正相、反相和极性胶联柱使用手册
4页1、1正相、反相和极性胶正相、反相和极性胶联联柱使用手册柱使用手册注意注意此色谱柱填充的是改性硅胶材料。向柱内导入碱性溶剂(pH7.0)或酸性溶剂(pH2.0)会导致柱子损坏。在使用这个柱子之前,你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。未正确地使用不能享受保修待遇。1 1简介简介此柱填充的是反相或者极性胶联型态的硅胶基质材料的硅胶。硅胶形态的柱子用于正相(非水)条件。反相(C8,C18,ODS,RP-8 和 RP-18)通常用于反相条件(水相) 。极性胶联型(APS,diol,CN 和 NH2)依照应用目的,可以用于正相和反相条件。建议不要将一个相同的柱子用于差别非常大的条件下,这是因为柱子在特定的条件下,固定相的性质会发生变化,所以在其他的条件下,会影响柱效。也不建议将硅胶柱用在反相条件下或者将方向柱用在正相条件下,这是因为这种过程会发生重复性差的问题(每一次注射之间和柱与柱之间的比较) 。2 2色谱柱老化色谱柱老化在开始分析工作以前,柱子必须经过正确的老化。一个没有正确老化的柱子可能会带来问题,诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。A A在反相条件下老化在反相条件下老化要老化这类柱子,首先
2、要使用乙腈或者甲醇淋洗,然后你选用的洗脱液进行平衡。在发货以前,每根柱子都已经测试过并进行了老化。因此没有必要在第一次使用时用水冲洗)。如果流动相中使用了添加物(例如缓冲液或离子对试剂) ,建议使用正确比例的但不含此添加物的流动相进行缓冲冲洗。缓冲冲洗应当首先以低流速进行,最后再使用正常流速。B B在正相条件下老化在正相条件下老化柱效可能会受水与固定相的键合的严重影响。柱子的干燥(激活)或润湿(失活)可能是需要的。使用的溶剂可能是水饱和的或者是无水的。干燥柱子可以使用无水的二氯甲烷。C C对于极性键合柱的特殊说明对于极性键合柱的特殊说明由于这些柱子可以用于反相或者正相条件,在进行老化以前,一定要首先检查你要使用的淋2洗溶剂或洗脱液是否可以与封装在柱子里的溶剂相混溶。如果这些溶剂不能混溶,必须先使用一个合适的缓冲溶剂进行冲洗。3 3洗脱液洗脱液注意第节和第 2 节。一定不要使用 pH 低于 2 或者高于 7 的缓冲液,这是由于它们会改变固定相的性质。极性键合柱最好使用在 3 到 5 之间。在使用以前,洗脱液要进行脱气,以及使用 0.5 微米的滤膜过滤,以免发生检测和泵送问题。一定要在开始
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