定抽颗粒治疗抽动秽语综合征的临床及机制研究

定抽颗粒治疗抽动秽语综合征的临床及机制研究作者：韩新民 朱先康 王敏华【摘要】 目的 探讨定抽颗粒的临床疗效和作用机制。方法 将60例患者随机分为两组各30例，观察组予以定抽颗粒口服，对照组予以泰必利口服。观察两组治疗前后抽动种类、频度改善情况及总体疗效；采用随机抽签分组法，将昆明小鼠72只分为正常组，模型组，高、中、低剂量定抽颗粒组，氟哌啶醇对照组，共6组，每组12只，分别观察各组小鼠治疗3周后小鼠运动行为和刻板行为的缓解程度。并用高效液相法测定各组小鼠脑内的单胺递质的含量。结果 定抽颗粒在改善抽动症种类、频度和总体疗效方面优于对照组（P<0.05）；定抽颗粒能明显抑制小鼠的运动行为和刻板行为，并能降低抽动小鼠的多巴胺（DA）、去甲肾上腺素(NE)的含量。其结果具有统计学意义。结论 定抽颗粒是治疗抽动秽语综合征的有效方剂；降低小鼠脑内DA、NE含量可能是定抽颗粒治疗拟抽动小鼠的部分作用机制。 【关键词】 多动秽语综合征/药物疗法； 定抽颗粒； 儿童； 动物，实验 【Abstract】 Objective To investigate the clinical effect of Dingchou granule on Tourette syndrome and its mechanism. Methods A total of 60 patients were randomly divided into 2 groups (treatment group and control group)，30 in each group.The patients in treatment group were administered with Dingchou granule，while the patients in control group were administered with tiapride.We observed tic category，frequency improvement and total effect in both groups before and after the treatment.Mice were randomly divided into 6 groups：normal group，model group，Dingchou granule group with high，moderate，low dose and haloperidol control group，12 mice in each group.We observed motor behavior and improvement of stereotyped behavior in each group 3 weeks after the treatment.HPLC was used to determine the contents of monoamine transmitter in the mice brains of each group. Results Improvements in tic category，frequency and total effect in Dingchou granule group were better than those in control group (P<0.05)；Dingchou granule could obviously inhibit motor behavior and stereotyped behavior and decrease the contents of DA and NE，so there was a statistical significance. Conclusion Dingchou granule is an effective prescription for Tourette syndrome；decreasing DA and NE contents can be one part of the mechanism of the prescription for tic disorder of mice. 【Key words】 Tourette syndrome/Drug therapy； Dingchou granule； Children； Animal experiment 抽动秽语综合征是一种以慢性多发性运动性抽动伴发声性抽动为特征的神经精神性疾病。该病的临床表现特点为慢性、波动性和多发性抽动，有不规则的发作间歇期，有时可因转移注意力而减轻，睡眠时症状消失，精神紧张时症状加重。本症多见于学龄儿童，男孩多于女孩。目前病因不明，西医对本病尚无特效疗法。本院应用定抽颗粒治疗抽动秽语综合征，取得较好疗效，并在临床观察的基础上，进行了实验研究以进一步明确其作用机制。现报道如下。 一、临床研究 1 资料与方法 1.1 临床资料 病历资料均来自200601200710南京中医药大学附属医院儿科抽动症专科门诊，参照DSM有关的Tourette综合征的诊断标准1，筛选出符合标准患儿共60例。根据入组时间获得随机号，按随机号所对应的分组接受治疗，每组各30例，观察组男25例，女5例；对照组男24例，女6例；年龄：观察组412岁27例，1318岁3例；对照组412岁22例，1318岁8例；病程：观察组12年17例，23年6例，34年3例，4年4例；对照组12年11例，23年10例，34年6例，4年3例。 1.2 病情判断标准 1.2.1 抽动频度 （1）极少：不是每天发生；(2)常常：每天都发生，但可有3 h的停歇期；(3)频繁：醒后每小时都发生；(4)持续：间歇时间不超过10 min。 1.2.2 抽动强度 （）轻微：不易察觉；(2)稍强：比正常动作稍强；(3)略强：未超过正常最大程度；(4)很强：明显超过正常动作；(5)极强引人注目，甚至自伤。 611分为轻度；1216分为中度；1721分为重度。见表1。 表1 病情轻重程度评定标准 1.3 病情轻重比较 观察组轻度7例、中度22例、重度1例；对照组轻度5例、中度25例、重度0例。两组年龄、性别、病程、病情等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。 1.4 治疗方法 (1)观察组给予定抽颗粒1袋（含生药胆南星6 g，郁金、石菖蒲各10 g，远志6 g，天麻10 g，柴胡6 g，钩藤10 g，菊花5 g，白芍、生地各10 g，江阴天江制药厂生产的颗粒剂混合而成）口服，12周为1个疗程；(2)对照组给予泰必利每片100 mg，412岁每次1/2片，每日2次，第3周起每次1片，每日2次；1318岁每次1片，每日2次，第3周起每次2片，每日2次。12周为1个疗程。 1.5 观察指标 观察各组治疗前后抽动种类、频度、强度等改变情况以及治疗后两组总疗效积分情况；每两周来院取药、观察1次，并填写病例观察表。 1.6 统计学处理 描述性统计分析，定性指标以频数表，百分率或构成比描述；定量指标以均数，标准差或中位数、最大值、最小值描述。两组对比分析，定性资料采用2检验、秩和检验。定量资料符合正态分布用t检验（组间进行方差齐性检验，以0.05作为检验水准，方差不齐进行校正的t检验），不符合正态分布用秩和检验。假设检验统一使用单侧检验，给出检验统计量及其对应的P值，以P<0.05作为有统计学意义。 2 结果 2.1 疗效评定标准 （1）痊愈：1个疗程结束时症状基本消失，积分减少95.00，并且3个月以上未复发；(2)显效：1个疗程结束时抽动明显减少，积分减少66.67，<95.00；(3)进步：1个疗程结束时抽动有所改善，积分减少33.33，<66.67；(4)无效：1个疗程结束时抽动无改善或有加重。 2.2 总疗效分析 见表2。 表2 两组治疗抽动秽语综合征的疗效比较注：两组治疗后总疗效比较Z=-2.361，P=0.018，差异有统计学意义，观察组优于对照组。 2.3 两组抽动各项评分疗效比较 2.3.1 两组抽动种类疗效比较 见表3。表3 两组治疗抽动秽语综合征抽动种类的疗效比较注：两组抽动种类疗效比较，t=2.234，P=0.029，差异有统计学意义，观察组优于对照组。 2.3.2 两组抽动频度疗效比较 见表4。表4 两组治疗抽动秽语综合征抽动频度的疗效比较 注：两组抽动频度比较，t=3.018，P=0.004<0.05，差异有统计学意义，观察组优于对照组。 二、实验研究 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 动物 昆明小鼠72只，雄性，体质量1822 g，上海斯莱克实验动物有限责任公司许可证号：SCXK(沪)20070005。 1.1.2 药品 氟哌啶醇(阳性药)：上海信谊九福药业有限公司提供(批准文号：国药准字：H31021234)；定抽颗粒：由江阴天江药业有限公司提供；亚氨基二丙腈（IDPN）：上海至鑫化工有限公司提供；柠檬酸、乙酸钠、辛烷磺酸钠、二正丁烷、乙二胺四乙酸二钠均由上海化学试剂采购公司提供；甲醇为色普醇，由江苏汉邦科技有限公司提供；多巴胺（DA）、高香草酸（HVA）、二羟基苯乙酸（DOPAC）、5羟色胺、5羟吲哚乙酸（5HIAA）、去甲肾上腺素（NE）均购自美国Sigma公司，实验用水为双蒸水。 1.1.3 实验仪器 高效液相色谱仪（HPLC，LC10AD）、460电化学检测器为日本岛津产品；碳18反相色谱柱为江苏汉邦科技有限公司提供；DY891型电动玻璃匀浆机由宁波新芝科器有限公司提供；高速冷冻离心机由德国Heraeus提供；天平由上海精密科学仪器有限公司提供。 1.2 分组及给药 实验设空白对照组、模型组、阳性药物组（氟哌啶醇1.38 mg/kg）、定抽颗粒高剂量组（5.76 g/kg）、中剂量组（2.88 g/kg）、低剂量组（1.44 g/kg）。参照Diamond等2方法建立TS的小鼠模型：除空白对照组外，余均连续腹腔注射IDPN 330 mg/kg 7 d，空白对照组腹腔注射等量生理盐水7 d。自注射当日起各组均灌喂给药3周，对照组和模型组给予等剂量的蒸馏水。 1.3 实验方法 1.3.1 刻板行为测试 将动物放入一较大的观察笼内，动物适应5 min后，以Diamond等2TS动物模型中对刻板行为的评分方法，在最后1次给药后1 h，进行双盲观察1 h，5 min记录1次，并记录总分。评分标准及方法：0分:无刻板行为；1分:旋转行为；2分:头和颈部的上下运动过多；3分:头、颈部的上下运动过多加旋转行为；4分：头向侧摆合并头和颈部的上下运动过多。 1.3.2 运动行为评分 刻板行为评分结束后，立即将动物放入一较大的观察笼内，动物适应5 min后，进行双盲观察1 h，5 min记录1次，并记录总分。评分标准及方法：0分：安静或正常活动；1分：过度兴奋；2分：探究行为增加；3分：跑；4分：跑和跳。 1.3.3 高效液相色谱法对脑组织单胺类神经递质及其代谢产物的测定 标准品配制：各标准品都溶于流动相中，浓度为0.4 g/L，使用时分别稀释到0.04 g/L，进样量20 L。 色谱条件：江苏汉邦科技有限公司碳十八反相色谱柱，洗脱液：80 mmol/L磷酸氢二钠，0.5 mmol/L 乙二胺四乙酸二钠，10%甲醇。调pH为4.3，经过滤脱气后使用，流量0.9 mL/min。电化学检测器工作电压0.7 V，测定温度25