z染料常用药品试剂精简

1、一、生物标本常用染料性能简介（一）天然染料1、苏木精 苏木精是从南美的苏木（热带豆科植物）干枝中用乙醚浸制出来的一种色素，是最常用的染料之一。苏木精不能直接染色，必须暴露在通气的地方，使他变成氧化苏木精（又叫苏木素）后才能使用，这叫做“成熟” 。苏木精的“成熟”过程需时较长，配置后时间愈久，染色力愈强。被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体，易溶于酒精，微溶于水和甘油，是染细胞核的优良材料，他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。分化时组织所染的颜色因处理的情况而异，用酸性溶液（如盐酸酒精）分化后呈红色，水洗后仍恢复青蓝色，用碱性溶液（如氨水）分化后呈蓝色，水洗后呈蓝黑色。2、洋红 洋红又叫胭脂红或卡红。一种热带产的雌性胭脂虫干燥后，磨成粉末，提取出虫红，再用明矾处理，除去其中杂质，就制成洋红。单纯的洋红不能染色，要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸，碱性溶液有氨水、硼砂等。洋红使细胞核的优良染料，染色的标本不易褪色。用作切片或组织块染都适宜

2、，尤其适宜于小型材料的整体染色。用洋红配成的溶液染色后能保持几年。洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。（二）人工染料人工染料，即苯胺染料或煤焦油染料，种类很多，应用极广。它的缺点是经日光照射容易褪色，苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。在制片中注意掌握酸碱度，并避免日光直射，也能经几年不褪色。1、酸性品红 酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（0.3% ） 。他是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。他跟甲基绿同染，能显示线粒体。组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力。酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。2、刚果红 刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水喝酒精，遇酸呈蓝色。他能作染料，也用作指示剂。他在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。他用来染细胞质时，能把胶制或纤维素染成红色。在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。刚果红可以跟苏木静作二重染色，也可用作类淀粉染色，由于他能溶于水和酒精，所以洗涤和脱水处理要迅速。3、甲基蓝 甲基蓝是弱酸性染料，能溶于水和酒精。

3、甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。他跟伊红合用能染神经细胞，也是细菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生动物的活体染色剂。甲基蓝极易氧化，因此用他染色后不能长久保存。4、固绿 固绿是酸性染料，能溶于水（溶解度为 4%）和酒精（溶解度为 9%） 。固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂，在染细胞和植物组织上应用极广。他和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。5、苏丹 苏丹是弱酸性染料，呈红色粉末状，易溶于脂肪和酒精（溶解度为 0.15%） 。苏丹是脂肪染色剂。 6、伊红 这类染料种类很多。常用的伊红 Y，是酸性染料，呈红色带蓝的小结晶或棕色粉末状，溶于水（15 摄氏度是溶解度达 44%）和酒精（溶于无水酒精的溶解度为 2%） 。伊红在动物制片中广泛应用，是很好的细胞质染料，常用作苏木精的衬染剂。 7、碱性品（复）红 碱性品红是碱性染料，呈暗红色粉末或结晶状，能溶于水（溶解度 1%）和酒精（溶解度 8%） 。碱性品红在生物学制片中用途很广，可用来染色胶原纤维、弹性纤维、嗜复红性颗粒和中枢神经组织的核质。在生物学制片中用来染维管束植物的木质化壁，又作为原球藻、轮藻的整体

4、染色。在细菌学制片中，长用来鉴别结核杆菌。在 尔根氏反应中用作组织化学试剂，已核查脱氧核糖核酸。 8、结晶紫 结晶紫是碱性染料，能溶于水（溶解度 9%）和酒精（溶解度 8.75%） 。结晶紫在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广，是一种优良的染色剂。他是细胞核染色常用的，用来显示染色体的中心体，并可染淀粉、纤维蛋白、神经胶质等。凡是用番红和苏木精或其他染料染细胞核不能成功时，用它能得到良好的结果。用番红和结晶紫作染色体的二重染色，染色体染成红色，纺锤丝染成紫色，所以也是一种显示细胞分裂的优良染色剂。用结晶紫染纤毛，效果也很好。用结晶紫染色的切片，缺点是不易长久保存。 9、龙胆紫 龙胆紫是混合的碱性染料，主要是结晶紫和甲基紫的混合物。在必要是，龙胆紫能跟结晶紫互相替用。医药上用的紫药水，主要成分是甲基紫，需要时能代替龙胆紫和结晶紫。 10、中性红 中性红是弱碱性染料，呈红色粉末状，能溶于水（溶解度 4%）和酒精（溶解度 1.8%） 。它的碱性溶液中呈现黄色，在强碱性溶液中呈蓝色，而在弱酸性溶液中呈红色，所以能用作指示剂。中性红无毒，常做活体染色的染料，用来染原生动物和显示动植物组织中活细

5、胞的内含物等。陈久的中性红水溶液，用作显示尼尔体的常用染料。 11、番红 番红是碱性染料，能溶于水和酒精。番红是细胞学和动植物组织学生常用的染料，能染细胞核、染色体和植物蛋白质，示维管束植物木质化、木栓化和角质化的组织，还能染孢子囊。 12、亚甲蓝或美蓝 亚甲蓝或美蓝是碱性染料，呈蓝色粉末状，能溶于水（溶解度 9.5%）和酒精（溶解度6%） 。亚甲蓝是动物学和细胞学染色上十分重要的细胞核染料，其优点是染色不会过深。 13、甲基绿 甲基绿是碱性染料。它是绿色粉末状，能溶于水（溶解度 8%）和酒精（溶解度 3%） 。甲基绿是最有价值的细胞和染色剂，细胞学上常用来染染色质，跟酸性品红一起可作植物木质部的染色。 二、常用药品试剂和培养基的配制(一) 反应剂1、检查葡萄糖试剂配方一本尼迪克(Benedict) 溶液(1) 在 400 毫升蒸馏水中溶解 85 克柠檬酸钠和 50 克无水碳酸钠。(2) 在 50 毫升加热的蒸馏水中溶解 8.5 克硫酸铜。把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中，边加边搅拌，如果产生沉淀，要过滤。本尼迪克溶液配制后能长期使用（存放时间较久而产生沉淀是，取上层清液使用

6、，不必重新配制） 。 本尼迪克溶液用来测试食物、血液和尿中的葡萄糖，可测出 0.15 0.20% 的葡萄糖。这种溶液跟未知物同加热时，如果未知物中有葡萄糖，会形成红色的氧化亚铜沉淀物。 配方二 裴林（Fehling）溶液 （1）把 34.5 克硫酸铜溶于 500 毫升蒸馏水中。 （2）把 125 克氢氧化钾（钠）和 173 克酒石酸钾钠溶解在 500 毫升蒸馏水中。 上述两种溶液应分别保存。在检测葡萄糖时，使他们等量的混合，加入待测物的试管内，加热到沸腾。如果有葡萄糖，会形成红色的氧化亚铜沉淀物。 2、检查淀粉的试剂 鲁哥氏（Lugols）溶液（碘液） 碘液用来测试食物样品或叶片中的淀粉，也用作染色剂，例如可染色鞭毛、纤毛和细胞核等。 3、检查蛋白质的试剂 配方一 米伦（Millon）试剂 在 60 毫升浓硝酸（比重 1.42）中溶解 40 克汞（水浴加温可助溶） ，溶解后加入两倍体积的蒸馏水稀释，静置澄清后，取它上层的清液备用。这种试剂可长期保存。 在待测物中加入少量米伦试剂，加热，如果有蛋白质，会出现红色。这种试剂不能用来测定尿中的蛋白质。配方二 双缩尿试剂 分别配制 10%氢氧化

7、钠溶液和 1%硫酸铜溶液。 在 3 毫升待测物中加入 1 毫升 10%氢氧化钠溶液和 1 滴 1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质，会出现紫色反应。4、检查脂肪的试剂 苏丹（）酒精饱和溶液 取 0.2 克苏丹（或苏丹） ，放入纯酒精中，加热，使它充分溶解，成为饱和酒精溶液，过滤后密闭在试剂瓶内保存备用。 5、酸碱指示剂 配方一 酚酞试剂和试纸 酚泰试剂（试纸） pH 值变色范围 8.210，在酸性和中性溶液中都无色，再碱性溶液中呈深红色。 配方二 红蓝石蕊试纸 红石蕊试纸在碱性溶液中变蓝，蓝石蕊试纸在酸性溶液中变红。 6、检查二氧化碳的试剂 检查二氧化碳的试剂，可用溴代麝香草酚蓝溶液和石灰水。 配方一 溴代麝香草酚蓝溶液 取 0.1 克溴代麝香草酚蓝，溶解在 100 毫升蒸馏水里，滴入少量 0.1%氢氧化钾溶液，使它成为弱碱性溶液而呈蓝色。 溴代麝香草酚蓝溶液 pH 值变色范围是 6.0（黄）7.6（蓝） 。待测物中如果有二氧化碳，会形成碳酸而使溶液变成黄色。 配方二 石灰水 在蒸馏水中加入生石灰（氧化钙） ，变加边搅拌，直到加入的生石灰不再溶解，呈饱和状态时为止。在石灰水澄清后，倾出上层清液

8、，用滤纸过滤，放在密闭瓶内保存。 如果测定的物质中有二氧化碳，会生成碳酸钙，使石灰水变浑浊。 7、检查细胞生活力的试剂 检查细胞有无生活力，可用中性红甲基蓝试剂。配制的方法是先分别配制 1%中性红溶液和 1%甲基蓝溶液，这两种溶液各取 1 份混合，用来鉴定细胞的死活。该试剂使活细胞的液泡染上红色，而使死细胞全部染成蓝色。（三）生理盐水 配方一 各种动物需用的生理盐水 哺乳类 需用生理盐水浓度是 0.9%。称取 0.9 克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到 100 毫升。 鸟类 需用的生理盐水浓度是 0.75%。称取 0.75 克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到 100 毫升。 两栖类 需用的生理盐水浓度是 0.65%。称取 0.65 克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到 100 毫升。 配方二 任氏（Ringers）生理盐水 氯化钠 6.5 克 碳酸氢钠 0.2 克 氯化钾 0.14 克 磷酸二氢钠 0.01 克 氯化钙 0.12 克 此溶液用于变温动物，尤其常用于两栖类。 配方三 乐氏（Lockes）生理盐水 氯化钠 9.0 克 碳酸氢钠 0.10.3 克 氯化钾 0.42 克 氯化钙 0.2

9、4 克 以上溶液用于恒温动物，尤其常用于哺乳类。 （六）染色剂 1、细菌染色剂 配方一 齐氏（Ziehl）石炭酸品红染液 甲液 取石炭酸 5 克，溶解在 95 毫升蒸馏水中。 乙液 取 0.3 克碱性品红，放入研钵中研磨，逐渐加入 10 毫升 95%酒精，继续淹没，使它溶解。 将甲液和乙液混合后，摇匀，过滤，装瓶，备用。 配方二 罗氏（Loeffler s）美蓝染液 甲液 取 5 克美蓝，溶于 100 毫升 95%酒精中，制成美蓝酒精饱和液。 乙液 取氢氧化钾 0.01 克（或 1%氢氧化钾溶液 1 毫升） ，溶液也可用于放线菌染色， 0.1%浓度可用于酵母菌染色。 配方三 革兰氏（Gram s）染液 用此液染色因先用甲液染色，再加乙液固定，用丙液处理，最后用丁液复染。四种液体的配方如下： 甲液（结晶紫液） （1）结晶紫 （2）草酸铵 使用钱江（1） 、 （2）液相混，静置 48 小时后使用。 乙液(碘液) 丙液 95%酒精溶液 丁液（番红花红液） 2、细菌特殊染色剂 配方一 芽孢染液 用此配方染色是用甲液染色后，用乙液复染。 甲液 取 5 克孔雀绿，加入少量蒸馏水，使它溶解后，用蒸馏水稀释到 100 毫升，即成孔雀绿染液。 乙液 取番红花红 0.5 克，加入少量蒸馏水，使它溶解后，用蒸馏水稀释到 100 毫升，集成番红花红复染液。 配方二 荚膜染液 此配方先用甲液染色，后用乙液复染。 甲液 取结晶紫 0.1 克，溶于少量蒸馏水后，加水稀释到 100 毫升，再加入 0.25 毫升冰醋酸一结晶紫染液。乙液 取硫酸铜（ ）31.3 克，溶于少量蒸馏水后，加水稀释到 100 毫升，即成 20%硫酸铜脱色剂。 配方三 鞭毛染液 甲液 饱和明矾溶液 2 毫升 5%石炭酸溶液 5 毫升 20%丹宁酸溶液 2 毫升 乙液 碱性品红 11 克 95%酒精 100 毫升 使用前取甲液 9 毫升和乙液 1 毫升相混，过滤即可。 3、植物细胞壁染色剂 配方一 纤维素细胞壁染液（） 该液能染色纤维素细胞壁，还用于动植物中作浆质染色剂。 配方二 纤维素细胞壁染液（） 该染液能把细胞壁染成紫色，胞质染成淡黄色，胞核染成棕色。 配方三 纤维素细胞壁染液（） 甲液 取 1 克碘和 1.5 克碘化钾，溶于 100 毫

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