实验动物学：动物最后一次课重点

1、实验动物：经人工培育，对其携带的微生物及寄生虫实行控制，遗传背景明确或来源清楚，用于科学研究、教学、生物制品或药品鉴定以及其它科学实验的动物。2、实验用动物：用于实验的动物的统称，它包括实验动物、家畜、家禽和野生动物。实验动物来源于野生动物或家畜家禽，但又不同于野生动物和家畜家禽。大鼠生物学特物性分类：哺乳纲、啮齿目、鼠科、大鼠属。由褐家鼠变种而来。齿式1003/1003。性情温顺，易于调教，嗅觉发达，味觉差，对营养缺乏敏感，喜安静，噪声和不适光照对繁殖影响大，对环境敏感。汗腺不发达；无胆囊。肝再生能力强，不能呕吐。染色体12对，寿命2.53年。妊娠期1923天，性周期45天。体温39（38.539.5）。心率475（370580）次/分。呼吸85.5（66114）次/分。环境设施及控制设施分类1隔离系统：以隔离器为主及其它附属装置组成的饲养系统，送入空气洁净度为100级。2屏障系统：设有恒温、恒湿、除菌换气系统的相对封闭环境，空气洁净度达1000级，室内保持正压，有严格的微生物控制。3开放系统：饲养室与外界相通，无空气净化装置。环境控制1.    人员管理2.    物品控制3.    环境设施监护4. 设施运行与管理第五章 实验动物遗传分类和应用n 按基因分类 1.不同基因类型: (1)远交种 封闭群: 品种 (2)突变种近交系:至少经过20代以上连续全同胞或亲子交配，品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先的动物群。近交系数达98.6%以上。 不同近交系:近交而固定的基因不同,遗传差异很大。亚系(Substrain)的形成：近交系由于残余杂合性和突变而导致部分遗传组成的改变 指一个近交系内各个分支的动物之间,已发现或十分可能存在遗传差异。支系(Subline)的形成近交系或亚系内部，由于非常可能存在环境,母方或细胞的差异。原因:1.引种到另一实验室2.技术处理:受精卵或胚胎移植(e),人工喂养(h),卵巢移植(o),冷冻保存(p),人工代乳(fh),代乳(f),近交系特征(1) 基因位点纯合性、（2）遗传组成同源性、（3）表型一致性、（4）长期遗传稳定性、（5）遗传特征的可分辨性、（）遗传组成的独特性（个体性）、（）敏感性、（）近交衰退, （）分布广泛性、（）背景资料和数据的完整性。重组近交系(Recombinant inbred strain, RI)由两个无血缘关系的近交系杂交后，得到F2代，分组分别经20代以上的兄妹交配而育成的近交系系列动物。祖系:提供亲代的两个近交系同源突变近交系(Coisogenic inbred strain)指两个近交系，除了一个指明位点等位基因不同外，其它遗传基因全部相同的品系。更注重突变基因的研究同源分离近交系(Segregating inbred strain)在培育近交系的同时，采取一定的交配方法，迫使个别基因位点上的基因处于杂合状态。与突变系区别:仅培育方法不同近交系命名(一) 普通近交系1.用14个大写英文字母表示:A,DBA,2.大写字母为首,结合数字:C3H,C57BL3.非正规的命名:广泛认同 129, 6154.近交代数:F表示 A(F78) AKR(F?+12)5.优先权,符号书写要全(二)重组近交系祖系中间加大写X:AKRXC57BL/6 简写: AKRXB-2 AKRXB-3 不明确,易混淆(三)同源突变近交系名称加连字号和基因符号(斜体书写) C57BL/6J-bg 杂合状态:用“+”代表野生型基因 C57BL/6J-bg/+ 纯合状态: C57BL/6J-bg/bgM表示突变代数:C57BL/6J-bg(F58+M+F20)(六)亚系的命名1.名称加研究人员或机构名称 A/He He:Heston博士 C57BL/6J J(Jax):Jakson实验室2.亚系符号:数字或小写字母 A/HeCrgl/1 A/HeCrgl/2C57BR/a C57BR/cd(七)支系的命名1技术处理:名称加小写字母 奶母代乳f,人工喂养h,卵巢移植o 受精卵或胚胎移植e,人工代乳fh 冷冻保存pC3HfC57BL C57BL/6peCBA/N2.去除或植入病毒:植入+,去除- C3H/He-MTV+,C3H/He-MTV-3.引种到另一单位:加斜线或双斜线C57BL/6J/Lac C57BL/6J/Lac 实际中直接写缩写符号:C57BL/6JLac封闭群（Closed colony）:是以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个种群，在不从外部引入新的血缘条件下，至少连续繁殖4代以上。每代近交系数 F增加量少于1%，即:F<1%杂交一代动物（F1-Hybrid） :由 二个不同近交杂交所生的第一代动物。杂合子遗传均一,表型相同习惯写法:母系X父系F1 C57BL/6XDBA/2F1 ->B6D2F1 B6D2F1与D2B6F1区别: 1.Y染色体2.母性因素:细胞质成分,子宫环境,母乳实验动物的等级分类普通动物(Conventional animals, CV) 清洁级动物(Clean animals, CL) 无特殊病原体动物无菌动物(Germfree animals,GF)普通动物(Conventional animals, CV)： 是在微生物学控制上要求最低的动物，要求不携带人兽共患病和动物烈性传染病的病原。饲养于开放系统。清洁级动物(Clean animals, CL)：除普通动物应排除的病原外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原。饲养于屏障系统或IVC系统中无特殊病原体动物（Specific pathogen free animals,SPF动物）：指动物体内无特定的微生物和寄生虫存在，但带有非特定的微生物和寄生虫的动物。除了普通动物和清洁级动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科研实验干扰大的病原。来源于无菌动物.，饲养在屏障系统或IVC系统中.无菌动物(Germfree animals,GF)：用现有的检测技术在动物体内外的任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫的动物。无菌动物必须是生来就是无菌的。饲养于隔离系统。悉生动物（Gnotobiotic animals,GN）:指在无菌动物体内植入已知微生物的动物。又称已知菌动物或已知菌丛动物。饲养于隔离系统。分为单菌（Monoxenie），双菌(Dixenie)，三菌(Trixenie)，多菌(Polyxenie)动物。流行性出血热（epidemic hemorrhagic fever,EHF)传播方式+对实验的危害 选择题主要发生于大鼠的烈性传染病，也是一种人畜共患的自然疫源性传染病。 自然宿主主要是小型啮齿动物，如姬鼠属、家鼠属、仓鼠属和小鼠属的动物。传播：气溶胶吸入。接触宿主动物及排泄物。症状： 人：发热，发热，头痛，肌肉痛，结膜水肿充血（点状），出血性肾损伤（肾综合症出血热），最后肾衰竭，出现尿毒症，严重可导致死亡。大小鼠：多为隐性感染，长期排毒。大鼠一般无临床症状，也不死亡。一般不影响实验进程。狂犬病病毒(1)前驱期(沉郁期)(2)兴奋期(狂暴期)(3)麻痹期鼠痘病毒危害性 危害小鼠 隐性较多脱脚病（Ectromelia):四肢,尾和头部肿胀,溃烂,坏死,甚至脚趾脱落.小鼠的烈性传染病.致病性强, 全身感染,爆发流行,传播快,病死率高.急性:突然死亡,使实验中断慢性:全身症状,实验结果混乱.污染环境,广泛传播.隐性:无临床症状,但实验因素:实验性结核,X射线,化学毒素,组织移植,肿瘤,运输等可激活病毒而流行大剂量内毒素或脾切除,可改变吞噬细胞的反应,降低吞噬细胞功能,增加易感性.仙台病毒(Sendai virus) 传播方式：呼吸道+直接接触危害性免疫干扰:严重影响体液和细胞介导的免疫应答.致瘤作用干扰:感染后遗留的组织学改变酷似浸润性肺癌,易误诊.抑制氨基甲酸乙酯诱发肺腺瘤.感染DBA/2小鼠,白血病病毒不能在脾内复制,不发生白血病.生殖影响:对着床前受精卵及早期胚胎具有亲噬性,使胚胎死亡.妊辰:45天:胚胎吸收.1112天:妊期延长,产后24小时内乳鼠死亡率升高.全身症状:类似感冒,打“呼噜”被毛粗乱,弓背，发育迟缓,体重下降,易继发支原体感染.主要引起呼吸道疾病,肺炎,还可引发全身感染.传播快,流行广,呈急性肺炎变化.仔鼠,幼鼠发病.成年鼠呈隐性感染.兔出血症病毒？沙门氏菌 人畜共患1.爆发型:45天内大批死亡2.亚急性型:行为呆滞,腹泻 710天死亡3.慢性型:下痢为主要症状,哺乳期小鼠发病率高达70%BALB/c敏感 CDF1不敏感弓形体:人兽共患病,小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠、犬和猴为中间宿主，猫为终末宿主。 常无明显症状。人：多数为无症状的隐性感染实验动物：少数被毛疏松不整，淋巴结肿大，出现流产或死胎现象。a.先天性:流产,死胎,婴儿弓形虫病症状b.获得性:最常见饲料的消毒高温高压灭菌法：最常用最可靠的方法，要求121 ，1.0Kg /cm²,15分钟以上。会造成营养损失。干热灭菌法：置烤箱内70-80 ，6小时。这种方法营养损失极大，消毒后饲料会变得干硬，从而适口性下降，同时花费时间，最少用射线照射灭菌法：采用Co60-射线照射,灭菌总剂量为35Mrad。这种方法营养损失最少，也最方便，有条件的话应当首选。但太昂贵，不便推广。药物熏蒸灭菌法：用化学药品如氧化乙烯消毒剂的气雾对饲料饲料进行熏蒸消毒。但是操作麻烦，又因饲料中会残留有害物，也不太好人类疾病动物模型：医学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物实验对象和相关材料。意义1.避免人体实验造成的危害。2.可研究平时不易见到的疾病.3.可提供发病率低,潜伏期和病程长的疾病动物模型.4.克服复杂因素，增加方法学上的可比性。5.样品收集方便，结果易于分析。6.有利于更全面地认识疾病的本质。动物模型的分类按产生原因分 (1)诱发性动物模型：物理、化学、生物因素，复合致病因素。(2)自发性动物模型：实验动物未经任何人工处置,在自然条件下自发产生或由于基因突变的异常表现通过遗传育种手段保留下来的动物模型.近交系、突变系。(3)抗疾病动物模型(4)生物医学动物模型按模型种类分 按系统范围分 (1)疾病的基本病理过程动物模型 各种疾病共同性的一些病理变化过程模型(2)各系统疾病动物模型 与人类各系统疾病相应的人类疾病动物模型按中医药体系分类影响动物模型的因素1.致模因素2.动物:种类,品系,年龄和体重,性别,生理状况和健康因素3.实验技术:季节,昼夜变化,麻醉深度,手术技巧,实验给药,对照组4.环境和营养基因突变动物及应用内分泌及代谢:KK小鼠已发现糖尿病小鼠:ob/ob,db/db,杂交wellesley,新西兰obese