如何使用spectramax 微孔读板机进行快速定量检测dna和rna
25页1、2012 For research use only. Not for use in diagnostic procedures. Trademarks mentioned herein are property of Molecular Devices, LLC or their respective owners. 如何使用如何使用SpectraMax 微孔读板微孔读板机进机进行快速定量检测行快速定量检测 DNA&RNA 岳岳 兵兵 Product Manager B 18501662168 2012 For research use only. Not for use in diagnostic procedures. Trademarks mentioned herein are property of Molecular Devices, LLC or their respective owners. 内内容概览容概览 光吸收原理 比色皿、微孔板和超微量 在 SpectraMax 读板机上快速检测DNA & RNA 在SpectraDrop上进行高通量超微量DNA & RNA
2、检测 2012 For research use only. Not for use in diagnostic procedures. Trademarks mentioned herein are property of Molecular Devices, LLC or their respective owners. 光吸收检测技术原理光吸收检测技术原理 透射透射率率和和吸光度吸光度 I0 = Ia + It + Ir 入射光强度为 I0,吸收光强度为Ia,透过光强度为It,反射光强度为Ir 因为反射光强度Ir由微孔板材料决定 I0 = Ia + It 朗伯比尔定律 K摩尔吸光系数、a吸光系数,根据C单位决定 透射率透射率 吸收值吸收值 2012 For research use only. Not for use in diagnostic procedures. Trademarks mentioned herein are property of Molecular Devices, LLC or their respective owners. 光吸收应用光吸收应用(A
3、bsorbance) 直接定量和显色反应直接定量和显色反应 核酸和蛋白质定量核酸和蛋白质定量 酶联免疫检测(酶联免疫检测(ELISAELISA) 酶动力学分析酶动力学分析 细菌内毒素检测细菌内毒素检测 乙酰胆碱脂酶检测乙酰胆碱脂酶检测 细胞活性检测(细胞活性检测(MTTMTT) 环境监测环境监测 等等等等 -0.6-0.4-0.200.20.40.60.811.21.4Series1做标准曲线测定浓度做标准曲线测定浓度 2012 For research use only. Not for use in diagnostic procedures. Trademarks mentioned herein are property of Molecular Devices, LLC or their respective owners. DNA、RNA或蛋白浓度检测或蛋白浓度检测 DNA双螺旋中双螺旋中碱基碱基 蛋白质蛋白质酪氨酸酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸成分含量色氨酸、苯丙氨酸成分含量 A = a*c*l a = 物质消光系数物质消光系数 c = 浓度浓度 l= 光光径(径(0.5mm或
4、者或者1mm) SMP软件自动给出软件自动给出 DNA浓度:浓度:OD260=1表示表示 50 g/ml双链双链DNA(dsDNA) DNA纯度:纯度:纯度计算纯度计算(OD260/OD280) DNA纯品纯品: OD260/OD280 = 1.8 决定上决定上 样体积样体积 2012 For research use only. Not for use in diagnostic procedures. Trademarks mentioned herein are property of Molecular Devices, LLC or their respective owners. PathCheck光路校正技术(专利)光路校正技术(专利) 比色皿比色皿 光径固定光径固定 通常为通常为1 cm 微孔板微孔板 光径不同,与加液体积有关光径不同,与加液体积有关 1 cm p p 为什么我们需要 PathCheck? 2012 For research use only. Not for use in diagnostic procedures. Trademarks mentio
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