显微制片中一些实用的小技巧
显微制片中一些实用的小技巧周建理工具：美工刀、木工锉、小锯、钢丝刷。在基层，显微鉴定面临两大难题，一是如何制作 一个特征明显方便观察的制片，二是如何在显微 镜下找到药材的鉴别点。今天我是想重点讲前一个问题，在这里给大家介 绍一下我个人的一些小的技巧。虽然是一些雕虫 小技，但也许比较实用。在显微鉴定这个已经十分成熟的技术面前，成败 的决定因素也许就是细节。我将分讲的几个 小技术1.如何对硬药材进行徒手切片刮片法2.如何将软的小的药材夹着切片用泡沫塑料3.如何做出更容易找到特征的粉末刀锯锉法4.如何进行叶表面制片磨片法5.无火加热水合氯醛烫片法6.景深合成法在显微拍摄和照片后处理上的应用一、如何在硬药材上刮出一片好切片水浸快刮黄芪切片方法：把药材切面做平，手指蘸一点清水抹在切面上 ，稍等片刻，用刀在切面上连切带刮地刮下一片薄片 来。原理：硬药材可以用水浸软，当把水蘸到切面时，水 会朝下浸润，形成上软下硬的一个介面，如果下刀， 只要朝下使点劲，你的刀自然就会在这介面上行走。 你会有连切带刮的手感，刮下一切片来。如何切得薄？关键是抢在合适的时候几秒到半分 钟，各药材不一样，自己体会。如果你保持刀是潮的，你可以继续切下去。锯出切面锉刀做平整出个平的切面用水将其切面浸润，13秒钟后，用刀连切带刎切出 薄片。可以用硬泡沫塑料挡在一侧，以保护安全。入水，刀蘸水，可接着切。切出满意的为止。一组地骨皮的切片地骨皮地骨皮地骨皮黄芪黄芪桑寄生桑寄生菟丝子的徒手切片二、如何将软的小的药材夹着切片巧用泡沫塑料把泡沫塑料 切一口子，把 泡软的药材放 在中间，可多 放几个 。用刀切出平面。把刀架在前面的泡沫上，轻轻下压，平 切。每一刀压力加大一点，连续切。会有 几刀切空，只要稍加压又能切到。最后前 泡沫会明显高于后面。再切平，可继续 切。 原理就是利用泡沫的弹性，造成切片 时只能切出薄片或切不到，很难切出 厚片的情况。只要反复切，就一定能 切到薄的片子。最后一点的泡 沫可不切下， 让切片积在其 中和刀片上。叶子先泡软， 切成条，卷叠 起来夹着切。如果叶子小或 窄，可片叠在 一起夹着切。用一稍粗一点的 棍扎一个洞，把植 物的茎塞进去（也 可把花、叶子等卷 成个棍形），可多 塞几根。也可用打 洞法夹片酸枣仁可塞可夹怕切到手的同仁们，硬 的材料可以夹着刮。北五味子这样切方便细小的种子类可粘在胶布条 子上，或粘在 胶水纸条上。剪下剪成以上的样子，折叠过来 ，两面都粘上，再卷成小条 ，塞入泡沫塑料中，最后就是切切下的片放入水中，选薄的用。枳壳种子的横切实例照片垂盆草茎横切垂盆草茎横切金钱草茎横切荷叶的横切决明子的横切益智仁种子横切局部三、如何做出容易找到特征的粉末刀锯锉法 先用钢 丝刷清 理木工 锉。把药材放在锉上轻轻 的磨，劲使大了粉末 会变粗的。溅出的粉 末多比较大，可以不 要。磨好后，在纸下 敲几下，粉末就出来 了。最后，再用钢丝刷将木工锉清理干净。也可用细齿 钢锯轻轻地 锯，取特定 部位（如节 ）处的粉末甘草木栓细胞的 专门制片只要轻轻地对甘草表面进 行摩擦，并轻轻转动。粉 末中的大部分将都是甘草 的木栓细胞。甘草韧皮部 的专门制片再对清理掉栓皮的甘草锉粉，粉 末绝大部分都是韧皮部了，集中 见到的是晶纤维。甘草木质部 的专门制片用刀削去形成层之外的部分，下 余的再磨粉，粉末的绝大部分将 是木质部，集中见到的是具缘纹 孔导管和网纹导管。这样的方法，有助于对药材显微的科学研究，也十分有助于 我们在检定工作中迅速找到我们需要看到的特征。如果想要细粉，可用这一类细钢锉。 最后强调一下，清理锉的锈和残渣，最好用钢丝刷。四、如何进行叶表面制片磨片法在叶、花、果实的表面显微观察时，往往最困难的 是如何获得足够薄的表面制片。可以把大叶 子剪成小片 ，小叶子直 接上去磨。 如果叶片过 于皱缩，可 先润后压平 ，干燥后再 磨。如果要看下 表面，就把 下表面朝上 ，如果要看 上表面，就 把上表面朝 上。拇指按下，在细钢锉上轻轻摩擦，一直把叶面的一小 部分磨到通透。用剪刀剪下磨薄的部分透化观察。磨后留下上表面的效果磨后留下下表面的效果这是磨后的柔毛淫羊藿的下表皮紫苏叶下表皮五、不用酒精灯加热透化制片烫板法：这是一个滴定用的加热保温烫板，也可用薄层板的加热显色用的烫板把温度调到水合氯醛-甘油溶液的沸点以下一点。根据浓度比不一样， 沸点也稍有别，约100105度，自己一试就知道了。将材料加水合氯醛-甘油溶液，盖上盖玻片，放在烫板上，加热，约1分 钟为轻度透化。约3分钟为中度透化。约5分钟为重度透化。最后用镊子把玻片推到另一块板上，冷却一下，就可以看显微了。如果发现片子上气泡特多。可以把温度调高一点，保持微沸，让气泡慢 慢地从盖玻片边缘逸出，几十秒到两分钟时间，可去掉大部分的气泡。黄柏六、如何克服显微摄影不清楚的问题景深合成法的应用做好制片后，现在 大都有电脑显微镜 可在观察中随时拍 摄。由于光学显微镜 有一个景深特别 小的问题。各特 征又很难得会在 一个平面上，这 样拍的显微图很 难得有大面积清 楚的地方。连单目的学生用 生物显微镜n普通显微镜加一个 电子目镜也一样用。比如这个理 枣仁照片， 它就是不清 楚的。我们用微调不同焦距下拍摄的，22个，没有一个清楚。目前世面已经出现多家景深合成的软件，这是合成后的。黄柏纤维（未合成 ）合成后的黄柏纤维（示纹孔）拍摄显微拍摄最大的问 题是景深太小，无 法获得清楚的照 片。我们采用固定 样品，动微调，拍 摄不同焦距的照 片。最近，景深合成技术日趋成熟，现在许多显微镜厂家 都已经使用或正在开发这一技术。转用PHOTOSHOP 合成逐渐成为过去。可以拍摄 到一组图 片这是繁缕 种子，共 拍摄24 张。但没 有一张是 完全清楚 的启动Bridge向PHOTOSHOP中导入需要制作的图片过去是用PHOTOSHOP合成后目前的软件有称Z轴合成对大面积的显微材料的多照片拼接合成目前的软件有称“X、Y轴合成”北五味子的合成这是槲寄生茎横切面间苯三酚 盐酸染色，再进行微性状景深 合成和拼接合成的图。中药微性状观察方法的一些新的进展：一、放大倍数更大从100倍到500倍，主要是利用金 相显微镜的内置光源的功能。 二、景深合成不用转到PHOTOSHOP，可以在显微 镜观察的过程中一步合成。这是某型号的金相显微镜(包括普通和偏光)这个“在Z轴的延伸”就是指 景深合成速度明显 加快了不同批次的鸡冠花子青箱子种皮表皮细胞鸡冠花子种皮表皮细胞同等条件下 拍摄，大小 明显有区 别。但不是 十分稳定。青葙子 鸡冠花子在金相显微镜下放大到500倍青葙子 鸡冠花子再用电脑放大到1000倍的微性状，青葙子表皮细胞垂周壁呈 节节样，鸡冠花子表皮细胞垂周壁光滑，沟槽明显。降香 又名：花梨木、降 香黄檀，来源：豆 科黄檀属植物降香 檀Dalbergia odorifera 心材这是胖大 海种皮的 显微横切面上 看是这样 的500倍下的 微性状谢谢各位！
