城镇污水系统中病毒特性和规律相关研究分析

城镇污水系统中病毒特性和规律相关研究分析导语：根据新型冠状病毒的生物学特征，研究了病毒在水体中的赋存状态，分析总结了国内外污水处理中病毒的相关研究，认为污水处理厂只要保持正常稳定运行，就能够有效降低污水中病毒的浓度，可阻断肠道病毒和呼吸道病毒通过污水处理厂出水进行传播。对比分析了污水处理消毒过程中的臭氧消毒、氯消毒、紫外线消毒工艺，再生水处理过程的多级屏障作用可以有效去除病毒，结合工艺控制可以保障出水安全。此外，指出了污水处理工艺中可能产生气溶胶风险的位置，给出了相应的防护建议。这对新冠肺炎期间指导城镇污水处理厂安全稳定运行，防止新型冠状病毒进一步传播扩散有着重要参考意义。2019年12月，武汉暴发了一种以肺炎为特征的新型呼吸系统疾病，经分离鉴定，确认病原为一种新型冠状病毒，疫情发展迅速。2020年2月1日我国研究人员在新冠肺炎确诊患者的粪便中检测出新型冠状病毒（COVID-19）核酸阳性，2月13日中国疾控中心在患者排泄物中检测到了活体病毒。这一重大发现引起了污水处理行业的极大关注，生态环境部紧急发布了关于做好新型冠状病毒感染的肺炎疫情医疗污水和城镇污水监管工作的通知，明确要求各地必须加强医疗污水和城镇污水的监管工作，避免新型冠状病毒通过污水传播扩散。01 病毒在污水中的赋存状态1.1 污水中的病毒根据流行病学研究，人和动物的排泄物中往往含有大量的病毒颗粒，这些病毒颗粒可能通过污水排放、化粪池系统渗滤液和农业区径流进入水环境。国内外科研工作者针对污水处理过程中致病菌的研究较多，对病毒的研究相对较少，而病毒的发生、存活和衰变与致病菌有很大不同1。目前在生活污水中已经发现了150多种肠道病毒2，当人类通过受污染的水或食物接触到这些病毒时，理论上就存在一定的被感染风险。绝大多数关于城市水循环中病毒赋存状态的研究主要集中在肠道病毒上，而包膜病毒在结构上不同于肠病毒，因此一般认为包膜病毒在水中表现出的特性也有所不同。近年来，污水中的病毒宏基因组显示了人类病毒的多样性，这其中就包括一些包膜病毒3。目前人类已知的五种冠状病毒粒子（MERS-CoV，HKU1-CoV，HCoVNL63，HCoV-OC43，HCoV-229E）在人体排泄物中都已经被检测到，综合国内外研究结论，可以认为冠状病毒不太可能对城市水循环卫生系统构成重大威胁4。病毒感染人类需要同时具备4个必要条件: a. 病毒的存在；b. 一定量的病毒浓度；c. 易感染人员接触病毒；d. 病毒与易感染体表面受体结合。目前尚未见到污水厂进水中检测出新冠病毒的报道，排泄物存在病毒不能简单推断为市政综合污水一定会感染人，污水的净化处理仍然是人类控制疫情传播不可替代的有效手段之一，但是从业人员的暴露风险确实增大。关于COVID-19在污水系统中生命周期特征、规律的研究还较为有限，但COVID-19作为病毒的一种，其在污水中表现出的特征应该与其他病毒，尤其是冠状病毒有一定的相似性。因此，综合分析已有研究成果对于指导本次疫情期间污水厂安全稳定运行，防止新型冠状病毒传播扩散有着重要参考价值。1.2 污水中的病毒浓度污水中的病毒浓度取决于受感染人数和受感染个人传播病毒的速度。大多数污水中病毒数据是关于肠道病毒和qPCR法测量的，污水厂进水中基因组浓度高达108109拷贝/L，受限于细胞培养技术和病毒提取方法，污水中病毒粒子数量的报道很少，只能由人体粪便或尿液样本中的病毒量大致推测。比如，Noroviru病毒在人类粪便样本中的基因组浓度可以达到1010拷贝/L5-6，而在非疫情期间，该数值为109拷贝/L7。JCPyV病毒和BKPyV病毒在人类尿液中的基因组浓度为1010拷贝/L，在污水中的浓度为108拷贝/L8。SARS病毒在患者腹泻排泄物中的基因组浓度为1010拷贝/L，而患者尿液中的基因组浓度为2.5107拷贝/L9。综合分析已有研究信息，疫情期间人类排泄物中病毒浓度可能提高1个数量级，而污水中病毒浓度比排泄物中约低12个数量级。1.3 病毒在污水中的存活时间病毒离开宿主细胞后能够存活一定时间，具体存活时间的长短跟病毒种类和环境条件有关，包括温度、有机物和微生物，其中温度是病毒存活的关键影响因素。病毒在污水中一般会吸附在泥砂、粘土、矿物等悬浮固体表面，这些物质可以为病毒提供保护，使病毒具有一定的逆境抗性从而延长其存活时间10。但同时如果这些固体沉淀下来，也可以成为去除病毒的一种机制11。需要注意的是，当病毒颗粒以聚集状态存在时，可以提高其在不利环境因素下的存活几率，这也同时提醒污水厂要高度重视污水处理工程中的污泥无害化处理环节。病毒在生物体外表现出一系列对环境因素的敏感性，其中T90值(即在水环境中达到90%失活的时间)从几分钟到几年不等。污水管网水力停留时间一般少于半天，因此污水处理厂进水中有可能存在病毒。通常认为带有脂膜的病毒在水环境中很容易丧失感染性，但并不是所有的包膜病毒都能迅速失去传染性。病毒失活率受温度和基质影响较大，温度和盐度越高，病毒的失活率也越高12-13。在两项有关水中人类冠状病毒的研究中发现，温度对病毒的活性有显著影响，室温条件下的病毒样本的失活率比4条件下高出一个数量级14。研究表明，病毒存活率随着温度的升高而降低，这主要是由病毒外壳蛋白变性和环境中降解蛋白质的胞外酶活性增加引起的10。污水的成分（有机氮组分、细菌病毒）和处理过程对病毒的生存影响较大，经过灭菌的污水中病毒的失活速率大于未灭菌的污水，污水中悬浮物和有机物提高了病毒在水环境中的生存能力。但是污水中的某些物质也能导致病毒加速失活，如冠状病毒在巴氏消毒的污水的T90远低于蒸馏水培养基12。冠状病毒在未经过滤的初级污水中的存活时间比在过滤的初级污水中更长14。一项关于冠状病毒在水中存活时间的研究表明，TGEV和MHV两种冠状病毒在水（试剂纯）、地表水和巴氏杀菌的污水中可以长期存活，但传染性都很低，而且温度越高病毒的活性越低11。另外有研究表明冠状病毒在水环境中的传播要比肠道病毒少，因为冠状病毒在废水中会更快地失活，病毒粒子可在23天内减少99.9%，这与SARS-CoV存活数据相当14-15。可见，污水组分对病毒失活的影响是复杂的，并且不同的病毒和环境样本之间的关系存在显著差异，但污水处理过程对病毒去除作用无疑是正向的。02 污水处理对病毒的去除作用一旦病毒从宿主细胞中释放出来，它们就会暴露在各种物理、化学和生物等环境因素中，如同生物大分子一样存在，在这些环境因素中，物理、化学和生物因素均起到了重要的作用，随着市政污水处理厂处理流程的推进，病毒数量呈显著的降低趋势，最终出水中病毒的分布呈现对数正态关系16。表1列举了一些市政污水处理系统的进水和出水中病毒的分布情况17-20。2.1 污水常规处理研究表明，常规活性污泥法处理市政污水过程中病毒的去除率为0.65lg2.85lg 21。一些病毒经过超细格栅就可实现0.1lg1.0lg的去除率，经过生物段处理病毒浓度可进一步降低1.4lg1.7lg17。有研究表明，砂滤通常可以去除10%98%的病毒，如果在砂滤之前加入混凝工艺，病毒的去除率可提高到3lg22。活性污泥可以去除很大一部分病毒，这个过程主要发生在生物池和二沉池中，生物池中的活性污泥有较大的比表面积，生物池中的病毒粒子可以吸附活性污泥的表面，最后和活性污泥一起进入二沉池，通过固液分离富集到二沉池底部污泥中，吸附在剩余污泥上的病毒逐渐失去活性。不同规模和处理工艺的污水处理过程可使感染性肠病毒减少约02lg，使感染性腺病毒减少2lg3lg。一项针对5座市政污水处理厂的调查发现，污水处理厂从进水到消毒后的病毒浓度降低幅度可以达到1.9lg5.0lg23。另外也有研究表明，较长水力停留时间和较低MLSS可以提高病毒的去除效果24。由于活性污泥的吸附作用也是物理过程，对病毒没有杀灭作用，后续的消毒工艺对于减少出水中病毒的数量至关重要。MBR法是活性污泥法和膜过滤的集成。MBR法去除病毒的原理可归因于四种机制，即病毒附着在混合固体颗粒上拦截、病毒粒子被膜截留、病毒粒子被膜上附着层截留以及活性污泥细菌对病毒的捕食和酶分解失活25。仅从安全和消毒效果角度看MBR工艺优势明显，经过膜截留后降低了水的浊度，可以大幅度提升消毒效果，降低了出水暴露风险。据报道，在单一MBR法（出水未做进一步消毒处理）去除污水中的病毒效率在3.0lg6.0lg之间1。MBR工艺的运行参数也会影响病毒的去除率。有报道表明，较长水力停留时间和较短的污泥泥龄可以提高病毒的去除效果26，分析认为可能与污泥吸附病毒并快速排除有关。不同处理工艺生物池混合液中病毒含量以及病毒在液相和固相中的分布未见相关研究，但是，由于存在剩余污泥的排放过程，MBR工艺不会无限浓缩富集病毒，水处理系统很快就可以达到稳态。另外，从活性污泥的吸附作用以及病毒在污泥中宜于存活来看，固相浓度理论上应该高于液相，由于相同进水条件下不同工艺生物池污泥总量基本相同，在完全混合的状态下，只要控制好气体和污泥处理环节，不同工艺病毒暴露风险应该差别不大。尽管如此，即使MBR工艺滤液中仍然可以检测到病毒的存在1，为了保证出水病毒的去除率，疫情期间需要高度重视污水消毒工作，建议采用紫外消毒的污水处理厂，补充次氯酸钠消毒。2.2 消毒处理2.2.1 臭氧消毒与氯相比，臭氧消毒效率更高，但是需要更高的运行成本。杀灭病毒时臭氧初始剂量一般为310 mg/L，接触时间约为10 min。有研究表明，臭氧和紫外线协同杀灭SARS CoV的速度比有效氯快数百倍，而且可杀死对氯消毒剂有高度抵抗力的微生物27。水中臭氧含量为27.73mg/L，作用4min可完全灭活SARS病毒；臭氧含量为17.82mg/L作用4min和4.86mg/L作用10min，均可使SARS病毒的灭活率达100%28。这些参数可以为使用臭氧消毒的污水厂提供参考。2.2.2 氯消毒化学消毒剂如氯、二氧化氯、次氯酸钠和氯胺对病毒蛋白质外壳的损伤较大，足够高剂量的化学消毒剂还可以破坏病毒的核酸。王新为等考察了次氯酸钠和二氧化氯对医院污水的消毒效果，结果发现，SARS CoV在污水中对含氯消毒剂的抵抗力比大肠杆菌低，当污水中游离余氯量保持在0.5 mg/L氯或2.19 mg/L二氧化氯以上时可以保证完全灭活污水中的 SARS CoV29。一般市政污水深度处理消毒氯的使用剂量为520mg /L，接触时间为3060min。当氯的投加量10 mg/L，接触时间为60 min时可以杀灭水体中的全部轮状病毒8。氯剂量为16和8 mg/L，接触时间为30 min，可分别杀灭污水中1.2lg和0.35lg的肠病毒。增加氯剂量或延长接触时间，即提高CT值可以有效提高病毒的杀灭效果。二氧化氯、次氯酸钠和氯胺也是替代的消毒剂，高浓度的次氯酸钠溶液可用于去除设备和管道上附着的污泥30。含有效氯为200、400、600 mg /L的次氯酸钠溶液分别在20、20、10 min 对腺病毒灭活效果4lg，600 mg /L的次氯酸钠作用20 min 灭活效果达到100%31。也有研究表明二氧化氯去除病毒的效果比氯更好，而氯胺杀灭病毒的效果较差。需要指出的是用含氯消毒剂消毒时各种水中氮形态和有机物的含量对消毒效果有比较大的影响32。2.2.3 紫外线消毒紫外线主要破坏病毒的核酸，也会对病毒的蛋白质外壳产生一定破坏。徐丽梅研究了紫外线对Polioviru病毒的杀灭作用，低剂量的紫外光线能透过病毒蛋白质外壳导致病毒RNA的损伤33。波长为254 nm的紫外线照射5 min时，病毒数量明显减少，254 nm紫外线照射30 min时，感染细胞内检测不到病毒粒子。波长为254