地奥心血康对脑缺血再灌注损伤的保护作用研究
1地奥心血康对脑缺血再灌注损伤的保护 作用研究作者：王学廷 孟丽娟 王淑英 田敏 李正斌 李艳 王建刚【摘要】 目的观察地奥心血康（DAXXK）对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用结扎大鼠双侧颈总动脉造成急性脑缺血模型，随后再灌注。将大鼠随机分为 3组，即正常对照组、模型组（缺血再灌注组）、DAXXK 组。以 DAXXK 0.5%、0.2 ml/10 g 连续灌胃 7 d，第 8 天除正常对照组外，其余各组复制大鼠脑缺血再灌注模型，测定脑匀浆超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量和脑组织含水量。结果 DAXXK 组与模型组比较，脑匀浆 SOD 活性显著增高（P0.01），MDA 含量显著降低(P0.01)，脑组织含水量治疗组显著降低（P0.01）。结论 DAXXK对脑缺血再灌注损伤有保护作用。 【关键词】 地奥心血康 脑缺血再灌注 超氧化物歧化酶 丙二醛 脑指数Abstract：ObjectiveTo study the protective effect of DAXXK on cerebral ischemia- reperfusion injury. MethodsThe animals (rats) were divided into three groups randomly: normal contrast group, cerebral ischemia-reperfusion injury group, DAXXK treatment group. The rats of DAXXK group were given DAXXK (0.5%,0.2 ml/10 g) by oral gavage once a day.SOD, MDA in brain and cerebral homogenate water content were determined. ResultsCompared with ceremal ischemia reperfusion group DAXXK could increase the activity of SOD and decrease the level of MDA in brain tissue and brain water content(p0.01).ConclusionDAXXK might have a protective effect against the damage of cerebral ischemia-reperfusion injury.Key words：DAXXK; Cerebral; Ischemia-reperfusion injury; SOD; MDA缺血性脑病是临床常见病，致残率高，因此，研究和开发高效低毒的治疗缺血性脑病的药物具有重要的临床意义。地奥心血康（DAXXK）是由中科院成都生物研2究所从野生草本植物薯蓣科的黄山药之根茎中提取的甾体总皂苷精制而成的纯中药制剂，主要含有 8 种甾体皂苷，其主要成分为原薯蓣皂苷，占药物成分量的 30%，研究表明其具有活血化淤、行气止痛、宣痹通阳、补益气血等功能，主要用于治疗心绞痛、冠心病等心肌缺血疾病，临床应用广泛。近年来临床观察到 DAXXK 对缺血性脑血管疾病有一定疗效，对脑梗塞和椎基底动脉供血不足具有良好的改善椎基底动脉供血不足症状、促进脑血液循环作用，有效率高达 90%和 100%1，但报道病例少且缺乏基础研究。本实验通过 DAXXK 对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用的研究，为 DAXXK 在脑血管疾病的临床用药提供理论依据。1 材料1.1 药品与试剂 DAXXK 由成都地奥制药集团有限公司生产，批号 2304057，在实验前用生理盐水配制成 0.5%的溶液备用。丙二醛（MDA）试剂盒（批号2004.0107）、超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒（批号 2004.0506）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）试剂盒（批号 2004.0311）, 均由南京建成生物研究所提供。1.2 动物 Wistar 大鼠 30 只，体重 200250 g，雌雄兼用。由河南省实验动物中心提供。合格证号 0000831。2 方法2.1 动物分组及处理取大鼠随机分为正常对照组、模型组、DAXXK 组。DAXXK治疗组用 DAXXK 0.5%、0.2 ml/10 g，连续 7 d 灌胃。2.2 手术方法各组大鼠以 25%乌拉坦 1.0 g·kg-1 腹腔注射麻醉,颈部分离双侧颈总动脉和迷走神经，丝线结扎阻断血流 100 min，然后松结，恢复血流灌注 50 3min，造成大鼠急性脑缺血再灌注模型2。断头处死动物迅速取半脑称重（湿重），并置 100烤箱烘干称重，按下式计算大脑半球含水量：含水量（%）=（湿重-干重）/湿重×100%。取另半球至生理盐水于冰浴中制备匀浆，采用羟胺氧化法测定 SOD活性；硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量。2.3 统计学处理应用 SAS 软件包分析,实验数据均以±s 表示,组间比较用 t 检验。 3 结果地奥心血康对大鼠脑缺血再灌注损伤时脑含水量、脑匀浆 SOD、MDA 的影响见表 1。表 1 各组脑含水量、脑匀浆 SOD、MDA 数的比较4 讨论缺血再灌注损伤是指机体器官缺血一定时间后再恢复血流灌注，组织损伤反而进行性加重。脑组织缺血性损伤在临床上比较常见，如急慢性脑血管意外等，可导致脑细胞水肿坏死。其作用机制与氧自由基大量产生、钙超载及中性粒细胞聚集等有关3。脑缺血再灌注时因循环障碍及能量代谢紊乱等原因产生大量氧自由基，引起细胞功能紊乱，膜结构和功能丧失，线粒体破坏，神经元坏死；内源性抗氧化系统即SOD 活力下降，脑组织细胞生成大量的 MDA4，使脑细胞水肿坏死。本实验结果表明，脑缺血再灌注损伤时脑组织中 SOD 活性较正常组显著降低，而 MDA 含量显著升高；用地奥心血康（DAXXK）预处理后脑组织中 SOD 活性较正常组显著升高，而 MDA 含量显著降低，说明 DAXXK 可通过提高缺血时脑组织中 SOD 等抗氧化酶的活性，清除氧自由基，抑制脑组织局部脂质过氧化反应，减轻氧自由基对脑组织的损害，从而对脑缺血损伤有保护作用5，6。4在脑缺血早期，局部神经元蛋白合成停止，神经元发生去极化，Ca2+内流增加，从而引起脑细胞内钙超载，并使 Na+-K+-ATP 酶的活性降低，导致氧自由基显著增多。而缺血再灌注后加剧大量 Ca2+内流，细胞外 Ca2+浓度降低，脑血管阻力增加，进一步加重脑水肿及继发的脑血管损伤。实验结果表明，DAXXK 可显著降低脑含水量，说明 DAXXK 可明显减轻脑水肿，可能是通过抑制细胞内钙超载，抑制 Ca2+在脑组织内聚集，改善脑的循环功能及能量代谢过程，提高 Na+-K+-ATP酶的活性，保证脑内离子稳定，防止脑缺血引起的损伤，具有钙离子拮抗作用7。综上所述，DAXXK 在脑缺血再灌注损伤过程中，通过清除氧自由基、抗氧化、减少脂质过氧化、阻断 Ca2+内流等作用，来减轻脑细胞的损伤，对脑组织细胞起保护作用。这为地奥心血康在缺血性脑病的临床用药提供了理论依据。【参考文献】1 杨雪洁，杨迎暴，罗景慧，等. 地奥心血康的药理与临床J.山东医药工业，2003，22（2）：30.2 孔晓龙，蒋伟哲. 龙眼丹参对脑缺血再灌注所致损伤的保护作用J.广西医科大学学报，2004,21(3):356.3 赵 明，王洪新. 脑缺血再灌注损伤机理及药物保护的研究进展J. 锦州医学院学报，2002，23（5）：72.4 梁 卉. 丹参抗脑缺氧缺血/再灌注损伤机制的实验研究进展J. 辽宁药物与临床，2004，7（2）：103.55 任 宏，程建萍，龙启才，等. 地奥心血康保护心肌缺血再灌注损伤的研究现状J. 中国药房，2003，14（6）：373.6 李 艳，孟丽娟，王淑英，等. 地奥心血康对急性脑缺血的保护作用J.中国临床康复，2006，10（11）：48.7 孟丽娟，陈彩萍，白亚夫，等. 镁对犬肺、脑缺氧损害的保护作用J.河南医学研究，1998, 7 (4): 306.
