实验三 种子生活力测定

实验三,种子生活力的测定,一、实验目的和要求,1、实验目的 了解四唑法测定种子生活力的原理 掌握主要农作物种子四唑染色测定种子生活力的方法步骤和判别有无生活力的鉴定标准。,一、实验目的和要求,2、实验要求 要求每组同学独立完成同一材料的生活力测定。,二、实验原理,2、四唑染色法测定种子生活力的基本原理 利用四唑的无色溶液作为一种指示剂，以显示活细胞中所发生的还原反应。 有生活力的种子胚部细胞具有脱氢酶，被种子吸收的四唑盐类的无色溶液，参与了活细胞的还原反应，从脱氢酶脱氢，被还原为红色而稳定的、不扩散的、不溶于水的三苯基化合物。 无生活力的种子则无此反应。 借此可鉴别有生活力种子和无生活力种子。,实验仪器设备,材料：玉米、大豆种子。 设备和药品 设备：冰箱、培养箱、镊子、解剖刀、刀片、吸水纸等。 药品：2，3，5-三苯氯化四氮唑。,样品准备 大豆：采用缓慢预湿后不须样品准备，但在染色后观察鉴定前也需剥去种皮，以便观察得更为清楚，鉴定更为可靠。 每组同学数取大豆种子300粒，每100粒为1次重复，共3次重复。,实验方法和步骤,实验方法和步骤,样品准备 玉米：沿胚纵切。通过胚中轴和胚乳，纵向切开，使胚的主要构造暴露出来，取其一半，用于四唑染色。 每组同学数取大豆种子300粒，每100粒为1次重复，共3次重复。每粒种子沿胚纵切后保留一半，供染色用，另一半不用,四唑染色 目的：通过染色反应，将胚和活的营养组织里的健壮、衰弱和死亡部分的差异显现出来，判断种子生活力。 染色方法：将经过样品准备或不须准备的规定数量种子分别放入四唑溶液（0.1%）里染色。 将不同重复的样品分别放在小烧杯中，加入四唑溶液，以淹没种子为宜； 移置在30的黑暗恒温箱内或弱光下进行染色2小时。因为光线可能使四唑盐类还原而降低其浓度，影响染色效果。,实验方法和步骤,观察鉴定 凡是胚的主要构造及有关活营养组织染成有光泽的鲜红色，且组织状态正常的，为有生活力种子。 凡是胚的主要构造局部不染色或染成异常的颜色和光泽，并且活营养组织不染色部分已超过1/2，或超过允许范围，以及组织软化的，为不正常种子。 凡是完全不染色或染成无光泽的淡红色或灰白色，且组织已软腐或异常、虫蛀、损伤、腐烂的为死种子。,实验方法和步骤,结果表示与报告 计算各个重复中有生活力的种子数，重复间最大容许差距不得超过规定值； 平均百分率计算到最近似的整数。,实验方法和步骤,