大黄中游离蒽醌的提取与分离和鉴定

实验一实验一 大黄中游离蒽醌的提取与分离和鉴定大黄中游离蒽醌的提取与分离和鉴定实验编号实验编号: :1日期日期: : 学时数学时数: : 6 学时地点地点: : 任课教师任课教师: :实验目的实验目的: :掌握从大黄中提取和分离游离蒽醌的方法实验原理实验原理: :大黄中有多种游离蒽醌及其苷类,总含量约 2-5%。主要有大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚以及它们的葡萄糖苷等。从大黄中提取分离游离蒽醌时,先用 20%硫酸加热使苷类水解，保留滤饼，滤饼用乙醚加热回流提取总蒽醌苷元（游离蒽醌） ，提取液作 TLC 鉴识。实验对象实验对象: :大黄主要仪器、试剂主要仪器、试剂: :电热套、烧杯、20%硫酸、薄层硅胶 G 、0.5%CMC-Na。实验操作步骤实验操作步骤: : 酸水解：取大黄 10g ,粉碎，加 20%硫酸水溶液 100ml，水浴上加热 3-4 小时,抽滤,滤饼水洗后自然干燥。铺薄层硅胶 G 板: 薄层硅胶 G :0.5%CMC-Na(1:3)实验注意事项实验注意事项: : 加热温度不要太高。 溶液保持微沸，防止药渣炭化。 不断搅拌。后记后记: :实验一实验一 大黄中游离蒽醌的提取与分离和鉴定大黄中游离蒽醌的提取与分离和鉴定实验编号实验编号: :2日期日期: : 学时数学时数: : 6 学时地点地点: : 任课教师任课教师: :实验目的实验目的: :1.掌握从大黄中提取和分离游离蒽醌的方法。2.掌握蒽醌类的色谱鉴别方法。实验原理实验原理: :大黄中有多种游离蒽醌及其苷类,总含量约 2-5%。主要有大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚以及它们的葡萄糖苷等。从大黄中提取分离游离蒽醌时,先用 20%硫酸加热使苷类水解，保留滤饼，滤饼用乙醚加热回流提取总蒽醌苷元（游离蒽醌） ，提取液作 TLC 鉴识。实验对象实验对象: :大黄滤饼主要仪器、试剂主要仪器、试剂: :电热套、圆底烧瓶、冷凝管、乙醚、硅胶薄层板、石油醚、乙酸乙酯实验操作步骤实验操作步骤: : 总羟基蒽醌苷元的提取：取干燥滤饼，放入 100ml 圆底烧瓶中，加入乙醚 50ml,回流提取 34 小时，得乙醚提取液。乙醚提取液经薄层层析检查有大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚和大黄酚。薄层板为硅胶 G-CMC-Na,展开剂为石油醚（60-90）乙酸乙酯（：） ，直立展开。实验注意事项实验注意事项: : 加热回流时电热套电压小于 50v。取石油醚（60-90）7ml,乙酸乙酯 3ml,混合均匀。 。 控制点样量，注意点样斑点位置。仔细观察斑点、溶剂前沿移动距离。后记后记: :结论：在可见光下可看到 4 个斑点，Rf 最大的黄色斑点为大黄酚和大黄素甲醚的混合物，其余 3 个斑点依 Rf 由大到小分别为大黄素（橙色斑点） ，芦荟大黄素（黄色斑点） ，大黄酸（黄色斑点实验二实验二 芦丁的提取及鉴定芦丁的提取及鉴定实验编号实验编号: :1日期日期: : 学时数学时数: : 8学时地点地点: : 新校区F楼6楼天然药物化学实验室任课教师任课教师: :实验目的实验目的: :学习和掌握用碱提取酸沉淀提取黄酮苷的原理和方法。实验原理实验原理: :槐米中有黄酮苷芸香苷（芦丁）, 芸香苷（芦丁）是由槲皮素与芸香糖连接而成的二糖苷，能溶于热水。本试验采用碱提取酸沉淀提取芸香苷。实验对象实验对象: : 槐米主要仪器、试剂主要仪器、试剂: :电热套、烧杯、石灰水、PH试纸、抽滤瓶 。实验操作步骤实验操作步骤: : 1.提取：槐花米粉碎碱水提取加酸沉淀-放置粗品芦丁精制芦丁(纯品)。2.粉碎:称槐米40克，粉碎。3.碱提:在1000ml烧杯中加入500ml蒸馏水，加热煮沸后，将槐米粗粉投入，继续直火 煮沸2-3分钟，在搅拌下，加入石灰乳，调PH8-9，加热保持微沸30分钟，趁热过滤收集，滤渣加160ml蒸馏水, 加入石灰乳，调PH8-9，同上操作再提一次，滤液合并，滤渣弃去。4. .酸沉:将滤液在60-70，小心加浓HCL，调PH3-4，放6小时以上，析出沉淀。实验注意事项实验注意事项: : 碱提时加入石灰乳调PH8-9，不要太高。 溶液保持微沸。 酸化时将滤液在60-70，小心加浓HCL，调PH3-4，不要太低。后记后记: :实验二实验二 芦丁的提取及鉴定芦丁的提取及鉴定( (精制精制) )实验编号实验编号: :2日期日期: : 学时数学时数: : 8学时地点地点: :新校区F楼6楼天然药物化学实验室 任课教师任课教师: :实验目的实验目的: :粗品芦丁的精制实验原理实验原理: : 粗品芦丁能溶于热水，去除不溶性杂质，最后用甲醇重结晶。实验对象实验对象: : 粗品芦丁主要仪器、试剂主要仪器、试剂: :电热套、圆底烧瓶、冷凝管、甲醇实验操作步骤实验操作步骤: : 精制 ：粗品芦丁放在1000ml烧杯中，加500ml蒸馏水，加热煮沸，至全部溶解，趁热抽滤，滤液放冷，即析出黄色沉淀，待沉淀完全后，抽滤，收集沉淀，干燥。用甲醇重结晶，得精品芦丁。实验注意事项实验注意事项: : （1）用甲醇重结晶时加热回流时电热套电压小于50v。（2）粗品芦丁全部溶解，趁热抽滤。（3）重结晶时甲醇的用量应适当，用量过多，则结晶不易析出；用量过少，又会带入较多的杂质。后记后记: :实验二实验二 芦丁的提取及鉴定芦丁的提取及鉴定实验编号实验编号: :3日期日期: : 学时数学时数: : 8学时地点地点: :新校区F楼6楼天然药物化学实验室 任课教师任课教师: :实验目的实验目的:（1）芦丁的水解，鉴定；（2）掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷、苷元和糖的鉴定方法。实验原理实验原理: : ，实验对象实验对象: : 精品芦丁主要仪器、试剂主要仪器、试剂: :电热套、圆底烧瓶、冷凝管、甲醇、正丁醇、醋酸、葡萄糖、鼠李糖、盐酸、镁粉、醋酸镁、醋酸铅、氧氯化锆、三氯化铝实验操作步骤实验操作步骤: : 1.水解 ：取1克芦丁加1%H2SO4100ml与烧杯中，加热微沸，30分钟，开始为澄清，逐渐析出黄色针状结晶，待沉淀完全后，抽滤，收集沉淀，水解母液留作糖的纸层析鉴定。2. 芦丁、槲皮素的鉴定：（1）糖的检出圆形滤纸层析取水解芦丁的滤液20ml，加Ba(OH)2细粉中和至pH7，滤除生成的BaSO4白色沉淀，滤液在水浴上小心浓缩近干（约1ml）注意防止炭化，加甲醇5ml,作为检识糖的样品溶液。展开剂：正丁醇-醋酸-水（4-1-5上层） 。对照品：葡萄糖、鼠李糖（各2mg，分别溶于2ml甲醇中）展开方式：径向展开显色剂：苯胺邻苯二甲酸盐试剂（或，邻苯甲酸苯胺） ，喷雾后，105加热35分钟，有糖处显棕色或棕红色斑点。（2）化学方法鉴别黄酮类成分a.盐酸-镁粉反应b.醋酸镁反应c.醋酸铅沉淀反应d.氧氯化锆e.点滴反应实验注意事项实验注意事项: : 糖的检出圆形滤纸层析点样量不要太多。后记后记: :实验三实验三 氧化苦参碱的提取分离与纯制氧化苦参碱的提取分离与纯制实验编号：实验编号：1实验日期：实验日期：实验地点：实验地点：任课教师：任课教师：学时数：学时数：2+82+8实验目的：实验目的：掌握渗漉法和离子交换法提取生物碱的方法和原理实验原理：实验原理：1.生物碱溶于酸水2.阳离子交换树脂提取、分离生物碱实验对象：实验对象：苦参主要仪器、试剂：主要仪器、试剂：渗漉筒、烧杯、玻璃棒阳离子交换树脂柱、阳离子交换树脂、pH 试纸、培养皿0.5%盐酸、碘化铋钾、蒸馏水主要操作步骤：主要操作步骤：总碱的提取：总碱的提取：（1 1）酸水提取：）酸水提取：称取 250g 风干粉碎的苦参中加入适量 0.5%的盐酸液，使其浸没药料，充分湿润，放置一小时。将如上酸水浸泡好的药材及溶液装入渗漉筒，待全部加完，继续补充加入 0.5%的盐酸液，浸过药面，放置过夜（此步骤在实验前一天提前完成） 。继续加入 0.5%的盐酸液或蒸馏水， （当渗漉液的酸性过大，改加蒸馏水渗漉，将渗漉液的 pH 控制在 3-4 之间）以 1mL/min 的流速进行渗漉，收集渗漉液约 3750Ml,到渗漉液生物碱反应微弱为止。（2 2）交换：）交换：将上述渗漉液 pH 控制在 3-4 之间，上柱交换，流速自快至慢，流出液要经常以碘化铋钾检查，如发现有未被交换的生物碱流下时，可调整流速继续进行交换，待渗漉液全部通过树脂后，把树脂倒入烧杯中，用蒸馏水洗涤数次，除去非阳离子杂质，然后滤干，放入大培养皿中自然干燥。实验注意事项：实验注意事项：装渗漉筒时，药材应压实，尽赶空气，渗漉筒切勿走干。当渗漉液的酸性过大，改加蒸馏水渗漉，将渗漉液的 pH 控制在 3-4 之间。如发现有未被交换的生物碱流下时，可调整流速继续进行交换。离子交换树脂柱切勿走干。后记：（教学体会、学生对教学内容的反应等）后记：（教学体会、学生对教学内容的反应等） 实验二实验二 氧化苦参碱的提取分离与纯制氧化苦参碱的提取分离与纯制实验编号：实验编号：2实验日期：实验日期：学时数：学时数： 8 8实验地点：实验地点：任课教师：任课教师：实验目的：实验目的：学习索氏提取器的使用方法实验原理：实验原理：1.生物碱碱化后，溶于氯仿2.索氏提取器氯仿连续提取将生物碱从阳离子交换树脂上洗脱下来实验对象：实验对象：交换了生物碱的阳离子交换树脂主要仪器、试剂：主要仪器、试剂：索氏提取器、烧杯、水浴锅阳离子交换树脂、圆底烧瓶、冷凝管、漏斗、滤纸浓氨水、氯仿、丙酮主要操作步骤：主要操作步骤：总碱的提取：总碱的提取：（1 1）总碱洗脱：总碱洗脱：将晾干后的树脂放入烧杯中，加浓氨水将晾干后的树脂放入烧杯中，加浓氨水 20mL20mL，充分搅匀，使湿润度，充分搅匀，使湿润度合适，合适， （树脂充分膨胀，但又无不吸收的过剩水份溢出）盖好，（树脂充分膨胀，但又无不吸收的过剩水份溢出）盖好， 静置 20 分钟后，装入索氏提取器中，用 300mL 氯仿在水浴上回流洗脱，至提尽生物碱为止。回收氯仿，尽力抽干。残剩物用 2-3 倍量丙酮溶解，尽快出现结晶，放置一定时间，过滤，得氧化苦参碱粗晶，（实际是总碱）用丙酮重结晶一次，得精品。实验注意事项：实验注意事项：加浓氨水加浓氨水 20mL20mL，充分搅匀，使湿润度合适，使树脂充分膨胀，但又无不吸，充分搅匀，使湿润度合适，使树脂充分膨胀，但又无不吸收的过剩水份溢出收的过剩水份溢出。索氏提取器使用时要小心，易碎裂。后记：（教学体会、学生对教学内容的反应等）后记：（教学体会、学生对教学内容的反应等） 实验二实验二 氧化苦参碱的提取分离与纯制氧化苦参碱的提取分离与纯制实验编号：实验编号：3实验日期：实验日期：学时数：学时数： 8 8实验地点：实验地点：任课教师：任课教师：实验目的：实验目的：学习使用 Al2O3薄层、柱层析法分离鉴定生物碱的方法实验原理：实验原理：生物碱可以采用 Al2O3薄层、柱层析法分离实验对象：实验对象：总碱粗品，Al2O3薄层，Al2O3柱层析主要仪器、试剂：主要仪器、试剂：层析柱、棉花、点滴板、试管、玻璃板、毛细管、Al2O3、碘化铋钾、圆底烧瓶、冷凝管、漏斗、滤纸甲醇、氯仿、丙酮主要操作步骤：主要操作步骤：氧化苦参碱的分离与纯制：氧化苦参碱的分离与纯制：取一根洗净干燥的 1：45 的层离柱，在下端塞一点棉花，倒入一些氯仿，使棉花湿润，并放出氯仿液，以赶尽气泡后，缓缓加入 30g 氧化铝，以氯仿作媒介湿法装柱，最后加入拌有 200mg 氧化苦参碱精品，薄层检查两个点的少量氧化铝，再放入一点棉花，先用 30mL 氯仿，后用氯仿:甲醇（99：1）的混合溶剂洗脱，流速控制 1mL/min，流分每 10 mL 收集一份，收集中要经常以点滴板做生物碱显色反应的检查，薄层检识后，相同流分合并，回收溶剂至干，得氧化苦参碱部分用少量丙酮溶解，放置析晶，所得纯品为氧化苦参碱，测mp，并进行薄层检识。苦参生物碱的薄层层析：苦参生物碱