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高考生物实验记忆知识点总结

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  • 卖家[上传人]:kms****20
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    • 1、高考生物实验记忆知识点 总结颜色反应1 斐林试剂检测可溶性还原糖原理:还原糖+斐林试剂砖红色沉淀注意:斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热。应用:检验和检测某糖是否为还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎。2 苏丹、苏丹检测脂肪原理:苏丹+脂肪橘黄色;苏丹+脂肪红色注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察。应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪。3 双缩脲试剂检测蛋白质原理:蛋白质+双缩脲试剂紫色注意:双缩脲试剂在使用时,先加 A 液再加 B 液,反应条件为常温(不需要加热)。应用:鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定。4 碘液检测淀粉原理:淀粉+碘液蓝色注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘。应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉5DNA 的染色与鉴定染色原理:DNA+甲基绿绿色应用:可以显示 DNA 在细胞中的分布。鉴定原理:DNA+二苯胺蓝色应用:用于 DNA 粗提取实验的鉴定试剂。6 吡罗红使 RNA 呈现红色原理:RNA+吡罗红红色应用:可以显示 RNA 在细胞中的分布。注意:在观察 DNA 和 R

      2、NA 在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂,而不是单独染色。7 台盼蓝使死细胞染成蓝色原理:正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性。8 线粒体的染色原理:健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。应用:可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在。9 酒精的检测原理:橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色。应用:探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶。10CO2 的检测原理:CO2 可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄。应用:根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,可以检测酵母菌培养液中 CO2的产生情况。11 染色体(或染色质)的染色原理:染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液)染成深色。应用:用高倍镜观察细胞的有丝分裂。附:实验详情实验一:使用高倍显微镜观察几种细胞实验一:使

      3、用高倍显微镜观察几种细胞一、实验目的:一、实验目的:1、学会如何使用显微镜观察细胞;2、了解细胞的结构;3、学会制作临时装片。二、实验材料:二、实验材料:(实验材料可换)松针、动物血液、动物神经细胞永久装片三、实验用具:三、实验用具: 载玻片、盖玻片、蒸馏水、滴管、镊子、土豆、刀片、显微镜(物镜 5X、10X、40X)四、方法步骤:四、方法步骤:1、制作松针的临时切片:(1)取干净的载玻片一个平置于试验台上,用滴管在载玻片中央滴一滴蒸馏水。(2)将土豆切成条状(截面约:0.5X0.5cm)取两条,将一根松针夹在两个土豆条之间,用刀片削成尽量薄的薄片,削时,手腕不动,靠大臂带动小臂移动刀片。切片数次。从中选取较薄的切片,置于载玻片的水滴上。(3)从一侧轻轻盖上盖玻片,不要产生气泡。用吸水纸轻轻吸去盖玻片周围的水滴,即完成临时切片的制作。2、观察切片:(1)取出显微镜,置于试验台上靠左的位置,打开光源。(2) 将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上,调整载物台位置,使盖玻片对准光源。 (3)使用 5X 物镜观察切片,使松针切片在视野中心,换成 10X 物镜,观察松针叶面横切结构。(4)换成

      4、 40X 物镜观察,注意细胞及细胞内物质结构,画图。3、 动物血液临时装片的制作及观察(除了不用切片,其他类似)4、 动物神经细胞永久装片的观察。五、考点提示:五、考点提示:1、松针的叶面结构是什么样的?2、动物细胞的结构是什么样的?与植物细胞又什么不同?3、显微镜的物镜倍数愈大,视野的亮度如何?物体的大小如何?4、如何调节焦距?5、如何才能使切片尽量的薄?切片的厚薄对显微镜下观察的效果有什么影响。实验二:实验二:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一、实验目的:一、实验目的: 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质,阐明实验原理颜色反应,识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色,初步掌握鉴定上述化合物的基本方法,学会描述实验现象,掌握 NaOH 溶液和 CuSO4 溶液的使用方法。二、实验原理:二、实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖还原糖;蔗糖分子

      5、内没有,为非还原糖。实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性还原糖,而不能鉴定可溶性非还原糖。可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的 Cu 2O 沉淀。如:葡萄糖葡萄糖 + + 2Cu2Cu2+2+ + + 4OH4OH 加热加热 葡萄糖酸葡萄糖酸 + + CuCu 2 2OO(砖红色)(砖红色)+ + H H 2 2O O即 Cu 2+被还原成 Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液变化过程为:浅蓝色浅蓝色棕色棕色砖红色沉淀砖红色沉淀淀粉遇碘变蓝色(直链)蓝色(直链)或或紫(红)色(支链)紫(红)色(支链)。2、脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。 脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。 在病理检验中,脂类染色法最常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹,苏丹,苏丹黑及油红 O 等。脂

      6、肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果最好。根据这一原理,适当提高温度(37-60)对组织切片染色效果是有好处的。 脂类染色,用冰冻或石蜡切片,以水溶性封固剂封固,如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色或橙红色(或被苏丹染液染成红色),胆脂素呈淡红色,脂肪酸不着色,细胞核呈蓝色。3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性 NaOH 溶液中能与双缩脲试剂中的 Cu2+作用,产生紫色反应。)三、实验材料:三、实验材料:1、做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。(因为组织的颜色较浅,易于观察。)经试验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。2、做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡 34 小时(也可用蓖麻种子)。3、做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。4、淀粉的鉴定:马铃薯匀浆。四、实验用具:四、实验用具:双面刀片、试管(最好用刻度试管)、试管夹、试管架、大小烧

      7、杯、小量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜五、实验试剂:五、实验试剂:1斐林试剂斐林试剂(包括甲液:质量浓度为 0.1g/ mL NaOH 溶液和乙液:质量浓度为 0.05g/ mL CuSO4溶液)2苏丹苏丹或苏丹或苏丹染液染液3双缩脲试剂双缩脲试剂(包括 A 液:质量浓度为 0.1g/ mL NaOH 溶液和 B 液:质量浓度为 0.01g/ mL CuSO4溶液)4体积分数为体积分数为 50%50%的酒精溶液的酒精溶液5碘液碘液6蒸馏水蒸馏水六、方法步骤:六、方法步骤:一、可溶性糖的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释1. 制备组织样液。(去皮、切块、研磨、过滤)苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高,组因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。生的颜色掩盖。2. 取 1 支试管,向试管内注入2mL 组织样液。3. 向试管内注入 1mL 新制的斐林试剂,振荡。应将组成斐林试剂的甲液、乙液分分别别配制、储存,使用前使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;切勿切勿将甲液、乙液分别加

      8、入苹果组织样液中进行检测。斐林试剂很不稳定,甲、乙液斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的混合保存时,生成的 CuCu ( ( OHOH ) ) 2 2在在 7070 90900 0C C 下分解成黑色下分解成黑色CuOCuO 和水;和水;甲、乙液分别加入时可能会与甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无组织样液发生反应,无 CuCu OHOH生成。生成。4. 试管放在盛有 50-650C 温水的大烧杯中,加热约 2 分钟,观察到溶液颜色:浅蓝色浅蓝色 棕色棕色 砖红色砖红色(沉淀)(沉淀)最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。也可用酒精灯对试管直接加热。防止试管内的溶液冲出试管,防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;造成烫伤;缩短实验时间。缩短实验时间。二、脂肪的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水。干种子要浸泡 34 小时,新花生的浸泡时间可缩短。因为浸泡时间短,不易切片;浸泡因为浸泡时间短,不易切片;浸泡时间过长,组织较软,切片不易成时间过长,组织较

      9、软,切片不易成形。切片要尽可能薄些,便于观察。形。切片要尽可能薄些,便于观察。在子叶薄片上滴 23 滴苏丹苏丹或苏丹或苏丹染液染液,染色 1 分钟。染色时间不宜过长。用吸水纸吸去薄片周围染液,用 50%酒精洗去浮色,吸去酒精。酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上 12滴蒸馏水,盖上盖玻片。滴上清水可防止盖盖玻片时产生气滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。泡。低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,装片不宜久放。时间一长,油滴会溶解在乙醇中。时间一长,油滴会溶解在乙醇中。可看到细胞中有染成橘黄色橘黄色或或红色红色圆形圆形小颗粒小颗粒。三、蛋白质的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释制备组织样液。(浸泡、去皮研磨、过滤。)黄豆浸泡黄豆浸泡 1 1 至至 2 2 天,容易研磨成天,容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间。时间。鉴定。加样液约 2ml 于试管中,加入双缩脲试剂 A,摇匀;再加入双缩脲试剂 B 液 34 滴,摇匀,溶液变紫色。A 液和 B 液也要分开配制,储存。鉴定时先加先加 A A 液后加液后加 B B 液液。CuSOCuSO4 4溶液不能多加溶液不能多加。先加先加 NaOHNaOH 溶液,为溶液,为 CuCu2+2+与蛋白质与蛋白质反应提供一个碱性的环境。反应提供一个碱性的环境。A A、B B液混装或同时加入,会导致液混装或同时加入,会导致 CuCu2+2+变成变成 CuCu ( ( OHOH ) ) 2 2沉淀,而失效。沉淀,而失效。否则否则 CuSOCuSO4 4的蓝色会遮盖反应的的蓝色会遮盖反应的真实颜色。真实颜色。可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。如果稀释不够,在实验中蛋清粘如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不会粘固在试管内壁上,使

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