gnih对去卵巢兼予雌激素大鼠下丘脑pomc的调节作用
GnIH 对去卵巢兼予雌激素大鼠下丘脑POMC 的调节作用 魏萌 司丽娜 陈磊 杨松鹤 程露阳 乔跃兵 承德医学院 沧州医学高等专科学校 摘 要： 目的:探讨侧脑室微量注射促性腺激素抑制激素 (GnIH) 对下丘脑阿片-促黑素细胞皮质素原 (POMC) 蛋白表达的影响。方法:40 只雌性 SD 大鼠建立卵巢摘除术补充雌激素 (OEP) 大鼠模型后随机分为对照组 (n=20) 和实验组 (n=20) , 分别于侧脑室微量注射生理盐水和 GnIH 4l;每组根据注射时间不同分为注射1h、2h、4h、6 四个亚组 (n=5) 。采用蛋白印迹技术检测下丘脑 POMC 蛋白表达的情况。结果:注射 1h、2h、4h, 实验组大鼠下丘脑 POMC 蛋白的表达量与对照组比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) 。注射 6h, 实验组大鼠下丘脑 POMC蛋白的表达量明显低于对照组 (P0.05) . 6 h after injection, the POMC expression in hypothalamus of rats in experimental group was obviously lower than that of rats in control group (P 0.05) 。注射 6h, 实验组大鼠下丘脑 POMC 蛋白的表达量明显低于对照组 (P<0.05) 。见附图、附表:附图 大鼠下丘脑 POMC 蛋白的表达 下载原图(A-Western blot 结果, B-POMC 蛋白灰度值分析结果;G-实验组, C-对照组) 附表 侧脑室注射 Gn IH 对 OEP 大鼠下丘脑 POMC 蛋白表达的影响 (n=5) 下载原表 3 讨论生殖功能是各种生物繁衍生息的基础, 而下丘脑-垂体-性腺轴是调控哺乳动物生殖功能的主要系统之一。Gn RH 是 1971 年发现的一种下丘脑神经肽, 可以通过垂体门脉系统, 刺激垂体前叶分泌促性腺激素, 即黄体生成素 (luteinizing hormone, LH) 和卵泡雌激素 (folliclestimulating hormone, FSH) , 二者又可以作用于性腺, 促进精子和卵子的发生3。在过去的 30 年里, Gn RH 被认为是下丘脑唯一的调节激素。直到研究者于 2000 年在鸟类的下丘脑内发现了一种新的神经肽, 它可以通过抑制促性腺激素的合成和释放来影响鸟类的生殖功能, 因此被命名为 Gn IH1。Gn IH 最早被发现于鸟类的下丘脑, 可以抑制促性腺激素的合成和释放4。而近年的研究结果证明, 在哺乳动物下丘脑的背内侧核及背内侧核与下丘脑腹内侧核中间的区域也发现了 Gn IH 神经元5-7。2012 年, 研究者在 Gn RH 神经元上发现了 Gn IH 受体的表达, 说明 Gn IH 可以直接作用于 Gn RH 来完成对生殖功能的抑制作用7。POMC 是一种厌食性相关肽8, 其神经元主要表达在下丘脑的弓状核及相近核团。POMC 裂解后的 内啡肽可调节机体的生殖功能。相关的研究证明, POMC 神经元可直接作用于 Gn RH 神经元, 进而促进生殖功能2。而 Gn IH 是否可以通过 POMC 这一途径来调控 Gn RH 神经元进而调节促性腺激素的合成和释放, 国内外尚无相关报道。本研究建立了 OEP 大鼠模型, 消除雌激素对 Gn RH 的影响, 采用蛋白印迹技术观察了大鼠侧脑室微量注射 Gn IH1h、2h、4h、6h 后, 下丘脑 POMC 蛋白表达的变化情况。结果显示, 侧脑室微量注射 Gn IH 1h、2h、4h 后, 下丘脑 POMC 蛋白表达与对照组相比无明显变化;而侧脑室注射 Gn IH6h 后, 下丘脑 POMC 蛋白的表达与对照组相比明显降低, 说明侧脑室注射 Gn IH 在一定时间内可抑制下丘脑 POMC 蛋白的表达。本研究表明, 侧脑室注射 Gn IH 可抑制大鼠下丘脑 POMC 蛋白的表达, 同时提示Gn IH 除了直接作用于 Gn RH 神经元外, 还可能通过 POMC 这一途径间接影响 Gn RH, 确切机制尚需进一步研究。参考文献1Tsutsui K, Saigoh E, Ukena K, et al.A novel avian hypothalamic peptide inhibiting gonadotropin releaseJ.Biochem Biophys Res Commun, 2000, 275 (2) :661-667. 2Chen WP, Witkin JW, Silverman AJ.beta-Endorphin and gonadotropin-releasing hormone synaptic input to gonadotropin-releasing hormone neurosecretory cells in the male ratJ.J Comp Neurol, 1989, 286 (1) :85-95. 3Cunningham MJ, Clifton DK, Steiner RA.Leptins actions on the reproductive axis:perspectives and mechanismsJ.Biol Reprod, 1999, 60 (2) :216-222. 4Bentley GE, Perfito N, Ukena K, et al.Gonadotropin-inhibitory peptide in song sparrows (Melospiza melodia) in different reproductive conditions, and in house sparrows (Passer domesticus) relative to chicken-gonadotropin-releasing hormoneJ.J Neuroendocrinol, 2003, 15 (8) :794-802. 5Ubuka T, Inoue K, Fukuda Y, et al.Identification, expression, and physiological functions of Siberian hamster gonadotropin-inhibitory hormoneJ.Endocrinology, 2012, 153 (1) :373-385. 6Tobari Y, Iijima N, Tsunekawa K, et al.Identification of gonadotropin-inhibitory hormone in the zebra finch (Taeniopygia gutata) :Peptide isolation, cD NA cloning and brain distributionJ.Peptides, 2010, 31 (5) :816-826. 7Chowdhury VS, Ubuka T, Osugi T, et al.Identification, localization and expression of LPXRFamide peptides, and melatonin-dependent induction of their precursor mR NA in the newt brainJ.J Endocrinol, 2011, 209 (2) :211-220. 8Cone RD, Lu D, Koppula S, et al.The melanocortin receptors:agonists, antagonists, and the hormonal control of pigmentationJ.Recen Prog Horm Res, 1996, 51:287-317.
