mm试管中，加5%-萘酚乙醇溶液0.6ml,40%氢氧化钾溶液0.2ml，和少许肌酸结晶，振摇试管后静置2h，出现伊红色为VP试验阳性。将MR-VP培养物的剩余部分再培养48h滴加5滴甲基红溶液。培养物变红则为甲基红试验阳性，变黄为阴性。Kovacs氏枸橼酸盐肉汤：36±1培养96h后记录有无生长。LST肉汤：于36±1培养48±2h，观察试管是否产气。,back,生化试验：菌落挑取三糖铁琼脂 蛋白胨水 半固体斜面 PH7.2尿素琼脂 KCN肉汤 赖氨酸脱羧酶试验培养基 克氏双糖铁琼脂培养过夜TSI底层产酸不产硫化氢， KCN阴性，尿素阴性大肠杆菌革兰氏阴性菌,
