微生物学和寄生虫学质量控制
实验动物微生物质量与动物实验Page 2实验动物传染病流行的基本环节实验动物微生物学和寄生虫学分类合格动物群中常见微生物和寄生虫污染 及控制实验动物微生物学和寄生虫学质量检测Page 3传染源传播途径易感动物一、实验动物传染病流行的基本环节 Page 4传染源（1）人源性（2）动物源性引起传染的条件（1）要有病原性和一定的毒力（2）侵入体内的病原体要达到一定的数量 （3） 病原体要有适当的侵入门户Page 5传播途径切断传播途径是控制传染病的主要措施。（1）、直接传染：健康动物与患病动物（包括携带病原体动物）直接接触而感染。如狂犬病病毒、猴B病毒、艾滋病病毒等。水平传播：实验动物群体中互相的传播。传播途径包括消化道、呼吸道或皮肤粘膜创伤等。如沙门氏菌常经消化道感染；仙台病毒常经呼吸道；布氏杆菌病常由配种直接感染等。垂直传播：由母体通过胎盘将病原体传给胎儿，例如支原体、细小病毒等。Page 6间接传播（一）非生物性传播：a、经空气飞沫、尘埃传播；b、以饲料、垫料传播；c、经饮水和饮水用具传播；d、经笼器具传播。（二）生物性传播：a、节肢动物：苍蝇、蚊子、蟑螂、蚤、虱、蜱、螨等。 b、野生动物：野生啮齿类动物，常携带各种病原体，例如携带流行性出血热病毒的野鼠的尿污染实验动物的垫料、饲料。c、实验动物：从外部新购入的实验动物，未经严格检疫和隔离。d、饲养、实验人员不注意卫生防疫传染病原体；有些人兽共患病，也可经人传播给实验动物，例如结核、布氏杆菌病等。Page 7易感动物1）种类（品种） 2）年龄 3）营养状况 4）机体的抵抗力5）机体防御器官状况Page 8传染源、传播途径和易感动物是传染病传 播的三个基本环节，缺少任何一个环节，新的 传染病就不可能发生，也不可能造成传染病在 实验动物中的流行。而当传染病流行已经形成 时，切断任何一个环节，流行即告终止。传染源传播途径易感动物Page 9在医学和兽医学研究领域，疫苗接种和药物治疗是预防传染病的有效手段。 但是实验动物一般不采取疫苗接种和药物治疗，主要由于实验动物的特殊性：1、应用疫苗或治疗制剂可能干扰实验结果。2、经过治疗或免疫的动物，外表健康，但可能 是带菌或带毒者，可能成为潜在的传染源。3、对于小型实验动物，治疗措施可能在经济上不合算Page 10实验动物卫生防疫主要包括以下几个方面的内容：1、平时的预防措施2、发生疫病时的扑灭措施3、消毒措施4、隔离措施Page 11物理性消毒（1）高压蒸汽消毒：103.4 Kpa, 121.3 15-30min。可杀死芽孢 在 内的所有微生物。饲料、垫料、器具等消毒。 （2）高热煮沸：器械、笼具、水瓶等消毒100 (20min)。（3）干烤消毒：可达180-280(15min30min) ，消毒效果较好。（4）火焰消毒：温度可达300 ，主要用于不锈钢 笼具、金属器械、墙壁的消毒。 （5）照射：紫外线、-射线等，用于空气、饲料、垫 料和器具的消毒。Page 12化学消毒是使用化学药物喷洒、浸泡、熏蒸等，以达到消毒灭菌的目的。常用化学消毒方法包括液体消毒和蒸汽消毒。 （1）液体消毒剂：包括石炭酸、过氧乙酸、来苏水、次氯酸等。（2）熏蒸消毒：包括福尔马林和三聚甲醛等。 Page 13实验动物微生物微生物学和寄生虫学分类Page 14实验动物的体表、粘膜实验动物的体表、粘膜 和消化道内容物中微生物和消化道内容物中微生物共生微生物丛共生微生物丛病原体病原体条件致病条件致病烈性传染病烈性传染病对宿主有益对宿主有益对动物和实验对动物和实验 产生不良影响产生不良影响实验动物群实验动物群 全部毁灭全部毁灭影响人类健康影响人类健康Page 15二、实验动物微生物学和寄生虫学等级分类二、实验动物微生物学和寄生虫学等级分类普通动物（conventional animal）CV清洁动物（clean animal）CL无特定病原体动物（specific pathogen free animal) SPF无菌动物（germ free animal）GF悉生动物（gnotobiotic animal) GNPage 16普通动物conventional conventional animal(CVanimal(CV) )必须是不携带主要人兽共患病必须是不携带主要人兽共患病病病原体和原体和 动物烈性传染病的病原体。动物烈性传染病的病原体。Page 17饲养条件饲育在开放环境里,使用的垫料和饲料, 只消毒不灭菌;其饮水须符合城市饮用水标准 。适用范围只能用于教学实验和某些科研工作的预 实验，不能用于科学研究和发表论文的实验。Page 18清洁级动物（clean animal）CL亦称最少疾病动物（minimal disease animal)此类动物必须是不携带主要人兽共 患病原体和动物烈性传染病的病原体， 又不携带对动物危害大和对科学研究影 响大的病原体。Page 19饲养环境清洁级动物常来自屏障环境的SPF动物的后代或 降级。饲育使用的垫料、饲料、引用水和用具等均 应经过高压蒸汽消毒；或饮用水经过酸化，饲料经 过钴（co60）辐射灭菌。工作人员需穿无菌服进入 屏障环境进行饲养和实验。适用范围课题研究和论文发表，以及研制新药，生物制 品，保健食品，化妆品等科学实验。Page 20无特定病原体动物（specific pathogen free animal) SPF不携带主要人兽共患病原体和动物 烈性传染病的病原体；不携带对动物危 害大和对科学研究影响大的病原体；还 不携带主要潜在感染或条件致病菌和对 科学实验影响大的病原体的动物。Page 21饲养环境SPF动物的饲育，一般是先培育出无菌动物，然 后再将其后代转移到屏障环境中进行繁育建群。工 作人员需穿无菌服装才能进入屏障环境进行饲育或 试验操作。适用范围适用于大多数科研工作。Page 22无菌动物 （germ free animal）GF无菌动物是指：动物体内外无可检出的一切 生命体的动物。Page 23饲养环境子宫摘除术（剖腹产）饲育在隔离环境（隔离器内）一切用品经过严格包装、严格灭菌后，通过传递仓送入隔离器通过手套进行间接实验操作。Page 24悉生动物（gnotobiotic animal) GN动物体内外所携带的生命体是已知的Page 25隔离环境隔离环境GFGF动物动物植入植入GNGN动物动物污染污染GFGF动物动物植入污染污染屏障环境屏障环境SPFSPF动物动物Page 26普通级动物 清洁级动物 SPF级动物无菌动物 悉生动物Page 27项项 目目GFGFSPFSPFCVCV传传 染染 病病无无无无有或有或可能有可能有寄寄 生生 虫虫无无很少很少有或有或可能有可能有实实 验验 结结 果果准确准确较准确较准确有有疑问疑问应应 用用 动动 物物 数数少量少量少量少量多或多或大量大量长期实验效果长期实验效果可能好可能好可能好可能好困难困难死死 亡亡 率率很低很低低低高高长期实验存活率长期实验存活率约约100100约约90904040左右左右实验标准设计实验标准设计可能可能可能可能不可能不可能统统 计计 价价 值值很好很好较好较好不不准确准确实验结果的价值实验结果的价值很高很高高高有有疑问疑问不同微生物学等级的实验动物比较不同微生物学等级的实验动物比较Page 28实验小鼠和大鼠病毒学检测标准国家或国家或 国际组织国际组织动动 物物应应排除排除 病毒项目病毒项目ICLASICLAS小鼠小鼠/ /大鼠大鼠14/914/9中国中国小鼠小鼠/ /大鼠大鼠5+6/75+6/7芬兰芬兰小鼠小鼠/ /大鼠大鼠16/816/8日本日本小鼠小鼠/ /大鼠大鼠8/98/9美国美国小鼠小鼠/ /大鼠大鼠（9 9）10/810/8澳大利亚澳大利亚小鼠小鼠/ /大鼠大鼠13/813/8荷兰荷兰小鼠小鼠/ /大鼠大鼠11/1011/10Page 29小鼠应排除病毒项目 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒 汉坦病毒 鼠痘病毒 小鼠肝炎病毒 仙台病毒 小鼠肺炎病毒 呼肠孤病毒III型 小鼠细小病毒 小鼠脑脊髓炎病毒 小鼠腺病毒 多瘤病毒 Lymphocytic Choriomeningitis Virus Hantavirus Ectromelia Virus Mouse Hepatitis Virus Sendai Virus Pneumonia Virus of Mice Reovirus type III Minute Virus of mice Theilers Mouse Encephalomyelitis Virus Mouse Adenovirus Polyoma Virus Page 30大鼠应排除病毒项目 汉坦病毒 仙台病毒 小鼠肺炎病毒 呼肠孤病毒III型 大鼠细小病毒RV株 大鼠细小病毒H-1株 大鼠冠状病毒/大鼠延泪腺炎病毒 Hantavirus Sendai Virus Pneumonia Virus of Mice Reovirus type III Rat Parvovirus Rat Parvovirus Rat Coronavirus/Sialodacryoadenitis VirusPage 31实验动物微生物学标准国家或国家或 国际组织国际组织动动 物物细菌真菌细菌真菌 支原体支原体ICLASICLAS小鼠小鼠/ /大鼠大鼠13/1213/12中国中国小鼠小鼠/ /大鼠大鼠8+8/9+78+8/9+7芬兰芬兰小鼠小鼠/ /大鼠大鼠11+9/10+911+9/10+9日本日本小鼠小鼠/ /大鼠大鼠10/1010/10美国美国小鼠小鼠/ /大鼠大鼠（1616）13/1213/12澳大利亚澳大利亚小鼠小鼠/ /大鼠大鼠12/1212/12荷兰荷兰小鼠小鼠/ /大鼠大鼠7/187/18Page 32合格动物群中常见微生物和寄生 虫污染及控制Page 33普通级动物中弓形虫（Toxoplasma gondii）污染弓形虫是一种人畜共患的寄生虫，小鼠，大 鼠，地鼠，豚鼠，家兔和非人灵长类实验动物及猫 ，牛，羊，猪等都能感染。Page 34弓形虫是细胞内寄生虫，根据不同发育阶段分为五 型：滋养体和包囊出现在中间宿主体内，裂殖体，配子体和卵囊只出现在终宿主猫体内 。Page 35 传播途径 任何动物食入弓形虫的包囊，卵囊或活体，都能受到感染而患弓形虫病。 猫科动物的粪便中，常带有卵囊。可以污染草原、牧场、蔬菜、水果等。 猫的身上和口腔内常常有弓形虫包囊和活体。直接接触猫易受感染。狗的 身上和口腔内常有包囊或活体，养狗的人不小心可能感染。其他家畜、家 禽，如：鸡、鸭、鹅、猪、牛、马、羊等动物体内有时带弓形虫包囊和活 体。所以食用肉、蛋奶也可能感染，鱼肉体内有时也有弓形虫包囊或活体 。鱼也是一个传染源，另外某些吸血昆虫，叮咬人时也可以感染。 市售的各种肉制品、香肠、火腿肠、罐头也都可以成为传染源。奶制品、 奶油制品、蛋类制品、蛋糕、各类饼干、点心、冰点有时也能成为传染源 。Page 36滋养滋养 体体排出体外,发育成熟,具感染性卵卵 囊囊口,鼻,咽,呼吸道粘 膜,眼结膜和皮肤机 体 有 免 适 疫 宜发 育宿主体内无性繁殖, 引起发病急性力 条 无 件 症 下终宿 主受精宿主产生 无症状有免疫力
