色谱法在医学临床中的应用

色谱法在医学临床中的应用反向高效液相色谱法是色谱中的一种特种技术。应用本法研究药物在正常人体内的药动学，具有简便，迅速，准确等特点。RP-HPLC-UV的分析检测方法，该方法不需要特殊的设备，而且分析方法的稳定性好，精密度高，时间段，过程简单，可以作为药物定量分析方法。自从反相高效液相色谱法应用以来，有关此理论和实际应用的文献已经大量出版。目前，反相高效液相色谱法已经为许多实验室的常规手段。理论概要 建立反相高效液相色谱法测定人体内某部位药物浓度。化合物坚持扭转高水流动相色谱法柱喝反相高效液相色谱法列高有机流动相洗脱。在反相高效液相色谱法或何物分离的基础上他们的疏水性。肽可以分开运行的有机溶剂的线性渐变。研究运行6060梯度chromatographing未知时。6060梯度，梯度开始接近100的水和坡道在60分钟内以60的有机溶剂。大部分肽长度在10至30个氨基酸残基洗脱时间梯度达到30的有机。 医学上的应用 1.用药后的房水进行定量测量： 眼内药代动力学实验：双眼滴入眼液，将获取的房水用反相高效液相色谱法进行定量测量。结果滴眼后不同时间测定的房水中的药物浓度不同，实验结果提示局部点眼获得的房水浓度低于对大多数真菌的最低抑菌浓度说明单独点眼效果不好。所以应配合全身用药，改进用药途径增加眼内穿透力，以及增加点眼次数来克服此弊端。因此频繁点眼也是增加眼内穿透性，缩短病程的重要手段。病例病程较长滴眼次数过少可能事原因之一。 2.测量人体组织液中药物浓度： 本研究采用乙酸乙酯直接提取血浆样品，操作简便，提取后样品中杂质干扰少，各药物的萃取回收率高，均在75%以上，且通过有机溶剂的提取和浓缩，测定的灵敏度进一步提高。由于乙酸乙酯比重较轻，与血浆混合后不易乳化，且液面处于上层，所以实验操作更方便。在进行流动相条件筛选时，考察不同配比的分离效果，发现在甲醇：水65:35时，各色谱峰及内标间分离效果好，且峰形尖锐，柱效高，完成一次测定只需15min。选择230nm波长是经过分析发现目标成分在230nm紫外吸收系数均比较大，可以提高灵敏度。由于本方法流动相中无缓冲盐和改性试剂，因此测试过程中平衡和冲洗色谱系统的时间比较短，有利于提高测定效果，更合适临床应用。 3.药物腹腔注射在家兔房水中的药代动力学研究： 测定腹腔注射药物后不同时间家兔房水中的质量浓度，计算其药代动力学参数，研究药代动力学特点。最新样品的处理和流动相选择，以甲醇处理样品和选择甲醇：水：磷酸缓冲液或甲醇：水为流动相的报道较多。也有选用高氯酸处理血样和甲醇：水：冰醋酸为流动相的报道。我们采用高氯酸沉淀放水中的微量蛋白，一甲醇：水：冰醋酸=35:65:0.2为流动相，色谱柱为Diamonsil C18不锈钢柱，在波长为250nm紫外光下对腹腔注射药物量浓度的测定。通过高氯酸空白，防水空白和房水溶解药物标准品对照测定，以及回收率测定为87.60，日内RSD为4.0，日间RSD为5.32，无其他峰干扰。结果表明，本方法具有特异，灵敏，快速等优点，使用于对房水药物质量浓度的测量。4.药物在玻璃体内注射的药代动力学研究：取玻璃体样品，用反相高效液相色谱法测定玻璃体腔内N质量浓度。用DAS软件计算主要的药代动力学参数。增殖性玻璃体视网膜病变的治疗主要是通过手术促使增生性病变的视网膜复位，但仍有10左右的患者术后发生增殖性玻璃体视网病变。因为玻璃体手术虽然能切除已形成的增生膜，但不能完全取出增生细胞，甚至会刺激细胞分化，增生，又形成增殖性玻璃体视网膜病变。所以，药物防治增殖性玻璃体视网膜病变是非常必要的。近年来多种抗细胞增生药或抗炎药防治增生性玻璃体视网膜病变的实验研究取得了一些进展，主要有抗肿瘤，抗过敏，降血压，酪氨酸激酶抑制剂等，但是目前在临床上仍无理想药物可供使用。 正相离子对色谱的应用正相离子对色谱的分离机理主要基于被分离化合物的极性基团和固定相极性基团相互作用的差别 .基于这一特点 , 正相离子对色谱较适用于用反相离子对色谱难于分离的诸如异构体分离分析.根据被分离样品的极性进行逐类分离.正相离子对色谱在临床分析中的应用由于临床分析所要求的分析方法灵敏、 快速、 准确 , 而且对样品的适用范围广, 正相离子对色谱, 特别是高效液相色谱能满足要求, 所以得到较为广泛的应用 .Patel , Yagnesh P 等用正相离子对色谱法模拟测定抗生素 .Svensson J O等用该法测定血浆和尿中可待因及其代谢物 . 正相离子对色谱在药物分析中的应用在医学分析领域中, 药物分析一直占有举足轻重的地位.特别是近年来合成药物的快速发展和天然中成药的兴起 , 药物分析工作者常需要运用现代分析手段来分离分析药物中的各种成分.其中离子对色谱就是一种普遍 、 常用的分析手段.药物中, 特别是合成药物中, 常有多种异构体共存于产品中.但对于药效来说 , 有些药物中只有某种异构体有效 , 其余异构体无效或是有毒的.这就需要将异构体进行分离、 分析 .而将异构体进行分离分析最常用的手段就是正相离子对色谱 .Spöhrer U 等用该法分离双复磷的顺和反异构体.此外 , 正相离子对色谱在药物的一般分析中也得到广泛的应用 .Dash , A lekha K 等用子对色谱分析了磺胺米隆.韩俊等用离子对HPLC 测定了活络灵胶囊中非那宗 、 维生素 B 1 和维生素 B 6 的含量 .廖斌等用该法测定了昔奈福林含量 .Yamato , Susumu 等用该法同时测定马来敏中的那敏及其马来酸盐.Troskosky , JoA 等用该法测定了 Dy (HP DO3A)中的痕量镝. 反相离子对色谱的应用反相离子对色谱中, 由于流动相极性大于固定相极性 , 并且在流动相中加入对离子试剂 , 所以在反相离子对色谱的分离分析中溶质、 溶剂、对离子之间同时存有静电力和分子间作用力 .所以它非常适合于分离离子性和中性分子的混合物.而在医学分析中 , 中性分子和离子性物质的混合物是较常见的被分析对象 .因而反相离子对色谱也是医学分析中的一种常用分离分析手段. 反相离子对色谱在临床分析中的应用谢君等用该法测定了动物血浆中的 ERFX和其主要代谢物 CPFX.Da Silva , Cristina P 等用该法测定了细胞内的环状ADP 核糖水平 .Johnston, John J 等用该法测定了动物组织中的七的宁.陈雪梅等用该法测定兔脑中的磷酸腺苷 .反相离子对色谱在药物分析中的应用屠洁等以该法测定了可待因和马来酸盐及麻黄碱.梁改玲等则用该法测定吡哌酸锌药用软膏中锌的含量 .精品 Word 可修改 欢迎下载 精品 Word 可修改 欢迎下载