基础知识过关考点
选修一、生物技术实践,结束,选修三、现代生物科技,选修一、三,微生物的培养和利用,生物技术在食品加工及其他方面的应用,返回,酶的利用,一、微生物的培养和利用,1.微生物生长需要哪些营养? 2.培养基的制作合格与否如何验证? 3.常用的无菌技术有哪些?,水、碳源、氮源、无机盐和生长因子,对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒;对用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌;为避免周围环境中的微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行;实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。,可通过未接种的培养基表面是否有菌落形成来验证,灭菌与消毒有什么区别? 灭菌的方法有哪些?各自适用范围是什么? 消毒的方法有哪些?各自适用范围是什么?,灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子;消毒是指用较为温和的理化方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物,不包括芽孢、孢子。,灭菌的方法有灼烧灭菌,用于接种用的金属工具;干热灭菌,用于能耐高温,需要保持干燥的玻璃器皿等;高压蒸汽灭菌,用于培养基等。,消毒的方法有煮沸消毒法,用于液体消毒;巴氏消毒法,用于不耐高温的液体;化学药剂或紫外线消毒,用于物体表面的消毒。,考点细化,4.微生物的纯培养指的是什么? 5.如何配制平板(斜面)培养基? 平板冷凝后,平板倒置为什么倒置? 为什么接种操作每次划线之前都要灼烧接种环?操作结束时,仍然需要灼烧接种环的原因是什么?,考点细化,计算称量溶化灭菌倒平板,平板冷凝后,若有水滴滴到培养基上,会导致杂菌蔓延,这样就不能计数和分离了,所以培养时平板一定要倒置。,防止外来杂菌入侵,接种操作每次划线之前都要灼烧接种环,是因为每次操作都要及时灭菌,以防污染杂菌。操作结束时,仍然需要灼烧接种环的原因是防止杂菌污染环境。,6.测定微生物数量的方法有那几种? 7.如何从土壤中分离某种目的微生物? 选择培养基配置的原理是什么? 如何分离出酵母菌和霉菌? 如何分离出金黄色葡萄球菌? 如何分离出固氮微生物?,显微镜直接计数、统计菌落数目,土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察,考点细化,增加或减去某种成分,使要选择的微生物能生长,其它微生物不能生长。,培养基加入青霉素,培养基加入高浓度食盐,培养基培养基中不加氮源,返回,二、酶的利用,8.加酶洗衣粉中的酶制剂一般有哪几种?各自的作用是什么? 9.探究温度对加酶洗衣粉的洗剂效果的影响时如何控制变量? 10.植物细胞间果胶的成分构成有哪些?,一般有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶等四类,能分别将大分子的蛋白质、脂肪、淀粉、纤维素水解为小分子物质。,探究温度对加酶洗衣粉的洗剂效果的影响时设置不同温度为变量,其它条件相同且适宜。,植物细胞间果胶是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物,11.果胶酶包括哪些种类? 12.果胶酶在果汁生产中具有什么作用? 13.直接使用酶、固定化酶和固定化细胞各有什么优点和缺点?,提高水果的出汁率并使果汁变得澄清,包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等,对环境条件敏感,易失活;难回收,成本高,影响产量,催化效率高、耗能低、低污染,不利于催化一系列酶促反应,有利于提高生物反应器内微生物细胞的浓度和纯度;成本低、易操作,反应物不易与酶接触,尤其是大分子反应物,反应效率低,既能与反应物接触,又能与产物分离,可反复利用,14.如何将酶固定?简述操作 15.酶和细胞的固定化方法有什么不同?,酶和细胞的固定化方法不同点为被固定的是分子物质还是细胞,即对象不同,由于酶分子很小而细胞体积较大,因此固定化酶一般采用化学结合和物理吸附法,固定化细一般采用包埋法。,酶固定的常用方法为包埋法,即用一定方法将酶包埋固定于多孔的细微网格里,或被半透性的聚合膜所包埋,使酶分子只能从凝胶的网络中漏出,而小分子的底物和产物可自由通过。,返回,三、生物技术在食品加工及其他方面的应用,16.果酒和果醋的制作各利用了什么细菌? 17.醋酸菌发酵产醋的条件是什么? 18.酵母菌发酵制酒的条件是什么?,氧气和糖源充足,温度3035,前期需要氧气,后期不需要氧气;温度1825,果酒制作利用的是酵母菌,果醋制作利用的是醋酸菌,19.实验室中果酒和果醋制作中的原料及发酵装置如何消毒? 为什么果酒自然发酵时葡萄的冲洗不可以反复进行? 20.制作腐乳采用的毛霉如何与其他霉菌区别?,用70%酒精或洗洁精洗涤消毒,注意,果酒自然发酵时葡萄的冲洗不可以反复进行,因为葡萄皮上有大量酵母菌,如果反复冲洗,会洗掉菌种,影响发酵过程。,制作腐乳采用的毛霉生长迅速,有发达的白色菌丝,21.如何从自然界获得毛霉? 22.毛霉制作腐乳的原理是什么? 23.腐乳酿造前期发酵的温度为1518 的原因是什么?,从土壤、水果、蔬菜、谷物上可以分离出毛霉,毛霉产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可以将脂肪水解为甘油和脂肪酸。在多种微生物的协同作用下,普通豆腐转变为腐乳。,毛霉生长的适宜温度为1518 ,返回,基因工程、安全性和伦理, 克 隆 技 术, 胚 胎 工 程, 生 态 工 程,返回,一、基因工程、安全性和伦理问题,1.什么是基因工程? 2.基因工程诞生的理论基础和技术支持有哪些? 3.基因工程操作中用到了那些操作工具?,按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。,理论基础是DNA是遗传物质、DNA双螺旋结构和中心法则的确立、遗传密码的破译;技术支持有基因转移载体的发现、工具酶的发明、DNA体外重组的实现、重组DNA表达实验的成功。,限制酶、DNA连接酶、运载体,限制酶主要从什么生物中分离纯化出来?这种酶在原核生物中的作用是什么? 限制酶的特性是什么?限制酶产生的末端有几种? DNA连接酶与DNA聚合酶的作用部位是什么?二者在作用上有什么区别?,磷酸二酯键;二者在作用上的区别为前者是恢复被限制性内切酶切开的两个DNA片段之间的磷酸二酯键,后者是将单个的核苷酸连接到DNA分子上,形成磷酸二酯键。,限制酶的特性是识别特定核苷酸序列,切割特定切点。限制酶产生的末端有两种:粘性末端和平末端。,限制酶主要从原核生物生物中分离纯化出来,这种酶在原核生物中的作用是识别DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。,考点细化,作为基因工程的载体应该具备什么条件? 常见的载体种类有哪些? 4.基因工程的操作步骤包括哪些? 目的基因的获取有哪些方法?,从基因文库直接获取;用人工的方法合成,质粒、动植物病毒、噬菌体,作为基因工程的载体应该具备标记基因;多个限制性内切酶切点;能够在宿主细胞内复制和稳定存在三个特点。,目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。,考点细化,基因文库、基因组文库、cDNA文库有什么区别和联系? 基因重组操作中构建基因表达载体的目的是什么 ? 一个完整的基因表达载体包括哪些组分?,区别:含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌体分别含有这种生物的不同基因,称之为基因文库。如果含有一种生物所有基因,叫做基因组文库。只包含一种生物的一部分基因,这种基因文库叫做CDNA文库 联系: 都含有导入的某种生物的基因,目的是将目的基因在受体细胞中稳定存在,并且遗传给下一代,同时目的基因能够表达和发挥作用。,基因、启动子、终止子、标记基因,在构建基因表达载体是为什么目的基因的获取和载体的切割必须用同一种限制酶? 将目的基因导入植物细胞、动物细胞和 微生物细胞的常用方法各自是什么? 作为基因工程的受体细胞植物可以采用体细胞,动物能用体细胞吗?一般采用什么细胞?说说为什么?,作为基因工程的受体细胞植物可以采用体细胞,动物不能用体细胞,一般采用受精卵细胞。因为受精卵具有全能性。,将目的基因导入植物细胞、动物细胞和 微生物细胞的常用方法分别是脓杆菌转化法;显微注射法;首先用Ca离子处理细胞,使细胞处于一种能够吸收周围环境中的DNA分子的感受态细胞。然后将重组表达载体DNA分子溶于缓冲溶液中与感受态细胞混合,在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA,完成转化 。,在构建基因表达载体时为了切出相同末端,因此切割必须用同一种限制酶,当受体细胞是大肠杆菌时常用Ca2+ 处理细胞,这样做的目的是什么? 目的基因的检测要从哪些方面进行检测?(提示:2个水平,4个角度) 基因工程中的各个操作步骤中哪些步骤需要碱基互补配对?哪些步骤不需要?,目的是使细胞处于一种能够吸收周围环境中的DNA分子的感受态细胞,分子水平鉴定:DNA分子杂交技术检测是否插入了目的基因 ,核酸分子杂交技术检测否转录出mRNA;抗原抗体杂交技术检测目的基因是否翻译成蛋白质;个体水平的鉴定如抗虫或抗病的鉴定等。,获得目的基因、构建基因表达载体、和目的基因的检测和表达三个过程存在碱基互补配对,将目的基因导入受体细胞(转化)过程不存在碱基互补配对。,5.举例说明基因工程在农业生产、医学中有哪些应用? 6.基因治疗是对患病基因的的修复吗?基因检测所用的DNA分子为什么要经过处理变成单链?,基因治疗不是对患病基因的修复,基因检测所用的DNA分子只有处理为单链才能与被检测的样品,按碱基配对原则进行杂交。,在农业生产上:主要用于提高农作物的抗逆能力(如:抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等),以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。,7.蛋白质工程与基因工程有什么区别?(提示:蛋白质工程的本质是通过改造基因进而形成自然界不存在的蛋白质,所以被形象地称为第二代基因工程;基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质) 8.转基因生物的安全性争论主要体现在哪三个方面?,蛋白质工程的本质是通过改造基因进而形成自然界不存在的蛋白质,所以被形象地称为第二代基因工程;基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质,食品安全、生物安全、环境安全三个方面,9.目前对在转基因食品的共识是什么观点? 10.目前对克隆人持否定观点的人占大多数,他们的否定理由主要有哪些?,目前对在转基因食品的共识是:争论各方普遍认为,“尚未发现”转基因食品对人的健康存在“明显的不利作用”;转基因技术还具有为穷国“带来切实利益的明确可能”,关于转基因食品的争论必须更加开放、更加透明,更加全面;对这些食品危险性的评价必须谨慎。他们承认,关于转基因食品对健康的长期作用还难以确定,转基因作物对环境(尤其是在热带国家)的长期影响也是个未知数。,目前对克隆人持否定观点的人占大多数,他们的否定理由主要有: 伦理学家认为:克隆人严重地违反人类伦理道德;冲击了现有的婚姻、家庭、两性关系等传统的伦理道德观念;人为制造在心理和社会地位啥少年宫都不健全的人等等。生理学家认为:技术不成熟,可能孕育出有严重生理缺陷的孩子。,11.中国政府对克隆人一贯立场是什么? 12.中国政府对生物武器的一贯立场是什么?,中国政府对克隆人一贯立场是禁止生殖性克隆人。不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验。,中国政府对生物武器的一贯立场是在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器,并反对生物武器及其技术和设备的扩散。,返回,16.什么是细胞工程?在细胞器水平上改变细胞的遗传物质,属于细胞工程吗? 17.什么是细胞的全能性? 为什么从理论上讲,生物体的每一个活细胞都应该具有全能性?,指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过细胞水平或者细胞器水平上的操作,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获取细胞产品的一门综合科学技术。在细胞或细胞器水平上改变细胞的遗传物质,属于细胞工程,具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能,生物体每个细胞都具有该生物全部遗传信息,因此从理论上讲,生物体的每一个活细胞都应该具有全能性,二、克隆技术,考点细化,细胞在生物