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化妆品中维甲酸等8种组分检验方法2021

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化妆品中维甲酸等8种组分检验方法2021

化妆品中维甲酸等8种组分检验方法Determination of Tretinoin and other 7 kinds of components in cosmetics1 范围本方法规定了高效液相色谱法测定化妆品中维甲酸等8种组分的含量。本方法适用于化妆品中维甲酸等8种组分的含量测定。2 方法提要样品经甲醇超声提取后,采用高效液相色谱仪分离,二极管阵列检测器检测,根据保留时间和紫外光谱定性,峰面积定量,以标准曲线法计算含量。取0.5g样品时,本方法对维甲酸等8种组分的检出限、定量下限、检出浓度和最低定量浓度见下表。表1 维甲酸等8种组分检出限、定量下限、检出浓度和最低定量浓度序号组分名称检出限(mg/L)检出限浓度(mg/kg)定量下限(mg/L)最低定量浓度(mg/kg)1他卡西醇0.081.60.242他扎罗汀0.020.40.0513阿维A0.020.40.0514异维甲酸0.020.40.0515维甲酸0.020.40.0516依曲替酯0.020.40.0517维胺酯0.020.40.0518阿达帕林0.040.80.081.63 试剂和材料除另有规定外,本方法所用试剂均为分析纯或以上规格,水为GB/T 6682 规定的一级水。3.1 甲醇,色谱纯。3.2 乙酸,优级纯。3.3 四氢呋喃,色谱纯。3.4 流动相的配制:流动相A:0.5%乙酸溶液:量取乙酸(3.2)5mL,加水稀释至1000mL。流动相B:甲醇(3.1)。3.5 标准储备溶液:称取他扎罗汀、阿维A、异维甲酸、维甲酸、依曲替酯、维胺酯各10mg(精确至0.00001g),置于10mL棕色容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀(阿维A、依曲替酯较难溶解,可先以少许四氢呋喃溶解后,再加甲醇稀释至刻度);称取阿达帕林10mg(精确至0.00001g),置于25mL棕色容量瓶中,以少许四氢呋喃溶解后,加甲醇稀释至刻度;称取他卡西醇10mg(精确至0.00001g),置50mL棕色容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度。3.6 混合标准溶液:分别准确移取标准储备溶液(3.5)各5mL,置于50mL棕色容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为混合标准溶液,临用现配。4 仪器和设备4.1 高效液相色谱仪,二极管阵列检测器。4.2 天平。4.3 离心机。4.4 涡旋振荡器。4.5 超声波清洗器。5 分析步骤5.1 混合标准系列溶液制备准确移取混合标准溶液(3.6)0.10、0.50、1.00、2.00、5.00、10.00mL,于10mL棕色容量瓶中,用甲醇(3.1)稀释至刻度,配制成混合标准系列溶液,临用现配。表2 维甲酸等8种组分混合标准系列序号组分名称混合标准系列溶液(mg/L)Std1Std 2Std 3Std 4Std 5Std 61他卡西醇0.212410202他扎罗汀151020501003阿维A151020501004异维甲酸151020501005维甲酸151020501006依曲替酯151020501007维胺酯151020501008阿达帕林0.424820405.2 样品处理称取样品0.5g(精确到0.0001g)于10mL具塞比色管中,加适量甲醇(3.1)涡旋处理1min,再加甲醇(3.1)定容至刻度,摇匀,超声提取15min,4000r/min离心5min,取上清液经0.45m滤膜过滤,滤液作为待测溶液,立即测定。5.3 色谱参考条件色谱柱:C18 柱(250mm4.6mm5m),或等效色谱柱;表3 流动相梯度洗脱程序时间/min流动相A(%)流动相B(%)02080152080201585300100312080402080流速:1.0 mL/min;检测波长:355nm;(他卡西醇、阿达帕林检测波长为269 nm,如有干扰阿达帕林可选检测波长320nm);柱温:35;进样量:10 L。5.4 测定在“5.3”项色谱条件下,取“5.1”项下的系列标准溶液分别进样,进行液相色谱分析,以系列标准溶液浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,进行线性回归,建立标准曲线,得到回归方程。取“5.2”项下处理得到的待测溶液进样,进行色谱分析,根据保留时间定性,测得峰面积,根据标准曲线计算待测溶液中各组分的浓度。按“6”计算样品中各组分的含量。6 分析结果的表述6.1 计算式中:w化妆品中待测组分的含量,mg/kg;m样品取样量,g;r代入标准曲线计算得到的样品中各组分的质量浓度,mg/L;V定容体积,mL。在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。6.2 回收率和精密度回收率为85%115%,相对标准偏差小于10%(n=6)。7 图谱图1 标准溶液色谱图(=355nm)1:他扎罗汀(14.499min);2:阿维A(24.282min);3:异维甲酸(25.271min);4:维甲酸(28.083min);5:依曲替酯(31.561min);6:维胺酯(32.062min)图2 标准溶液色谱图(=269nm)1:他卡西醇(12.116 min);2:阿达帕林(35.683min)图3 标准溶液色谱图(=320nm)1:阿达帕林(35.683 min) 10 附录A(规范性附录)化妆品中维甲酸等8种组分检测结果的确证若样品检出阳性,必要时可采用液相色谱-质谱法进行结果确证。A.1 仪器参考条件A.1.1 色谱条件色谱柱: C18柱(50 mm2.1 mm1.8 m),或等效色谱柱; 流动相:A:0.1甲酸水溶液;B:甲醇(含0.1甲酸);流动相梯度洗脱程序:时间/minV(流动相A)/%V(流动相B)/%03070410905109075957.13070103070流速:0.3 mL/min;柱温:40 ;进样量:2 L;A.1.2 质谱条件离子源:电喷雾离子源(ESI源);监测模式:正/负离子多反应监测模式;监测离子对及相关电压参数设定见表1;雾化气流速:3 L/min;干燥气流速:10 L/min;脱溶剂管温度:500 ;离子源电压:4000 V。表1 各组分的监测离子对及相关电压参数设定表序号监测模式组分名称母离子(m/z)子离子(m/z)CE(V)1正离子他卡西醇418.0400.712382.6152他扎罗汀352.2324.128294.0453依曲替酯354.9308.814204.8134维胺酯448.3282.917161.1245负离子阿维A325.1281.110266.0136异维甲酸299.2255.315119.1257维甲酸299.1255.315119.1258阿达帕林411.2367.324352.143A.2 定性 在相同的液相色谱-质谱实验条件下,如果样品中色谱峰的保留时间与标准溶液中对应组分一致,所选择的监测离子对的相对丰度比与相当浓度标准溶液的离子相对丰度比的差不超过表2规定范围,则可以判定样品中存在对应的测定组分。表2 结果确证时相对离子丰度比的最大允许偏差相对离子丰度(k)k>50%50%k>20%20%k>10%k10%允许的最大偏差20%25%30%50%A.3 图谱 图1 待测组分质谱图附录B维甲酸等8种组分的中、英文名称、CAS号、分子式、分子量信息表序号中文名称英文名称CAS登录号分子式分子量1他卡西醇Tacalcitol57333-96-7C27H44O3416.642他扎罗汀Tazarotene118292-40-3C21H21NO2S351.463阿维AAcitretin55079-83-9C21H26O3326.434异维甲酸Isotretinoin4759-48-2C20H28O2300.445维甲酸Tretinoin302-79-4C20H28O2300.446依曲替酯Etretinate54350-48-0C23H30O3354.487维胺酯Viaminate53839-71-7C29H37NO3447.628阿达帕林Adapalene106685-40-9C28H28O3412.53

注意事项

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