细菌接种 药敏－微生物与免疫学实验

实验四一、细菌接种二、药敏实验一、细菌接种 为进一步研究临床分离标本（致病菌）的生物学性状，必须对细菌进行培养 根据 培养基的物理性状 和 培养目的 不同，分为四种基本培养方法基本接种方法 固体平板分区划线 液体培养 斜面接种 半固体穿刺1、平板分区划线法 培养基 固体琼脂平板 （ 1人 /组） 菌种 金大混合菌 接种环、酒精灯、标记笔等接种环灭菌 打开菌种管试管口 试管口灭菌取一环菌种 再次灭菌试管口 盖上塞子旋转平板 90°四区划线旋转平板 90°烧灼接种环 、旋转平板 90°注意：用力均匀、轻柔；不能重复；第四区只接触第三区结果 细菌生长现象 菌苔 菌落 画图并描述菌落的种类、大小、形态、色泽、边缘等 目的：分离细菌菌苔菌落2、液体培养基接种：接种环、金 /大 二选一液面交界处的试管壁上轻轻研磨结果 生长现象 表面生长 浑浊生长 沉淀生长 目的：扩增细菌3、斜面接种：接种环、金 /大 二选一首先在斜面上拖一条直线，然后在斜面上划 力均匀结果 生长现象 均匀一致的菌苔 目的：保存菌种4、半固体穿刺：接种针、大 /痢 二选一垂直刺入培养基、沿原路返回结果 生长现象 仅沿穿刺线生长（动力试验 -） 向四周扩散（动力试验 +）目的：鉴别细菌动力器官平板分区划线 金大 斜面接种 金 /大液体接种 金 /大 半固体穿刺 痢 /大讨论 四种方法接种细菌后，细菌的生长状态分别如何？四种接种方法的目的分别是什么？药敏实验目的：掌握药敏实验方法及结果判读。原理：药敏纸片上的抗生素在培养基中向四周扩散，并抑制其周围细菌的生长并产生透亮的抑菌环。材料：固体培养基，菌种（金 /大），药敏纸片（青、四、氟、阿、 V）、接种环等。药敏实验方法（ 2人 /组）1、取一平板，密涂细菌2、镊子灭菌后取药敏纸片，等距离放置于培养基上3、标记， 37度 24四判断该菌对药物的敏感程度。分为高度敏感（ >15中度敏感（ 10 15低度敏感（ 6 10和不敏感（ <6讨 论 你所接种的细菌（金葡或大肠杆菌）对不同的抗生素其敏感程度如何？ G+和 什么？示教肠道杆菌分离鉴定： 腹泻患者粪便标本 系列生化反应 （葡萄糖、乳糖、甘露醇、硫化氢、尿素酶、靛基质）+动力试验 血清学鉴定 红色菌落（肠道非致病菌） 无色半透明菌落（肠道致病菌） 系列生化反应： 葡萄糖、乳糖、甘露醇 （紫色变成黄色） 硫化氢 （生成黑色沉淀） 尿素酶 （整支管变成玫瑰红） 靛基质 （生成红色环） 动力试验： 动力阳性 动力阴性