2017届一轮复习细胞工程PPT课件
1,细胞工程,植物组织培养,植物体细胞杂交,动物细胞培养,动物细胞融合,单克隆抗体的制备,核移植,植物细胞工程,动物细胞工程,理论基础,细胞的全能性,其他动物细胞技术的基础,2,一、植物细胞工程的基本技术,(一)细胞的全能性 1、概念:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能。 2、原因:受精卵,有丝分裂,体细胞,含全套遗传基因,3、全能性的程度,(1)受精卵的全能性最高,4、形成不同组织、器官原因:,基因选择性表达,5、条件:,(1)离体状态 (2)提供营养物质、激素,(4)体细胞:分化程度低的分化程度高的 分裂能力强的分裂能力弱的,3,(二)植物组织培养技术(重点 理解 ),1、原理:植物细胞的全能性 2、过程: 外植体 愈伤组织 根、芽 植物体,再分化,脱分化,避光,需光,植物激素: 细胞分裂素、生长素,分化培养基,人工种子:胚状体、不定芽、顶芽和腋芽经人工薄膜包装而得。,4,杂种细胞,愈伤组织,杂种植株,植物细胞A,植物细胞B,原生质体A,原生质体B,正在融合的原生质体,去细胞壁,再生细胞壁,植物组织培养,植物细胞融合,植物体细胞杂交过程,5,4、优势:(与有性杂交方法比较),克服植物远缘杂交不亲和性,2、原理: 细胞膜的流动性和细胞全能性,(三)植物体细胞杂交,3、原理:,物理方法离心、振动、电激,化学方法聚乙二醇(PEG),6,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,胰蛋白酶,10代细胞,传代培养,无限传代,单个细胞,二、动物细胞培养,1、过程,不易传下去,增殖逐渐缓慢以致停止,细胞的核型发生变化,使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内,以保持细胞正常的二倍体核型。,常见现象:细胞贴壁、接触抑制,7,(1)无菌、无毒的环境 (2)营养 (3)温度和PH (4)气体环境:,(添加一定量的抗生素,定期更换培养液),补充合成培养基中缺乏的物质,36.5 +0.5度 ;PH为7.2-7.4。,O2作用:进行 呼吸,提供能量 CO2作用:维持培养液的PH值,(葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。),有氧,95%空气和5% CO2,二、动物细胞培养,2、条件,8,比较:,培养基特有成分,培养基性质,原理,比较项目,细胞的全能性,蔗糖、植物激素,固体培养基,植物组织培养,葡萄糖、动物血清,液体培养基,细胞增殖,动物细胞培养,9,1、原理:,三、动物细胞核移植,2、分类:,动物细胞核的全能性,胚胎细胞核移植、体细胞核移植,供体细胞(供核),细胞培养,体细胞,卵母细胞 (减中期:供质),去核,无核卵母细胞,核移植,重组细胞,重组胚胎,胚胎移植,代孕母体,新个体,分娩,激活,3、过程:,完成细胞分裂和发育进程,含有促使体细胞细胞核表现全能性的物质和营养,10,四、动物细胞融合,1、原理:,细胞膜的流动性,灭活的病毒(与植物细胞杂交不同点),离心、振动、电刺激;,聚乙二醇;,2、诱导融合的方法:,11,细胞A,细胞B,杂交细胞,灭活的病毒,物理法 化学法,仙台病毒等,3、过程:,四、动物细胞融合,12,五、单克隆抗体制备过程,细胞融合、筛选,足够数量的、能产生特定抗体的细胞群,单克隆抗体,用特定的选择培养基筛选,克隆化培养、专一抗体检测,1、过程,13,1、过程,B淋巴细胞 骨髓瘤细胞,诱导融合,B-B细胞,B-瘤细胞,瘤-瘤细胞,选择培养,杂交瘤细胞( B-瘤细胞),克隆化培养,抗体检测,杂交瘤细胞,体外培养,单克隆抗体,八单克隆抗体,五、单克隆抗体制备,2、原理:,3、单克隆抗体的优点:,特异性强、灵敏度高、可大量制备,骨髓瘤细胞能无限增殖,一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。,14,4.应用:,作为诊断试剂:准确识别各种抗原物质,并与特异性结合 优点:准确、高效、简易、快速,用于,运载药物:制成“生物导弹”,治疗疾病:主要用于癌症治疗,五、单克隆抗体制备,