沙枣颗粒剂抗腹泻作用研究

第 8 页 共 8 页沙枣颗粒剂抗腹泻作用研究沙枣颗粒剂抗腹泻作用研究买尔旦·马合木提1，2 古丽仙·胡加2 麦合苏木·艾克木1 ， 新疆医科大学1附属肿瘤医院，2药学院药剂/物化教研室，新疆，乌鲁木齐，830011摘要摘要 目的：目的：验证沙枣颗粒剂的抗腹泻作用 方法：方法：分别用番泻叶、蓖麻油致小鼠腹泻模型,墨汁胃肠推进运动实验、新斯的明致小肠运动亢进实验，以腹泻指数、稀便率、小肠推进率为指标，观察沙枣颗粒对以上模型的影响；分别用二甲苯致小鼠耳肿实验、醋酸诱发小鼠扭体实验，观察颗粒剂的抗炎、镇痛功效。结果：结果：沙枣颗粒剂可减少番泻叶、蓖麻油致腹泻小鼠的腹泻指数和稀便率，抑制正常及小肠运动亢进小鼠的胃肠道推进运动(P3)，统计时先逐个统计每一堆稀便的级数，然后将该鼠所有稀便级数相加，除以稀便次数得稀便的平均级数；腹泻指数：腹泻指数：稀便与稀便平均等级的乘积。2.1.12.1.1 对番泻叶引起小鼠腹泻的影响对番泻叶引起小鼠腹泻的影响 取小鼠 60 只，雌雄各半，体重(20±2.0)g，随机分 6 组，每组 10 只，分别设为用药高、中、低剂量组、空白对照组，阳性对照(思密达)组和模型组，禁食12h后，每组分别灌胃给药，空白对照组给予同体积的生理盐水，1h 后除了空白对照组外对，其他各组分别灌胃8%番泻叶混悬液0.3ml/只，分笼，每鼠一笼，笼下铺置吸水纸(滤纸)，记录排便次数，观察上述各项指标。2 21.1. 2 2 对蓖麻油引起小鼠腹泻的影响对蓖麻油引起小鼠腹泻的影响 方法同上，相应各组给予 0.3ml/只蓖麻油。2.22.2 肠功能影响试验肠功能影响试验8，9第 8 页 共 8 页2.2.1 对正常小肠推进运动的影响取 40 只小鼠，随机分为4 组，分别为给药高、中、低剂量组和空白对照组，禁食 12h 后各组分别灌胃给药。空白对照组给予同体积的生理盐水，30min 后对空白组以及给药组分别灌胃墨水0.5ml/只，30min 后脱臼处死，打开腹腔分离肠系膜，剪取上端至幽门、下端至回盲部的肠管，置于托盘上。轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度作为“小肠总长度总长度” 。从幽门至墨水前沿的距离作为墨水在肠内推进百分率。从幽门至墨水前沿的距离作为墨水在肠内推进百分率。墨水推进率(%)=墨水在肠内推进距离(cm)/小肠全长(cm)×100%2.2.22.2.2 对新斯的明引起的小肠推进机能亢进的影响对新斯的明引起的小肠推进机能亢进的影响 方法同上，相应各组给肌肉注射新斯的明 0.2ml/10g。2.3 抗炎作用抗炎作用102.3.1 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响取小鼠 50 只，雌雄各半，随机分成 5 组，每组 10 只，分别为对照组，阿斯匹林（阳性对照）组，给药组（高、中、低剂量组） 。各组每天 ig 给药 1 次，连续 3天，容量 0.5ml/只，对照组给以等容量蒸馏水。末次给药后 1h 将 0.05ml 二甲苯均涂在小鼠右耳两面致炎，在左耳作对照。致炎后 2h 后将小鼠脱颈椎处死，用直径6mm 的打孔器分别在两耳同一部位打下圆形耳片，立即称重，计算肿胀度(mg)及肿胀抑制率(%)。肿胀度(mg)=右耳耳片重(mg)-左耳耳片重(mg) ，肿胀抑制率(%)=（空白对照组平均耳片重-给药组平均耳片重）/空白对照组平均耳片重×100%2.3.22.3.2 扭体法镇痛实验扭体法镇痛实验11小鼠 50 只，雌雄各半，随机分成 5 组，每组 10 只，分别为对照组，阿斯匹林（阳性对照）组，给药组（高、中、低剂量组） 。各组每天 ig 给药 1 次，连续 3 天，第三天灌胃给药后 30 分钟，各鼠每只腹腔注射 0.5%新鲜配制的醋酸液 0.3ml，观察 20 分钟内各组出现扭体反应(腹部内凹，伸展后肢，臀部抬高)小鼠数及各鼠扭体反应次数，并计算扭体次数减少百分率。扭体次数减少百分率=（空白对照组平均扭体反应次数-给药组平均扭体反应次数）/对照组平均扭体反应次数×100%3 3实验结果实验结果3.13.1 止泻试验3.1.13.1.1 对番泻叶致小鼠腹泻的影响空白组与模型组比较，稀便率与腹泻指数的差异均有统计学意义(P<0.01)，说明造模型成功；给药组与模型组比较，稀便率与腹泻指数的差异均有统计学意义(P<0.01)，即 3 个剂量沙枣颗粒的腹泻指数和稀便率均小于模型组；给药组与思密达阳性对照组比较，稀便率与腹泻指数的差异也有统计学意义(P<0.05)，但稀便率与腹泻指数均大于阳性对照组，见表 1。第 8 页 共 8 页表表 1 1 对番泻叶致小鼠腹泻的影响对番泻叶致小鼠腹泻的影响(±S±S，n=10)n=10)x组别剂量(g/kg)稀便率腹泻指数空白对照组00模型组0.74±0.10*1.04±0.17*阳性对照组60.47±0.140.57±1.1430.46±0.120.61±1.131.50.54±0.080.67±0.12给药组0.750.62±0.130.73±0.0.09注：与空白组比较，* P<0.01；与模型组比较P<0.01；与阳性对照组比较， P<0.053.1.23.1.2 对蓖麻油致小鼠腹泻的影响空白对照组与模型组比较，稀便率与腹泻指数的差异均有统计学意义(P<0.01)，说明造模型成功；给药组与模型组比较，稀便率与腹泻指数的差异均有统计学意义(P<0.01)，即三个剂量沙枣颗粒的腹泻指数和稀便率均小于模型组；给药组与思密达阳性对照组比较，稀便率与腹泻指数的差异也有统计学意义(P<0.05)，但稀便率与腹泻指数均大于阳性对照组，见表 2。表表 2 2 对蓖麻油致小鼠腹泻的影响对蓖麻油致小鼠腹泻的影响(±S±S，n=10)n=10)x组别剂量(g/kg)稀便率腹泻指数空白对照组00模型组0.76±0.05*1.01±0.18*阳性对照组60.49±0.140.64±0.1930.48±0.150.62±0.121.50.55±0.0.070.69±0.09给药组0.750.64±0.110.75±0.14注：与空白组比较， * P<0.01；与模型组比较P<0.01；与阳性对照组比较， P<0.05，3.23.2 对肠功能的影响对肠功能的影响3.2.1 对正常小肠道推进运动的影响给药组与空白组比较，3 个剂量组的小肠推进率差异有统计学意义(P<0.01)，即 3 个剂量沙枣颗粒均可抑制小鼠正常小肠运动；而且 3 个剂量组的抑制小肠推进作用呈一定的量效关系，剂量越大，抑制推进率差越强，见表 3。表表 3 3 对小鼠正常小肠推进运动的影响对小鼠正常小肠推进运动的影响(±S±S，n=10)n=10)x组别剂量(g/kg)小肠长度(cm)墨水推进距离(cm)推进率(%)空白对照组-47.40±1.3329.20±1.0855.28±1.15346.90±2.2119.43±1.2841.15±1.61*给药组 1.547.60±2.1722.88±1.6348.08±1.64*第 8 页 共 8 页0.7547.30±1.6324.50±1.8851.18±1.12*注：与空白组比较，* P<0.013.2.2 对新斯的明致小肠推进机能亢进的影响对新斯的明致小肠推进机能亢进的影响给药组与空白组比较，3 个剂量组的小肠推进率差异有统计学意义(P<0.01)，即 3 个剂量沙枣颗粒均可抑制小鼠正常小肠运动；而且 3 个剂量组的抑制新斯的明新斯的明致小肠推进机能亢进的致小肠推进机能亢进的作用呈一定的量效关系，剂量越大，抑制推进率差越强，见表 4。表表 4 4 对小鼠小肠亢进推进运动的影响对小鼠小肠亢进推进运动的影响(±S±S，n=10)n=10)x组别剂量(g/kg)小肠长度(cm)墨水推进距离(cm)推进率(%)空白对照组-48.20±1.335.10±1.2872.84±2.15346.80±2.2822.51±1.0848.10±2.11*1.547.50±2.2725.98±0.9354.46±1.64*给药组0.7548.10±1.7328.33±1.8858.90±1.62*注：与空白组比较，* P<0.013.33.3 抗炎作用抗炎作用3.3.1 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响与空白组组比较，各给药组的肿胀度明显减小(P<0.01)。与阿司匹林组比较，各给药组的肿胀抑制率均小于阿司匹林组(P<0.01),给药组的肿胀抑制率有较明显的量效关系,即剂量越大，肿胀抑制率越强，见表 5。表 5 沙枣颗粒对小鼠二甲苯致耳肿胀的影响(±S±S，n=10)n=10)x组别剂量(g/kg)肿胀度(mg)肿胀抑制率(%)空白对照组-15.36±0.73-阿斯匹林组0.25.23±0.4865.91±0.3537.27±0.52 * 52.67±0.841.59.36±0.56 * 39.06±0.75给药组0.7511.27±0.62 *26.62±1.3注：与空白对照组比较， * P<0.01；与阳性对照组比较， P<0.01。3.3.2 对醋酸诱发小鼠扭体反应的影响与对照组比较，各给药组的扭体次数明显减少(P<0.01)。与阿司匹林组比较, 各给药组扭体次数减少百分率均小于阿司匹林组(P<0.01),但给药组的扭体次数减少百分率与给药剂量呈明显的量效关系。即剂量越大，扭体次数减少百分率越高，见表 6。表表 6 6 沙枣颗粒对醋酸诱发小鼠扭体反应的影响沙枣颗粒对醋酸诱发小鼠扭体反应的影响(±S±S，n=10)n=10)x第 8 页 共 8 页组别剂量(g/kg)20min 内扭体反应次数扭体次数减少百分率(%)空白对照组37.7±2.21-阿斯匹林组0.211.8±1.5468.7±1.12319.1±1.19* 49.33±0.841.522.5±1.08* 40.31±1.16给药组0.7526.5±2.41*29.7±0.89注：与空白对照组比较， * P<0.01；与阳性对照组比较 P<0.01。3 3讨论讨论沙枣在民间用于以腹泻为主的消化道疾病疗效肯定，但关于功效的记载，几乎完全是各种手册中记载的或者相互引用的，缺乏实验研究的基础资料。本文参照治疗泄泻中药的药效学研究指南 ，进行了止泻试验、肠功能影响试验、抗炎和镇痛试验。结果表明，沙枣颗粒能减少番泻叶、蓖麻油所致腹泻小鼠的腹泻指数和稀便率，抑制正常与推进功能亢进小鼠小肠运动，抑制二甲苯引起的耳肿，醋酸诱导的小鼠扭体反应。以上作用呈一定的剂量依赖性。提示，沙枣颗粒剂具有抗腹泻功效和一定的抗炎、镇痛作用。腹泻是胃肠道机能障碍时常见的一种症状，根据其病理基础，实验中选用大肠刺激性致泻剂番泻叶，小肠刺激性致泻剂蓖麻油，引发腹泻症状。思密达(即双八面体蒙脱石)，是临床上比较常用的止泻药物，口服后可均匀地覆盖在整个肠腔表面，并可吸附多种病原体，避免肠细胞被病原体损伤，具有多重作用机制。鉴于尚未寻得理想的抗腹泻天然药物作为阳性对照，因此，本实验中以此作为阳性对照药。腹泻指数是反映腹泻程度的指标，既能表达稀变量的变化，又能表达质的改变，因此具有更强的可比性，能较全面和客观的反映药物的抗腹泻作用。为了使统计指标时减小误差，采用了以下规定12稀便的区分以滤纸上有无污迹为标准。稀便次数：以每粒或每堆(不能分清粒数者)为一次。级数直径的测量：圆形者测其直径；椭圆形或不规则形状则测其最长和近似圆的直径，两数相加除以 2。观察时间：给造型剂后 8 小时内，观察时每一小时换一次滤纸。沙枣颗粒的主要成分是鞣质，鞣质药理活性是其与生物体的蛋白质、多糖、核酸等相互作用的最终体现，大部分药理活性都归因于收敛性13。鞣质能凝固微生物体内的原生质，形成痂膜，可减少分泌和防止感染，有抑菌作用。内服可用于治疗胃肠道出