DB 37T 3738—2019磺胺类、喹诺酮类和大环内酯类抗生素的测定 固相萃取液相色谱-三重四极杆质谱法

ICS 13.060Z 16 D B37山 东 省 地 方 标 准DB 37/T 37382019水质 磺胺类、喹诺酮类和大环内酯类抗生素的测定 固相萃取/液相色谱-三重四极杆质谱法Water quality-Determination of antibiotics of Sulfonamides, Quinolones andMacrolides by solid phase extraction -Liquid chromatography triple quadrupole massspectrometry2019 - 12 - 05 发布 2020 - 01 - 05 实施山 东 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布DB37/T 37382019目 次前言 . II1 范围 . 12 规范性引用文件 . 13 方法原理 . 14 干扰与消除 . 15 试剂和材料 . 16 仪器和设备 . 27 样品 . 38 分析步骤 . 39 结果计算与表示 . 510 精密度和准确度 . 711 质量保证和质量控制 . 712 废物处理 . 8附录 A（规范性附录） 方法的检出限和测定下限. 9附录 B（资料性附录） 质谱参考条件. 10附录 C（资料性附录） 方法的精密度和准确度. 11IDB37/T 37382019前 言本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准由山东省生态环境厅提出并组织实施。本标准由山东省环保标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省环境监测中心。本标准主要起草人：郭文建、张慧、朱晨、王桂勋、岳太星、李红莉、丁波涛。IIDB37/T 37382019水质 磺胺类、喹诺酮类和大环内酯类抗生素的测定 固相萃取/液相色谱-三重四极杆质谱法警告：实验中使用的溶剂和试剂均具有一定的毒性，对健康具有潜在的危害，应尽量避免与这些化学品的直接接触。样品制备过程应在通风橱中进行，操作时应按规定要求佩戴防护器具,避免接触皮肤和衣物。1 范围本标准规定了测定水中磺胺类、喹诺酮类和大环内酯类抗生素的固相萃取/液相色谱-三重四极杆质谱法。本标准适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中磺胺间甲氧嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺二甲嘧啶、诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、氟罗沙星、脱水红霉素、罗红霉素、螺旋霉素12种抗生素的测定。当取样500 ml，定容体积为1.0 ml，进样体积为20 l时，方法检出限为0.001 g/L0.007 g/L，测定下限为0.004 g/L0.028 g/L，详见附录A。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范HJ/T 164 地下水环境监测技术规范3 方法原理水样中的抗生素类化合物经固相萃取法富集、净化后，用液相色谱-三重四极杆质谱法分离检测。根据化合物的保留时间和特征离子峰定性，内标法定量。4 干扰与消除金属离子与抗生素能形成络合物，使固相萃取效率降低，可向水样中加入乙二胺四乙酸二钠抑制络合物的形成。水中余氯等其他具有氧化性的有机物会干扰磺胺类抗生素的测定，可向水中加入抗坏血酸消除干扰。5 试剂和材料除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为不含目标化合物的纯水。5.1 盐酸：（HCl）=1.19 g/ml。1DB37/T 373820195.2 硫酸：（H2SO4）=1.84 g/ml。5.3 乙腈（CH3CN）：色谱纯。5.4 甲醇（CH3OH）：色谱纯。5.5 甲酸（HCOOH）：色谱纯。5.6 乙二胺四乙酸二钠（C10H14N2Na2O82H2O）。5.7 抗坏血酸（C6H8O6）。5.8 盐酸溶液：1+1。5.9 硫酸溶液：c(H2SO4)=4.0 mol/L。量取 22 ml 硫酸（5.2），缓慢加入到水中，待温度降至室温后，用水定容至 100 ml。5.10 pH 2.0 去离子水：用盐酸（5.8）溶液调节去离子水至 pH 为 2.0。5.11 0.1 %甲酸溶液：量取 0.5 ml 甲酸（5.5），缓慢加入水中，用水定容到 500 ml。5.12 甲醇/乙腈混合溶液：1+1。5.13 0.1 %甲酸甲醇/乙腈混合溶液：量取 0.5 ml 甲酸（5.5），缓慢加入到甲醇/乙腈混合溶液（5.12）中，用甲醇/乙腈混合溶液（5.12）定容至 500 ml。5.14 稀释溶剂：3+1。取 75 ml 0.1 %的甲酸溶液（5.11）和 25 ml 0.1 %甲酸甲醇/乙腈混合溶液（5.13）于玻璃容器中，混合均匀。5.15 标准贮备液：=100 mg/L。准确称取 10.0 mg 抗生素类化合物标准物质，用甲醇溶解后，转移到 100 ml 棕色容量瓶中，定容至标线。此溶液在-10 以下避光可保存 1 年。也可以直接购买有证标准溶液，参照制造商的产品说明保存。5.16 脱水红霉素标准贮备液：=2.00 mg/L。脱水红霉素可直接购买标准物质（纯度95 %）或者由红霉素制备。量取 400 l 100 mg/L 红霉素贮备液于 20 ml 棕色瓶中，加入 19.6 ml 甲醇（5.4），然后加入约 10 l 硫酸溶液（5.9）调 pH 至 3.0，室温下震荡 4 h，于-10 以下避光可保存 2 个月。5.17 标准使用液：=1.00 g/ml。将 12 种抗生素类化合物标准贮备液（5.15）用适量的甲醇（5.4）稀释，临用现配。5.18 内标贮备液：=200 g/ml。内标物为阿特拉津-13C3。可用标准物质配制，标准物质纯度大于99.0 %，用适量的甲醇（5.4）溶解。也可直接购买有证标准溶液。贮备液应在-10 以下避光保存或参照制造商的产品说明。5.19 替代物贮备液：=200 g/ml。喹诺酮类替代物为环丙沙星-D8，磺胺类替代物为磺胺二甲氧嘧 啶-D6、大环内酯类替代物为脱水红霉素-D6。可用标准物质配制，标准物质纯度大于 99.0 %，用适量的甲醇（5.4）溶解。也可直接购买有证标准溶液。贮备液应在-10 以下避光保存或参照制造商的产品说明。5.20 内标使用液：2.00 g/ml。将内标贮备液（5.18）用适量的甲醇（5.4）稀释。内标使用液于-10 以下避光保存，保质期 1 个月。5.21 替代物使用液：2.00 g/ml。将替代物贮备液（5.19）用适量的甲醇（5.4）稀释。替代物使用液于-10 以下避光保存，保质期 1 个月。5.22 固相萃取柱：填料为二乙烯苯和 N-乙烯基吡咯烷酮共聚物（HLB）或同等柱效的萃取柱，规格为6 ml/500 mg。5.23 滤膜：0.7 m 玻璃纤维或其他材质等效滤膜。5.24 滤膜：0.22 m 聚四氟乙烯或其它等效滤膜。5.25 氮气：纯度99.99 %。6 仪器和设备2