医学微生物学-第二篇 病毒学 第三十二章 逆转录病毒
,作者 :,单位 :,第三十二章,逆转录病毒 retrovirus,第一节 人类免疫缺陷病毒,第二节 人类嗜T细胞病毒,重点难点,逆转录病毒的特性； HIV的形态、结构、复制周期及传播途径； HIV的致病性及防治原则。,HIV的微生物学检查； 人类嗜T细胞病毒的致病性。,逆转录病毒科的病毒分类。,人类免疫缺陷病毒 human immunodeficiency virus, HIV,第一节,1. 1981年，美国科学家Michael S. Gottlieb报道5例卡氏肺囊虫肺炎，“Gay Cancer” 2. 美国疾控中心将其命名为“获得性免疫缺陷综合征” （Acquired Immune Deficiency Syndrome, AIDS），即艾滋病 3. 1983年，法国科学家LucMontagenier等分离到病毒，命名为Human Immunodeficiency Virus, HIV 4. 1988年12月1日定为第一个“世界艾滋病日”,（一）人类免疫缺陷病毒的发现,一、概述,一、概述,（二）人类免疫缺陷病毒的分型,1. HIV-1：全球流行，容易发生变异，是导致AIDS的主要病原体，病毒感染后导致严重免疫缺陷，最终死于各种机会性感染和恶性肿瘤 2. HIV-2：主要在西非和西欧局部流行,（三）HIV/AIDS在我国的流行特点,1. 性途径为主要传播途径，男-男同性恋的性传播比例上升明显 2. 局部地区和特定人群疫情严重 3. 感染者陆续进入发病期，AIDS死亡人数增加,（一）病毒的大小与形态,1. HIV病毒颗粒呈球形 2. 中等大小，直径约100nm120nm,二、生物学性状,HIV-1病毒颗粒结构（复旦大学陆路教授提供）,二、生物学性状,（二）病毒的结构,1. 包膜病毒，含两种刺突（糖蛋白gp120和跨膜糖蛋白gp41） 2. 核衣壳为二十面体立体对称（p24） 3. 核心含有2条完全相同的+ssRNA（约9.2kb） 4. 核心还包括逆转录酶（RT）、整合酶（IN）和蛋白酶（PR） 5. gp120糖蛋白与受体CD4分子及辅助受体（CXCR4 / CCR5）分子结合，为中和性抗原，较容易发生变异 6. gp41为跨膜糖蛋白，介导病毒包膜与宿主细胞膜的融合，较少发生变异,二、生物学性状,（三）病毒的基因组结构及编码蛋白,HIV-1基因组结构及其主要编码蛋白,二、生物学性状,HIV-1基因组及其编码蛋白,二、生物学性状,（四）病毒的感染与复制,1. 吸附：HIV-gp120 + CD4分子-靶细胞 2. 穿入：gp41介导HIV包膜与宿主细胞膜的融合 3. 脱壳：脱去病毒衣壳，释放RNA于细胞核中 4. 生物合成：细胞核中进行转录，细胞浆中进行翻译 5. 组装释放：病毒核酸和结构蛋白装配形成核衣壳，从宿主细胞释放时获得包膜，形成完整的有感染性的子代病毒体，感染其它宿主细胞,二、生物学性状,（五）抗原变异与型别,1. HIV-1型和HIV-2型的病毒核苷酸序列差异超过40% 2. HIV病毒容易发生变异，疫苗研制困难 HIV的逆转录酶无校正功能 env基因最易发生突变 gp120表面抗原变异有利于病毒逃避免疫清除,二、生物学性状,（六）抵抗力：对理化因素抵抗力弱,1. 0.5%次氯酸钠、5%甲醛、2%戊二醛、70%乙醇处理1030min，可灭活病毒 2. 煮沸100，20min可灭活病毒 3. 在2037环境下可存活15天 4. 在冷冻血制品中，68加热72h才能灭活病毒,三、致病性,（一）传染源,1. HIV感染者 2. HIV携带者,（二）传播途径：HIV主要存在于血液、精液、阴道分泌物、乳汁等体液中,1. 性传播：同性、异性 2. 血液传播：输血或血制品、器官移植、人工授精、 药瘾者共用注射器等 3. 母婴传播（垂直传播）：胎盘、产道、哺乳,三、致病性,（三）临床表现：艾滋病潜伏期长（几年至十几年），临床病程分为,1. 急性感染期：出现类似流感的非特异性症状，一般约23周后症状自行消退；急性期血中HIV抗体可能尚未转阳，可检到HIV抗原p24作早期诊断 2. 无症状潜伏期：潜伏长达数年至数十年，患者一般无临床症状，或症状轻微，伴无痛性淋巴结肿大，血中HIV抗体检测显示阳性 3. AIDS相关综合征（AIDS-related complex，ARC）：出现发热、盗汗、疲乏、体重减轻、慢性腹泻和淋巴结肿大等 4. 典型AIDS，即免疫缺损期：机会感染及肿瘤,三、致病性,（三）临床表现：HIV感染结局,三、致病性,（四）免疫性：细胞免疫、体液免疫,1. 细胞免疫：CTL、NK细胞 2. 体液免疫：感染后血清中出现抗HIV抗体IgG、IgM（抗gp120），为中和抗体，具有保护作用，但HIV容易发生变异，逃逸抗体作用 3. 目前，尚无有效疫苗，预防才是硬道理,四、微生物学检查,（一）检测病毒抗体：ELISA法初步筛查，蛋白质印记法（WB）确证 （二）检测病毒抗原：P24可用于HIV感染的早期诊断，在感染早期（约23周）即可检测到，常用于窗口期的辅助诊断 （三）检查病毒核酸：RT-PCR检查HIV-RNA，用于疾病进展及疗效观察 （四）病毒分离：外周血单个核细胞共培养法，临床上不常用,五、防治原则,（一）预防 1. 宣传教育、洁身自好 2. 对献血、献器官、献精液者必须作HIV抗体检测 3. HIV抗体阳性妇女，应避免怀孕或母乳喂养 4. 建立HIV感染的监测网，及时掌握疫情,五、防治原则,（二）治疗：高效抗逆转录病毒治疗（highly active anti-retroviral therapy，HAART，俗称“鸡尾酒”疗法） 1. 逆转录酶抑制剂：包括核苷类/非核苷类逆转录酶抑制剂 2. 病毒蛋白酶抑制剂 3. 病毒入胞抑制剂：包括融合抑制剂（FI）和CCR5拮抗剂 4. 整合酶抑制剂,人类嗜T细胞病毒 human T lymphotropic viruses, HTLV,第二节,一、概述,（一）人类嗜T细胞病毒， human T lymphotropic viruses，HTLV,1. HTLV-1：是成人T淋巴细胞白血病（aldult T cell leukemia，ATL）的病原体 2. HTLV-2：是引起毛细胞白血病的病原体,（二）HTLV的分型,1. HTLV属于人类逆转录病毒科的反转录病毒属，是引起人类恶性肿瘤的RNA肿瘤病毒 2. HTLV是20世纪70年代后期发现的第一个人类逆转录病毒,二、生物学性状,（一）病毒形态与结构,1. HTLV-1颗粒呈球形，直径约100nm 2. 包膜病毒，包膜上有两种刺突：糖蛋白gp46（与靶细胞表面的CD4分子结合）；糖蛋白gp21（为跨膜蛋白） 3. 衣壳：由衣壳蛋白p24组成二十面体立体对称结构 4. 核心：由核壳蛋白（p15）及2条相同的+ssRNA（约9.0kb）组成， 5. 核心还含有逆转录酶、整合酶及蛋白酶等,二、生物学性状,HTLV病毒基因组及其主要编码蛋白,（二）HTLV基因组结构,三、致病性与免疫性,（一）致病性,1. 传染源：患者和HTLV感染者 2. 传播途径：主要通过输血、性接触传播，亦可经母婴途径传播 3. 所致疾病：HTLV-1主要感染CD4+ T细胞，是成人T细胞白血病（ATL）的病原体；ATL好发于40岁以上成人，日本、印度、非洲等为高发区，我国福建沿海和北方少数民族地区有流行 4. ATL临床表现：急性型、淋巴瘤型、慢性型和隐匿型,三、致病性与免疫性,（二）致病机制,1. HTLV-1Tax蛋白反式激活NF-kB上调IL-2基因和IL-2R基因表达T细胞过度增殖肿瘤 2. 前病毒DNA整合导致染色体畸变细胞转化白血病,（三）免疫性,1. 细胞免疫：可杀伤病毒感染的靶细胞 2. 体液免疫：特异性抗体出现，病毒抗原表达减少，影响细胞免疫作用,四、微生物学检查,（一）血清中HTLV特异性抗体检测,1. 初筛试验： ELISA法或免疫荧光检测血清中HTLV-1/2抗体 2. 确认试验：初筛试验的阳性血清需经Western blot确认,（二）靶细胞中HTLV前病毒DNA检测,1. 采用PCR检测外周血单个核细胞中的HTLV前病毒DNA 2. 敏感性高，可协助确定诊断,五、防治原则,（一）预防,1. 非特异性预防：及时发现感染者、切断传播途径 2. 疫苗：尚无特异性疫苗,（二）治疗,采用逆转录酶抑制剂、IFN-、联合化疗等综合方案,对人致病的逆转录病毒主要有人类免疫缺陷病毒（HIV）和人类嗜T细胞病毒（HTLV）两种，前者主要引起获得性免疫缺陷综合征，俗称艾滋病（AIDS），后者主要引起成人T淋巴细胞白血病（ATL）。 HIV为球形胞膜病毒，胞膜上含两种糖蛋白刺突（gp120和gp41），与HIV病毒的吸附和穿入密切相关，病毒内层主要由p24组成衣壳蛋白，核心含两条相同的+ssRNA及各种功能蛋白（逆转录酶及整合酶等）。 HIV的主要受体是CD4分子，通过破坏表达CD4分子的细胞（主要是,T淋巴细胞）导致机体免疫力低下（以细胞免疫损伤为主），引起以机会性感染和肿瘤为主要表现的临床综合征（艾滋病），临床表现与体内T细胞的数量直接相关。 HIV的传播途径主要包括性接触传播、血液传播及母婴传播。临床诊断HIV感染常用ELISA法进行初筛，阳性者需进一步采用蛋白印记法（WB）确诊，窗口期常检查p24蛋白辅助诊断。目前尚无有效疫苗预防。治疗常采用两种及以上抗病毒药物的联合使用。,HTLV为中等大小的胞膜病毒，胞膜上有糖蛋白刺突，能与靶细胞表面的CD4分子结合 。HTLV基因组中含3个结构基因和2个调节基因，调节基因与HTLV的致病性有关。 HTLV-1型是引起成人T细胞白血病（ATL）的病原体，其流行具有明显的地区性。HTLV的传播途径主要通过性接触、血液及母婴传播。检测HTLV特异性抗体（ELISA）是实验室诊断的主要依据。目前对HTLV感染尚无特异的防治措施。,
