细菌个数的测定
6页1、对返排液杀菌效果的测试方法对返排液杀菌效果的测试方法实验原理:实验原理:推测返排液主要的细菌为硫酸盐还原菌、铁细菌和腐生菌。通过加入不同杀菌剂,测量加入前后细菌含量,得出不同杀菌剂的杀菌率,优选效果最好的杀菌剂。实验仪器:实验仪器:1)硫酸盐还原菌(SRB)测试瓶;2)铁细菌(IB)测试瓶;3)腐生菌(TGB)测试瓶;4)注射器:1ml;5)恒温培养箱;6)电热消毒器。实验步骤:实验步骤:1)将测试瓶排成两组,并编号;这是二次重复法,三次重复法方法类似,不过要把测试瓶分为三组。2)用 120消毒 20min 的无菌注射器取 1.0ml 水样注入第一组 1 号瓶内,充分震荡;3)用另一只无菌注射器从第一组 1 号瓶中取 1.0ml 水样注入第一组 2 号瓶;4)再更换无菌注射器从第一组 2 号瓶取 1.0ml 水样注入第一组 3 号瓶;5)以此类推一只稀释到最后一瓶为止。根据细菌含量决定稀释瓶数,一般稀释到 7 号瓶;6)将杀菌剂加入到所测试的水样,用无菌注射器去 1.0ml 杀菌后的水样注入到第二组 1号瓶内;7)用另外一只无菌注射器从第二组 1 号瓶去 1.0ml 水样注入第二组 2
2、 号瓶;8)以此类推。根据细菌含量决定稀释瓶数,一般稀释到 7 号瓶;9)将上述测试瓶放入放入恒温培养箱中培养,温度控制在 37,7d 后读数;10) 用下列公式计算杀菌率: =1 21 100%Y杀菌剂的杀菌率,%;B1加杀菌剂前水样中细菌含量,个/ml;B2加杀菌剂后水样中细菌含量,个/ml。备注:备注:一、注意事项一、注意事项1)SRB 测试瓶变黑或者有黑色沉淀,表示有硫酸盐还原菌;TGB 测试瓶由红变为黄或浑浊,表示有腐生菌;IB 测试瓶出现棕红色沉淀,表示有铁细菌。2)杀菌剂的加量为 50mg/L;3)在室温下向水样注入杀菌剂,杀菌时间为 4h;4)腐生菌的培养时间是 5d7d;铁细菌的培养时间是 7d14d,硫酸盐还原菌的培养时间是 14d21d。5)测试瓶大概为 3 元/瓶。二、读数方法:二、读数方法:1.生长指标的确定原则:1)全部呈阳性反应的最后一列平行样应为生长指标的第一位数。2)同一平行样,有 X 个阳性反应瓶,生长指标即为 X。2.级数的确定原则:1)全部呈阳性反应的最后一列平行样的瓶号数减去 1,即为级数 n,以 10n 表示。2)1 号瓶的 2 或 3 个平
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