CHRONO-LOG 560Ca 中文手册注册用
45页1、 CHRONO-LOG 560Ca 全血血小板聚集分析系统 操 作 手 册仅供体外诊断使用用于检测全血或富血小板血浆的血小板聚集和 ATP 释放,另外可以检测钙离子流。目 录总括与说明 血小板聚集实验的原理2 光学聚集法3 电阻法4 荧光释放法4系统特点5 电阻法5 一般特点5 操作说明6电阻法6 光学聚集法9 荧光法(ATP 释放)11 运行标准12 结果13电阻法13光学聚集法13 荧光法(ATP 释放)13 结果的解释14 筛选过程16样本要求16全面的过程19离子钙,形状改变和在含发光物质的血小板中的聚集31 药物干扰35 危险性35 保养与服务36 电子探针组件36 光路与隔膜36 自动定标过程37 典型聚集释放曲线附录总括与说明总括与说明血管损伤后,血小板粘附于血管的损伤处,聚集、合成前列腺素,释放 5-羟色氨、ADP、ATP 。前列腺素的合成与释放产物会引起更进一步的聚集。同时血浆凝固开始、凝血酶产生、纤维蛋白形成和血小板栓子堵塞损伤的血管。由于细胞膜糖蛋白、细胞内储存颗粒、血小板酶、血浆凝血因子缺乏常引起过量出血,人临床表现为:鼻衄、损伤、擦伤失血过多。另外,外科手术的
2、患者尽管经常存在血小板功能障碍,但直到出血不止、或术后出血不止才能发现在 1962 年,Born 描述了用 ADP 诱导的血小板聚集并改革用比浊计测量富血小板血浆的聚集过程.这种改变包括:预温 37 度,搅拌和用记录笔记录一定时间内透过光的变化.在 1977 年,Feinman 设计了一台仪器,同时测量血小板聚集和 ATP 释放。这台仪器利用紫外光测量聚集,在聚集光路的右侧放置敏感的光度计,通过荧光的产生测量 ATP 的释放.在 1980 年,Cardinal 和 Flower 设计了电阻法测量全血中的聚集,非常小的电流通过两个电极,当电极刚与血接触时,在其表面会附着一层血小板,当聚集剂加入后,更多的血小板会聚集在其表面,引起电阻增加。电阻法的测量和荧光的测量又构成了一台全血荧光聚集仪。在 1984 年,Wojenski 和 Sliver 发现了一种快速的方法去进行常规实验室的操作。这种方法就是同时测量聚集和 ATP 的释放,用血量为 5 毫升,30 分钟内完成检测。这种方法避免富血小板血浆的准备时间。在 1985 年 Johnson 创造了一种方法去检测洗涤血小板的钙流,这种方法有利
3、于研究钙离子在血小板聚集中的作用。参考文献参考文献血小板聚集实验的原理众所周知,血小板必须在一系列条件和不同试剂存在的情况下才能发生聚集。 “血小 板聚集”是一个术语,用来表示血小板与血小板之间的粘附。在全血或富血小板血浆中 加入致聚剂,这种现象能被诱发。血小板的聚集有赖于钙离子、纤维蛋白原、单个或多 个的血浆因子和致聚剂的存在。使用不同种类和浓度的致聚剂,血小板的聚集也有不同 的变化。比如光学法,ADP、肾上腺素、胶原、和瑞斯托霉素被广泛应用于监测和提供 最快速的基本诊断信息。 这些试剂的选择有其理论依据:ADP 和肾上腺素都包含在血小板的储存颗粒中,它 们在原始血栓形成时释放出来并诱发进一步的血小板聚集。所以体外的血小板和致聚剂 的反应被证明有助于确定出血性疾病的病因。另一方面,胶原虽然在血管的结缔组织中 而不在血小板中。但血管损伤后它被认为是第一个聚集或凝固前因子。因此,胶原血小 板的体外实验也是非常重要的。其他试剂如凝血酶、瑞斯托霉素、钙离子载 A23187、花 生四烯酸、凝血因子 VIII、血清胺也被用于血小板实验。 血小板聚集实验是目前最有用的血小板功能体外诊断实验。它能提
4、供其他技术不可 能或很难得到的结果,帮助疾病的诊断以及治疗措施的合理选择。这项实验累积起来的 经验描绘了先天和获得性血小板功能障碍的图谱。 血小板聚集实验的临床意义是获得性或类似性质的血小板功能缺陷的检测和诊断。加入特定的聚集试剂后,血小板是否聚集是区别不同类型的血小板功能障碍的依据。 如下表所示:血小板功能缺陷聚集的研究 缺陷ADP 诱导聚集胶原诱导聚集瑞氏托酶素诱导聚集 血小板无力症减少减少正常 血小板减少症正常(1 期)减少正常 假性血友病正常正常异常 非类固醇抗炎药正常(1 期)减少异常三种类型的聚集实验:PRP 中的光学聚集法全血中的电阻法ATP 释放(荧光)的检测光学聚集法光学聚集法血小板的体外聚集可以反映血小板在体内形成初始凝血块的能力。 血浆悬液中的血小板通过相对低离心力的离心从经过抗凝处理的血液样本中分离。离心的产物称为富血小板血浆(PRP) 。贫血小板血浆(PPP)的制备是通过血液样本的 相对高速离心得到的。 Born 型聚集仪或光学聚集仪是一个带有一个(或多个)加热到 37 摄氏度样品室的 固定波长的分光光度计。同时进行持续的样品搅拌,因为在血小板和血小板的接触是
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