采样及样品制备技术

采样及样品制备技术采样及样品制备技术（五）采样及样品制备技术A、 选择题1、接种禽流感灭活疫苗后，进行免疫效果监测时，在家禽免疫后 天，随机采集家禽血清样品 30 份。 （C）C.21 天 2、下面不能作为样品保存液的是 。 （B）B 蒸馏水 3、牛海绵状脑病病原检测时采取下面哪种组织（A）A. 脑 4、液态样品包装时不可超过容量的 。 （C）C. 80% 5、采集血液样品用于动物血清学诊断时，采集双份血清监测比较抗体效价变化的，第一份血清采于病的初期，采集第二份血清应间隔 。 （B）B. 2-3 周 6、死亡动物的内脏病料采取，最迟不超过死后 小时。 （D）D. 6B、 判断题1、采取供病理切片的组织病料时，应将典型病变部分及相连的健康组织一并切取。 （）2、制作组织脏器材料抹片时，先用镊子夹持局部，然后以灭菌或洁净剪刀取一小块，夹出后将其新鲜切面在玻片上压印或涂成一薄片。（）3、欲作病毒分离的材料，最好在冷藏的条件下（装有冰块或干冰的冷藏瓶） ，立刻送到实验室。 （）4、急性死亡的家畜解剖之前，必须用显微镜检查其血液涂片中是否有炭疽杆菌存在。 （）5、采集乳汁，一定要采集最初所挤的 34 股奶。 （×）6、怀疑发生口蹄疫时，水疱液必须采自未破的水疱，不加任何保存液。 （）7、若检查消化系统寄生虫，需采取 5-19g 新鲜粪便。 （）8、作组织学检查的样品不能冷冻。 （）9、血液染色涂片一般用革兰氏染色。 （×）10、脏器抹片要作姬姆萨染色，可用甲醇固定。 （）11、检测狂犬病病原时应采取唾液和脑。 （）12、实质脏器在短时间不能送到实验室的，如为供细菌检查的，应放于灭菌流动石蜡或灭菌的 30%甘油生理盐水中保存。 （）13、进行血清学检验的乳汁可以冻结、加热或强烈震动。 （×）14、用于寄生虫检验的粪便样品以冷藏不冻结状态保存。 （）15、采集病料做病原菌检验时，应在药物未治疗前采取。 （）16、血液样品在采集前一般禁食 8 小时。 （）C、 简答及问答题1、采集血清用于实验室检测，对于血清质量有何要求？ 答：血清应未腐败（新鲜） 、无溶血、清亮透明（无明显沉淀物） 、未凝固或未完全凝固、体积足够检测与样品备份。 （应回答其中 3 点以上）2、简述采集活体牛、羊 O-P 液（咽食道分泌物）的技术要求？答：牛、羊 O-P 液的采集技术要求：被检动物在采样前禁食（可饮少量水）12 小时；采样探杯在使用前经装有 0、2%柠檬酸或 1%-2%氢氧化钠溶液的塑料桶中浸泡 5 分钟，再用与动物体温一致的清水冲洗探杯后使用，每采完一头动物，探杯要重复进行消毒并充分清洗。采样时动物应站立保定，将探杯随吞咽动作送入食道上部 10-15 厘米处，轻轻来回抽动 2-3 次，然后将探杯拉出。如采集的 0 -P液被反当胃内容物严重污染，要用生理盐水或自来水冲洗口腔后重新采样。取出 8-10 毫升 O-P 液，倒入含有等量细胞培养液或磷酸缓冲液的灭菌广口瓶中，充分摇匀加盖封口，放冷藏箱及时送检，未能及时送检应置于-30。3、采样的一般原则（1）凡是血液凝固不良，鼻孔流血的病死动物，应耳尖采血涂片，首先排除炭疽，炭疽病、死的动物严禁剖检。（2）采样时应从胸腔到腹腔，先采实质器官做到无菌，避免外源性的污染，最后采集污染的组织，如胃肠组织、粪便等。（3）采取的病料必须有代表性，采取的组织器官应病变部位明显。采取病料时应根据不同的疫病或检验目的，采其相应血样、活体组织、脏器、肠内容物、分泌物、排泄物或其他材料。病因不明时，应系统采集病料。（4）病料应在使用治疗药物前采取，用药后会影响病料中微生物的检出。死亡动物的内脏病料采取，最迟不超过死后 6 h(尤其在夏季)，否则，尸体腐败，难以采到合格的病料。（5）血液样品在采集前一般禁食 8 h，采集血样时，应根据采样对象、检验目的及所需血量确定采血方法与采血部位。（6）采样时还应考虑动物福利，并做好个人防护，预防人畜共患病感染。（7）防止污染环境，防止疫病传播，做好环境消毒和废弃物的处理。4、采样前应当准备好哪些用品、材料和试剂？答：1、器械：采样箱、保温箱或保温瓶、解剖刀、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、碘酒棉、注射器及针头等；样品容器包括小瓶、玻片、平皿、离心管及易封口样品袋、塑料包装袋等；试管架、铝盒、瓶塞、无菌棉拭子、胶布、封口膜、封条、冰袋等。 2、采样记录用品：不干胶标签、签字笔、记号笔、采样单、采样登记表等。3、保存液：甘油盐水缓冲液、肉汤、PBS 液、双抗、抗凝剂等。4、防护用品 。5、在口蹄疫诊断中，应采集哪些组织样品？用于病毒分离、鉴定的样品以发病动物(牛、羊或猪)未破裂的舌面或蹄部、鼻镜、乳头等部位的水泡皮和水泡液最好。对临床健康但怀疑带毒的动物可在屠宰后采集组织样品如淋巴结、脊髓、肌肉等作为检测材料。6、高致病性禽流感病原学检测采集什么(部位)样品？活禽病料应包括喉气管拭子和泄殖腔拭子，最好是采集喉气管拭子。小珍禽用拭子取样易造成损伤，可采集新鲜粪便。死禽采集气管、脾、肺、肝、肾和脑等组织样品。7、进行疑似高致病性禽流感样品采集时，应准备哪些器具和试剂？（1）采样器具：解剖刀、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、碘酒棉、注射器及针头、无菌棉拭子、动物检疫器械箱等。（2）样品容器：西林瓶、平皿、离心管、易封口样品袋、塑料包装袋等。（3）运输容器：试管架、塑料盒（离心管专用） 、铝饭盒、瓶塞、胶布、封口膜、封条、冰袋。（4）记录用具：不干胶标签、签字笔、圆珠笔、记号笔、采样单、记录本等。（5）防护材料：一次性手套、乳胶手套、防护服、防护帽、胶鞋等。8、当疑似有新城疫发生时，应从发病禽或死亡禽采集哪些病料进行检测？病料如何保存？发病禽：采集气管拭子和泄殖腔拭子（或粪便） ；死亡禽：以脑为主；也可采集脾、肺、气囊等组织。采集的样品应尽快处理，如果没有处理条件，样品可在 4 保存 4天；若超过 4 天，需置-20保存。9、动物结核病进行细菌性检查时，可采集哪些样品？死畜可采淋巴结及其他组织。活畜可采其痰、乳、精液、子宫分泌物、尿和粪便。10、如何采集畜禽肠管及肠内容物样品？肠管的采集：用线将病变明显处（约 5-10 厘米）的两端双结扎，从两端剪断，置于灭菌容器中，冷藏送检。肠内容物样品的采集：选择肠道病变明显部位，取内容物，用灭菌的生理盐水轻轻冲洗；也可烧烙肠壁表面，用吸管扎穿肠壁，从肠腔内吸取肠内容物，放入盛有灭菌的 30%甘油盐水中。11、采集全血时的注意事项有哪些？血样品必须是脱纤血或是抗凝血。抗凝剂可选肝素或 EDTA，枸橼酸钠对病毒有微毒性，一般不宜采用。以冷藏状态立即送实验室。必要时，可在血中按每毫升加入青霉素和链霉素各 500-1000 IU，以抑制血源性或采血中污染的细菌。12、对牛、马、羊、猪、家禽的采血部位各有哪些？牛、马、羊从颈静脉、尾静脉、乳房静脉采血；猪从前腔静脉、股静脉、桡头静脉、隐静脉采血，用量少时也可以从耳静脉抽取；家禽从翅膀静脉或心脏用注射器抽取血液。13、进行蓝耳病的 RT-PCR 检测可采取哪些样品？肺、扁桃体、淋巴结和脾等组织样品；新鲜精液或冷冻精液；血清、血浆、全血或细胞培养物。