川南高氟地区人群膝骨性关节炎患病状况及影响因素的抽样调查研究

骨科学专业优秀论文骨科学专业优秀论文 川南高氟地区人群膝骨性关节炎患病状况及川南高氟地区人群膝骨性关节炎患病状况及影响因素的抽样调查研究影响因素的抽样调查研究关键词：高氟地区关键词：高氟地区 膝骨性关节炎膝骨性关节炎 基因多态性基因多态性 危险因素危险因素 氟骨症防治氟骨症防治摘要：目的：通过本研究了解川南高氟地区人群膝骨性关节炎的患病状况，探 讨雌激素受体基因 Pvu和 Xba核酸限制性内切酶多态性及其他危险因素与川 南高氟地区人群膝关节骨性关节炎的相关性，探讨影响川南高氟地区人群膝关 节骨性关节炎的因素。 方法：采用分层随机抽样方法，对川南高氟地区古蔺 县 121 个行政村中的 6 个行政村 81 名当地居民患膝骨性关节炎情况进行调查， 并抽取问卷，提取血液标本，测定其跟骨超声骨密度值。对部分患者行膝关节 X 线检查及膝关节镜检查治疗。分析雌激素受体基因多态性与膝 OA 的相关性。 依据调查结果应用 SPSS130 软件包对膝关节骨性关节炎的危险因素进行分析。 采用美国风湿病学会（American College of Rheumatology，ACR）膝骨性关节 炎诊断标准和 Lequesne 制定的膝骨性关节炎严重性指数（The Index of Severity of Osteoarthritis，ISOA）进行评分，调查筛选出 41 例膝骨性关节 炎患者及 40 例对照组，取 EDTA 抗凝外周静脉血 200l，离心柱法提取人血白 细胞基因组 DNA，用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（Restriction fragment length polymorphismpolymerase chain reaction，PCR RFLP）的方法鉴定雌激素受体的基因型：1目的片段的 PCR 扩增：PCR 总体系 30l，含 5l 基因组 DNA、dNTP2l，超长链 Taq 酶 2U，10×Buffer3l。 应用全自动基因扩增仪，PCR 反应参数为：95预变性 3min，951min55 1min725min，扩增 30 个循环，727min，4保存扩增产物，通过 2%琼脂 糖凝胶电泳，溴化乙锭（Ethidium Bromide，EB）染色，紫外灯下检测。 2PCR 产物酶切：对 PCR 产物进行酶切，酶切总体系 20l，其中 PCR 产物 10l，限制性内切酶 Pvu、Xba各 5l 及相应内切酶缓冲液 2l，在 37恒温下水浴消化 20h，分别取 Pvu、Xba酶切产物各 6l 与加 6×上样 Buffer2l，点样至含 EB02g/ml 的 2%琼脂糖凝胶中，同时用 100bpDNA Ladder Maker 做对照，100V，60mA 电泳 30min，透射紫外灯下观察电泳结果、 拍照。3判断基因型：PCRRFLP 结果用小写字母表示具有酶切位点，命名为 p 或 x，用大写字母表示存在点突变而没有酶切位点，命名为 P 或 X。使用 Pvu酶切可区分出 3 种基因型：PP 型（终产物为 13 kb 大小的条带） ，Pp 型 （终产物为 13 kb，850 bp，450 bp 大小的 3 条带） ，pp 型（终产物为 850 bp，450 bp 大小的 2 条带） ，使用 Xba进行酶切可以区分出 XX 型（终产物为 13 kb） ，Xx 型（终产物为 13 kb，910 bp，390 bp 大小的 3 条带） ，XX 型 （终产物为 910 bp，390 bp 大小的 2 条带） 。 （图 5）分析雌激素受体基因多态 性与膝骨性关节炎的关系及各基因型在病例组与对照组的分布。 结果：川南 高氟地区膝 OA 的患病率为 506%，远高于平均水平，年龄（P=0049） 、吸烟 （P=0009）和氟斑牙情况（P=0032）与膝 OA 有显著相关性。81 例全部扩 增出 ER 基因。检测出 6 种酶切多态性，3 种 Pvu酶切基因型： PP、Pp、pp；3 种 Xba酶切基因型：XX、Xx、xx。其中 PP15 例，Pp40 例， pp26 例。XX5 例、Xx24 例、xx52 例。3 种 Pvu酶切基因型和 3 种 xba酶切 基因型可组成 9 种复合基因型，只检出 8 种复合基因型，复合基因型 ppXX 未检出。在对照组中 PP、Pp、pp 型各有 5 例、23 例、12 例，分别占对照组的 125%、575%、30%。病例组中 PP、Pp、pp 型各有 10 例、17 例、14 例，分 别占对照组的 244%、415%、341%。PP 型和 pp 型在病例组中的分布高于 对照组，Pp 型在病例组中的分布频率低于对照组，但差别没有统计学意义， Pgt;005。Xba酶切多态性在病例组中 XX、Xx、xx 型各有 2 例、11 例、 28 例，分别占病例组人群的 49%、268%、683%；在对照组中 XX、Xx、xx 型各有 3 例、13 例、24 例，分别占对照组人群的 75%、325%、60%。XX 型 和 Xx 型在病例组中的分布低于对照组，xx 型在病例组中的分布频率高于对照 组，但差别没有统计学意义，Pgt;005。 结论：1川南高氟地区膝 骨关节炎主要为氟性膝关节炎。2年龄、吸烟情况、氟斑牙情况与川南高氟地 区膝 OA 有较强相关性。3ER 基因多态性与川南高氟地区膝 OA 尚未发现有明 确相关性。4除结合当地防治氟骨症的改炉改灶政策外，本次调查的结果表明 加强对川南高氟地区人群的禁烟教育和指导，控制吸烟量，改进烤烟工艺，对 的预防氟性膝关节炎具有重要意义。正文内容正文内容目的：通过本研究了解川南高氟地区人群膝骨性关节炎的患病状况，探讨 雌激素受体基因 Pvu和 Xba核酸限制性内切酶多态性及其他危险因素与川南 高氟地区人群膝关节骨性关节炎的相关性，探讨影响川南高氟地区人群膝关节 骨性关节炎的因素。 方法：采用分层随机抽样方法，对川南高氟地区古蔺县 121 个行政村中的 6 个行政村 81 名当地居民患膝骨性关节炎情况进行调查，并 抽取问卷，提取血液标本，测定其跟骨超声骨密度值。对部分患者行膝关节 X 线检查及膝关节镜检查治疗。分析雌激素受体基因多态性与膝 OA 的相关性。依 据调查结果应用 SPSS130 软件包对膝关节骨性关节炎的危险因素进行分析。 采用美国风湿病学会（American College of Rheumatology，ACR）膝骨性关节 炎诊断标准和 Lequesne 制定的膝骨性关节炎严重性指数（The Index of Severity of Osteoarthritis，ISOA）进行评分，调查筛选出 41 例膝骨性关节 炎患者及 40 例对照组，取 EDTA 抗凝外周静脉血 200l，离心柱法提取人血白 细胞基因组 DNA，用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（Restriction fragment length polymorphismpolymerase chain reaction，PCR RFLP）的方法鉴定雌激素受体的基因型：1目的片段的 PCR 扩增：PCR 总体系 30l，含 5l 基因组 DNA、dNTP2l，超长链 Taq 酶 2U，10×Buffer3l。 应用全自动基因扩增仪，PCR 反应参数为：95预变性 3min，951min55 1min725min，扩增 30 个循环，727min，4保存扩增产物，通过 2%琼脂 糖凝胶电泳，溴化乙锭（Ethidium Bromide，EB）染色，紫外灯下检测。 2PCR 产物酶切：对 PCR 产物进行酶切，酶切总体系 20l，其中 PCR 产物 10l，限制性内切酶 Pvu、Xba各 5l 及相应内切酶缓冲液 2l，在 37恒温下水浴消化 20h，分别取 Pvu、Xba酶切产物各 6l 与加 6×上样 Buffer2l，点样至含 EB02g/ml 的 2%琼脂糖凝胶中，同时用 100bpDNA Ladder Maker 做对照，100V，60mA 电泳 30min，透射紫外灯下观察电泳结果、 拍照。3判断基因型：PCRRFLP 结果用小写字母表示具有酶切位点，命名为 p 或 x，用大写字母表示存在点突变而没有酶切位点，命名为 P 或 X。使用 Pvu酶切可区分出 3 种基因型：PP 型（终产物为 13 kb 大小的条带） ，Pp 型 （终产物为 13 kb，850 bp，450 bp 大小的 3 条带） ，pp 型（终产物为 850 bp，450 bp 大小的 2 条带） ，使用 Xba进行酶切可以区分出 XX 型（终产物为 13 kb） ，Xx 型（终产物为 13 kb，910 bp，390 bp 大小的 3 条带） ，XX 型 （终产物为 910 bp，390 bp 大小的 2 条带） 。 （图 5）分析雌激素受体基因多态 性与膝骨性关节炎的关系及各基因型在病例组与对照组的分布。 结果：川南 高氟地区膝 OA 的患病率为 506%，远高于平均水平，年龄（P=0049） 、吸烟 （P=0009）和氟斑牙情况（P=0032）与膝 OA 有显著相关性。81 例全部扩 增出 ER 基因。检测出 6 种酶切多态性，3 种 Pvu酶切基因型： PP、Pp、pp；3 种 Xba酶切基因型：XX、Xx、xx。其中 PP15 例，Pp40 例， pp26 例。XX5 例、Xx24 例、xx52 例。3 种 Pvu酶切基因型和 3 种 xba酶切 基因型可组成 9 种复合基因型，只检出 8 种复合基因型，复合基因型 ppXX 未检 出。在对照组中 PP、Pp、pp 型各有 5 例、23 例、12 例，分别占对照组的 125%、575%、30%。病例组中 PP、Pp、pp 型各有 10 例、17 例、14 例，分 别占对照组的 244%、415%、341%。PP 型和 pp 型在病例组中的分布高于 对照组，Pp 型在病例组中的分布频率低于对照组，但差别没有统计学意义，Pgt;005。Xba酶切多态性在病例组中 XX、Xx、xx 型各有 2 例、11 例、 28 例，分别占病例组人群的 49%、268%、683%；在对照组中 XX、Xx、xx 型各有 3 例、13 例、24 例，分别占对照组人群的 75%、325%、60%。XX 型 和 Xx 型在病例组中的分布低于对照组，xx 型在病例组中的分布频率高于对照 组，但差别没有统计学意义，Pgt;005。 结论：1川南高氟地区膝 骨关节炎主要为氟性膝关节炎。2年龄、吸烟情况、氟斑牙情况与川南高氟地 区膝 OA 有较强相关性。3ER 基因多态性与川南高氟地区膝 OA 尚未发现有明 确相关性。4除结合当地防治氟骨症的改炉改灶政策外，本次调查的结果表明 加强对川南高氟地区人群的禁烟教育和指导，控制吸烟量，改进烤烟工艺，对 的预防氟性膝关节炎具有重要意义。 目的：通过本研究了解川南高氟地区人群膝骨性关节炎的患病状况，探讨雌激 素受体基因 Pvu和 Xba核酸限制性内切酶多态性及其他危险因素与川南高氟 地区人群膝关节骨性关节炎的相关性，探讨影响川南高氟地区人群膝关节骨性 关节炎的因素。 方法：采用分层随机抽样方法，对川南高氟地区古蔺县 121 个行政村中的 6 个行政村 81 名当地居民患膝骨性关节炎情况进行调查，并抽取 问卷，提取血液标本，测定其跟骨超声骨密度值。对部分患者行膝关节 X 线检 查及膝关节镜检查治疗。分析雌激素受体基因多态性与膝 OA 的相关性。依据调 查结果应用 SPSS130 软件包对膝关节骨性关节炎的危险因素进行分析。采用 美国风