医疗废物微波消毒处理消毒效果检测布点与评价要求

16 附录 A 资料性附录 医疗废物微波消毒处理消毒效果检测布点与评价要求 A 1 指示菌种指示菌种选择要求选择要求 A 1 1 微波消毒工艺可选择枯草杆菌黑色变种 B subtilis ATCC 9372 芽孢作为指示菌种 微波与高温蒸汽组合消毒处理工艺可选择嗜热脂肪杆菌 Bacillus ATCC 7953 芽孢和枯草 杆菌黑色变种 B subtilis ATCC 9372 芽孢作为指示菌种 A 1 2 嗜热脂肪杆菌芽孢载体含量应 1 106CFU 载体 5 106CFU 载体 枯草杆菌黑色变 种芽孢应 1 106CFU 载体 5 106CFU 载体 A 1 3 菌种选择及菌种抗力也可参照 消毒技术规范 和卫生学评价的有关要求 A 2 载体的要求载体的要求 A 2 1 微波消毒处理工艺载体为输液管 内径 3 mm 长度为破碎设备说明书中规定的最长 破碎长度 A 2 2 微波与高温蒸汽组合消毒处理工艺载体为输液管 内径 3 mm 长度为破碎设备说明 书中规定的最长破碎长度 和滤纸片或布片 10 mm 10 mm A 2 3 按 消毒技术规范 或相应的消毒检测方法制备染菌载体 A 3 布点要求布点要求 A 3 1 微波与高温蒸汽组合消毒处理工艺消毒舱 5m3 内至少放置 10 个染菌载体于不同 的位置 A 3 2 微波消毒处理工艺每次试验应在设备进料口连续等间距加入至少 10 个染菌载体 A 3 3 以上情况均应包括舱内或连续消毒处理线上最难消毒的位置 该位置应由厂商提供 如果厂商不能提供 应先进行预试验找出舱内或连续消毒处理线上最难消毒的部位 A 4 杀灭对数值的计算方法杀灭对数值的计算方法 首先计算各组的活菌数 cfu 片 并换算为对数值 N 然后按下式计算杀灭对数 值 0 x KL N N A 1 其中 KL 杀灭对数值 No 对照组平均活菌数的对数值 Nx 实验组活菌数对数值 A 5 评价原则评价原则 A 5 1 经3次重复试验 每次试验的阳性对照组回收菌量均应为1 106CFU 载体 5 106CFU 17 载体 阴性对照组应无菌生长 实验组所有染菌载体的杀灭对数值均 4 00 可判为消毒合 格 A 5 2 使用自含式生物指示物试验时 经3次重复试验 阳性对照组生物指示物颜色由紫色 变为黄色 或厂家说明书规定的颜色 阴性对照组生物指示物未发生颜色变化 实验组生 物指示物颜色未发生变化 可判为消毒合格 A 6 其他要求其他要求 A 6 1 嗜热脂肪杆菌芽孢可选择嗜热脂肪杆菌恢复琼脂培养基 枯草杆菌黑色变种芽孢可选 择胰蛋白胨大豆琼脂培养基 A 6 2 稀释液可选择含 0 1 吐温 80 的磷酸盐缓冲液 0 03 mol L pH 7 2 A 6 3 枯草杆菌黑色变种芽孢可采用37 恒温培养箱 嗜热脂肪杆菌芽孢可采用56 恒温培 养箱 A 6 4 模拟医疗废物 按厂家说明书的要求 准备干净的各种医疗用品 数量应符合满载的 要求 A 6 5 消毒处理完毕后 收集放有染菌载体的布袋 以无菌操作方式取出染菌载体 分别用 无菌剪刀剪碎后移入含有5 mL洗脱液的试管中 将试管在手掌上振打200次 做10倍系列稀 释 选择适宜稀释度 分别吸取1 mL 以倾注法接种于两个平皿中 放置于恒温培养箱中 培养72 h 计数存活菌数 即为实验组 A 6 6 分别取2个染菌载体放在室温下 不经消毒处理 待实验组达规定作用时间后 分别 用无菌剪刀将该染菌剪碎后 移入含5 mL洗脱液的试管中 其余试验步骤与上述实验组相 同 作为阳性对照组 A 6 7 接种2个无菌平皿 直径90 mm 倾入15mL 20mL同批次的培养基 并与实验组做 同样培养 作为阴性对照组 A 6 8 使用自含式生物指示物 消毒处理后 收集生物指示物布袋 取出自含式生物指示菌 物 按照生物指示物产品说明书规定的培养温度和培养时间进行培养作为实验组 同时以2 个没有经过消毒处理的生物指示物作为阴性对照组 将2个未经处理的生物指示物中安瓶捏 碎作为阳性对照组 并将阴性对照组和阳性对照组与实验组做同样培养 观察生物指示物的 颜色变化 A 6 9 试验至少重复3次