2017年南开大学医学院862分子生物学考研强化模拟题.doc

2017年南开大学医学院862分子生物学考研强化模拟题一、名词解释1 DNA 复性（DNA renaturation）【答案】DNA 复性是指DNA 双螺旋变性后的两条互补单链重新恢复成双螺旋结构的过程。2 内含子（intron ）与外显子（exon ），只转录，在【答案】内含子（intron ）是指真核基因中的非编码序列，又称插入序列（IVS ）前体mRNA 加工时被剪切掉;外显子（exon ）是指真核基因中的编码序列，是一个基因表达为多肤链的部分。 3 DNA 的甲基化（DNAmethylation ）【答案】DNA 的甲基化是指一种表观遗传修饰，它是由DNA 甲基转移酶催化s-腺苷甲硫氨酸作为甲基的供体，将胞嘧啶转变为 4 基因超家族 甲基胞嘧啶的一种过程。【答案】基因超家族是指一组由于序列的同源性通过序列比对可以彼此匹配而相关的基因。判定同源的主要标准是核苷酸残基的保守性，并参考功能的相似性。 5 tmRNA【答案】转移信使RNA 。tmRNA 是指细菌体内一种修复翻译水平上受阻的遗传信息表达过程的反式翻译机制的核心分子，它兼具tRNA 和mRNA 的特点，在SmpB 蛋白的帮助下特异性识别携带mRNA 缺失体的核糖体，在核糖体蛋白S1的传递作用下结合在A 位点上，一方面延续被中断的mRNA 上的遗传信息，一方面终止蛋白质的合成，释放被束缚的核糖体和tRNA 进入新的翻译过程。 6 双向电泳【答案】双向电泳是指将样品进行电泳后，在它的直角方向再进行一次电泳，为了不同的目的而采用不同的组合 方式的分离方法，目前双向电泳大多是指第一向为等电聚焦，平衡后，第二向为SDS 电泳。 7 【答案】核开关。核开关是指一类通过结合小分子代谢物调控基因表达的mRNA 元件，它位于特定的mRNA 区域，可以不依赖于任何蛋白质因子而直接结合小分子代谢物，继而发生构象重排，影响mRNA 活性。 8 【答案】泛素（遍在蛋白）。泛素是指一种存在于大多数真核细胞中，主要功能是标记需要分解掉的蛋白质，使其被水解的小蛋白。 9 TATA 框【答案】TATA 框是指位于基因转录起始点上游-30p-25bp（真核）或-10bp （原核）的一段保守性较高的序列，控制转录起始的准确性和频率，因共有序列为TATAAAA 而得名。10等电聚焦【答案】等电聚焦是指利用蛋白质分子或其他两性分子的等电点的不同，在一个稳定的、连续的、线性pH 梯度中进行蛋白质的分离和分析的技术。 二、简答题11什么是上升突变? 什么是下降突变?【答案】（1）上升突变是指发生在启动子序列上的增强结构基因转录水平的突变。突变后的启动子比现有的启动子更强，能使转录效率和转录量增加。（2）下降突变是抬发生在启动子序列上的降低结构基因转录水平灼突变。突变后启动子可能不会阻止各个转录单位的起始，但起始效率可能变低并且可能使其邻近基因的转录量降低。12真核细胞的转录和加上是高度偶联灼，简述有哪些加工过程与转录偶联? 是如何偶联的?【答案】（1）与转录相偶联的加工过程有:5-端加帽，53间的剪接，3 末端的加工。（2）RNA 聚合酶II 最大亚基的梭基末端具有一段特殊的序列，被称为CTD 结构。该结构是以7个氨基酸（-Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser-）为重复单位的高度保守重复序列。CTD 结构的磷酸化与去磷酸化之间的转换参与到转录与加工的偶联过程中，通过与加工因子的有机结合而对mRNA 的加工过程产生作用。正是由于CTD 的存在，RNA 聚合酶在整个转录延伸的过程中不仅聚集了与转录合成、延伸相关的作用因子，还聚集了与mRNA 加工相关的加工囚子。这些囚子通过蛋白间相互作用而组成了一个庞大的复合体，mRNA 从合成到加工到成熟的整个过程都在这个复合体内完成。 13什么是RNA editing?简述其机制及意义。【答案】（1）RNA 的编辑是指某些RNA ，特别是mRNA 的一种加工方式，编辑的结果导致DNA 所编码的遗传信息的改变。（2）介导RNA 编辑的机制位点特异性脱氨基作用:载脂蛋白mRNA 中U A ，谷氨酸受体蛋自mRNA 中A I 都属于脱氨基作用的结果。分别由胞m 嘧啶和腺嘌呤脱氨酶所催化。尿嘧啶插入或删除:由于指导RNA 上存在一些未能配对的腺嘌呤，形成缺口，为插入尿嘧啶提供了模板，反应完成后，指导RNA 从mRNA 上解离下来，而mRNA 则被用做翻译的模板。（3）RNA 编辑的生物学意义校正作用:有些基囚在突变过程中丢失的遗传信息可能通过RNA 编辑得以修复;调控翻译:通过编辑可以构建或去除起始密码子和终庄密码子，是基因表达调控的一种方式;扩充遗传信息:能够使基因产物获得新的结构和功能，有利于生物的进化。 14有几种终止密码子？它们的序列和别名是什么？【答案】（1）有三种终止密码子。（2）它们的序列为UAA 、UGA 和UAG , 别名分别为赭石密码、琥珀密码和蛋白石密码。15蛋白质实验原理与主要步骤。【答案】（1）实验原理利用与GST 融合蛋白质探针蛋白质亲和结合，从可溶性蛋白质库中纯化一个未知蛋白质，再通过GST 与谷 胱甘肽偶联的琼脂糖球珠的结合收集相互作用蛋白质，从而分离出蛋白质复合物。（2）主要步骤 GST 融合蛋白先与下列蛋白溶液之一孵育（a. 单一明确的重组蛋白；b. 细胞裂解蛋白混合； 液；c. 体外 翻译cDNA 表达得到的未知蛋白）混合液与谷胱甘肽琼脂糖球珠在4C 反应2h ，离心得沉淀；沉淀加入2 X蛋白Loading Buffer煮沸，离心，取上清进行SDS-PAGE 电泳；考马氏亮兰对SDS-PAGE 胶进行染色，观察特异沉降的蛋白带，接着进行质谱分析确定沉降的蛋白；电泳后的胶做Western Blot来确定沉降的蛋白中是否有目的蛋白。 16早期主要由哪些实验证实DNA 是遗传物质? 写出这些实验的主要步骤。【答案】早期证实DNA 是遗传物质的实验主要是Avery 的肺炎球菌在老鼠体内的毒性实验以及Hershey 和Chase 的T2噬菌体感染大肠杆菌实验。具体实验步骤:（1）肺炎球菌在老鼠体内的毒性实验烧煮灭活后光滑型致病菌（S 型）与活的粗糙型细菌（R 型）分别侵染小鼠，发现这些细菌都没有致病能力。将经烧煮杀死的S 型细菌和活的R 型细菌混合再感染小鼠时，实验小鼠每次都死亡了。 解剖死鼠，发现有大量活的S 型（而不是R 型）细菌。实验表明:死细菌DNA 进行了可遗传的转化，从而导致小鼠死亡。（2）T2噬菌体感染大肠杆菌3532当培养基中的细菌分别带有S 标记的氨基酸和P 标记的核苷酸，子代噬菌体就相应含有35S 标记的蛋白质和P 标记的核酸。分别用这些噬菌体感染没有放射性标记的细菌。32一、名词解释考研试题