第四章微生物肥料(定).ppt

第四章 微生物肥料,第一节 概述,微生物肥料的概念： 是一类含有活的微生物的特定制品，应用于农业生产中，能够获得特定的肥料效应在这种效应的生产中，制品中的活的微生物起关键作用，符合上述定义的制品均应归入微生物肥料 ——陈华癸教授，华中农业大学 或者：微生物肥料是指一类含有活的微生物并在使用后能获得特定肥料效应，能增加植物产量或提高产品质量的微生物制剂微生物肥料又称细菌肥料、生物肥料，有些国家称为接种剂或拌种剂 在我国，有些人将特殊效能的微生物（如根瘤菌、解钾细菌、解磷菌）经发酵技术生产扩大培养后与草炭等载体混合，且使用量很少的成为接种剂、拌种剂 而将微生物和有机物（畜禽粪便、草炭等）或微生物与无机肥料混合，经过加工制成的用于底肥、追肥，且使用量较大的称为微生物肥料发展微生物肥料的必要性,首先，化肥使用量逐年增加，化肥利用率和增产效益下降；我国单位面积施用化肥量是日本的2倍，美国的2.4倍，加拿大的4.4被，澳大利亚的8.2倍，俄罗斯的9.0倍！化肥利用率仅为30%！应用化肥引起水质和环境污染 第二，土壤肥力下降，土壤退化荒漠化逐渐加剧； 第三，土壤生态环境恶化，土壤生态功能下降； 第四，中国化学肥料资源严重不足，这对农业的可持续发展构成了严重的挑战。

开发和应用微生物肥料的意义,土壤肥力的改良； 节约能源，保护环境： 1、提高化肥的利用率，即提高了能源利用率； 2、本身无毒害作用，不污染环境； 3、减少土壤营养流失和富营养化的产生 4、可以此实现固体废弃物资源化_堆肥 可持续发展的要求实践证明， 微生物肥料在绿色有机食品生产、农业生态环境保护以及高产、优质、高效农业的持续发展中发挥着重要作用目前，微生物肥料逐步成为中国国家生态示范区、绿色和有机农产品基地等肥料的主力军，正在农业生产中发挥着越来越明显的经济效益、社会效益和生态效益我国微生物肥料的研发历程,我国自50 年代从国外引进自生固氮菌、磷细菌和硅酸盐细菌制剂 从豆科植物上应用根瘤菌接种剂开始的，起初只有大豆和花生根瘤菌剂 60 年代推广使用放线菌制成的“5406”抗生菌肥料和固氮蓝绿藻肥 70—80 年代中期，开始研究VA 菌根，以改善植物磷素营养条件和提高水分利用率 80 年代中期—90 年代，农业生产中又相继应用联合固氮菌和生物钾肥作为拌种剂微生物肥料研制单位相继推出联合固氮菌肥、硅酸盐菌剂、光合细菌菌剂、PGPR 制剂和有机物料(秸秆)腐熟剂等适应农业发展需求的新品种微生物肥料的主要功效与机理,一、增加土壤肥力，促进植物对营养元素的吸收 1、氮磷钾大量元素营养：根瘤菌、自生和联合固氮菌；硅酸盐细菌的解钾作用。

2、土壤中大量微生物的活动使土壤有机质转化形成腐殖质，促进土壤团粒结构的形成，提高土壤肥力，改善土壤理化形状，增强土壤保肥、保水能力，从而提高作物的产量和品质二、分泌多种生理活性物质刺激调节植物生长： 大量研究表明，微生物活动产生的植物生长调节物质以及维生素都不同程度地刺激和调节植物的生长 1、分泌植物激素 生长素、赤霉素、脱落酸、乙烯和酚类物质； 2、酸类物质的产生：有机酸的作用微生物肥料的主要功效与机理,三、对有害微生物起到生物防治作用： 通过在植物根际大量生长繁殖成为作物根际的优势菌，与病原微生物争夺营养物质，在空间上限制其它病原微生物的繁殖机会，对病原微生物起到挤压、抑制作用，从而减轻病害这类微生物也叫做根圈促生细菌（PGPR）微生物肥料的主要功效与机理,PGPR（植物根际促生细菌） （Plant Growth Promoting Rhizobacteria ） 1.定义：所谓的PGPR(plant growth-promoting rhizobacteria)即一群定殖于植物根际、与植物根密切相关的根际细菌，当接种于植物种子、根系、块根、块茎或土壤时，能够促进植物生长 2.PGPR的寄主植物及其效应 促进植物生长，控制农作物病（虫）害； 对大麦、小麦、水稻、玉米、花生、菜豆、蔬菜和经济作物促进生长、增加植物种子干重,四、产生抗病和抗逆作用，间接促进植物生长： 1、产生多种抗病物质：抗生素 2、提高植物的抗逆性：由于微生物肥料的施用，其所含的菌种能诱导作物产生超氧化物歧化酶，在植物受到病害、虫害、干旱、衰老等逆境时，消除因逆境而产生的自由基来提高作物的抗逆性，减轻病害。

微生物肥料的主要功效与机理,微生物肥料的现状,(1) 微生物肥料产业初具规模，已成为我国农业生物产业的重要组成部分国内现有微生物肥料生产企业500 个以上，年产量约为500 万t ，在肥料家族中所占的比例逐年增加，应用面积累计近亿亩 (2) 产品种类不断增加, 使用菌种不断扩大在农业部登记的产品分为菌剂类和菌肥类二个大类，共有11 个品种9 个菌剂类品种分别是根瘤菌剂、固氮菌剂、硅酸盐菌剂、溶磷菌剂、光合菌剂、有机物料腐熟剂、产气菌剂、复合菌剂和土壤修复菌剂； 2 个菌肥类产品是复合生物肥料和生物有机肥 (3) 使用效果逐渐被使用者认可， 应用范围不断拓宽微生物肥料研究与生产的问题,基础研究力度不够、科研人员相对不足； 生产工艺参差不齐，产品质量不稳； 对微生物肥料缺乏正确的认识，存在随意复合现象； 缺少统一的质量标准和规范的行业管理第二节 微生物肥料的种类,微生物肥料按作用机理分： 固氮菌类肥料（根瘤菌肥料、自生固氮菌肥、固氮蓝藻等） 解磷菌类肥料 解钾菌类肥料（硅酸盐细菌） 抗生菌肥料 PGPR菌肥 堆肥菌剂和发酵菌剂 复合微生物肥料,1. 固氮菌肥_根瘤菌肥料,根瘤菌是含有大量根瘤菌活菌体的生物制剂，接种于豆科植物种子上，在土壤条件适宜情况下，根瘤菌能在豆科植物根际进行活跃的生命活动，并侵入豆科植物根部结瘤，固定空气中的氮素为NH3或NH4+。

是用人工选育出来的高效根瘤菌株经大量繁殖用载体吸附制成的，是迄今为此世界上研究最早、应用时间最长、生产量最多、应用最广泛和效果最稳定的微生物肥料之一根瘤菌与豆科植物间的共生,------形成根瘤共生体,根瘤菌固定大气中的气态氮为植物提供 氮素养料；,豆科植物的根的分泌物能刺激根瘤菌的生 长，同时，还为根瘤菌提供保护和稳定 的生长条件Root Nodule Bacteria and Symbiosis with legumes豆类,,,Soybean root nodules,,Unnodulated soybean,,Nodulated soybean,,生物固氮在氮循环中的作用,,根瘤固氮菌一般生理特性： 化能有机营养型能：利用NO3-、NH4+，但培养基中含植物性氮素物质（豆芽汁、酵母汁等）时大多数根瘤菌生活得更好需要多种灰分元素：P素的要求尤其高；铁是合成豆血红蛋白和铁蛋白的必要元素钼是固氮酶的成分适合中性和微碱性条件，适合的pH在6.5-7.5，适合的温度25-30℃根瘤菌甘露醇琼脂培养基,甘露醇 5g；蔗糖 5g ；酵母粉 0.5g；磷酸氢二钾 0.5g ；硫酸镁 0.2g；氯化纳 0.lg；硫酸钙 0.lg ；钼酸钠溶液 lmL ；硫酸锰溶液 1ml；柠檬酸铁 l%溶液 1mL；硼酸 l%溶液 1mL；刚果红 1%溶液 2.5mL； 琼脂 18~20g，水 l000mL，pH值 7.0,据根瘤菌在酵母汁甘露醇培养基上生长速度可分为快生型和慢生型：快生型在含甘露醇或其他碳水化合物的培养基上产酸，代时2-4h；慢生型在含甘露醇或其他碳水化合物的培养基上产碱，代时6-8h；也存在中间类型。

①根瘤形成过程的主要步骤：特定的根瘤菌与相应的豆科植物相互辩认使根瘤菌特异地吸附在根毛上 二者相互作用使根毛变形，主要表现卷曲或分枝 细菌进入根内 形成侵入线 侵入线发展，进入根皮层后导致一部份细胞转化为分生组织，细胞分裂和分化，根瘤开始发育 根瘤菌从侵入线内释放到根瘤细胞中繁殖，而后转化成类菌体形态 豆血红蛋白出现，固氮作用开始根瘤菌与宿主的共生特性： 侵染性：根瘤菌能进入豆科植物根内，在其中繁殖，并形成根瘤 专一性：每一种根瘤菌只与其有专一性对应的几种豆科植物建立共生关系形成根瘤 有效性：并不是能够结瘤的菌株都能固氮，据它们在根瘤中是否固氮而分为有效菌株和无效菌株，它们形成的根瘤分别称为有效根瘤和无效根瘤许多无效根瘤的结瘤能力比有效根瘤强 根瘤菌肥的生产,拌种剂和复合肥料 拌种剂：粉状、液体、冻干粉 复合肥料：同一根瘤菌属的不同菌株复合，或与其他微生物合用以增强结瘤能力 生产过程： 菌种培养—固体扩大—收集菌泥制菌粉—装瓶 液体扩大—吸附剂—拌种—装袋2. 自生固氮菌肥料,单独生活时能固定空气中的氮的一类微生物称为自生固氮菌，分为光合细菌和非光合细菌 主要类群：蓝细菌、圆褐固氮菌、假单胞菌、多黏芽孢杆菌等。

固氮能力比共生固氮差自生固氮微生物：圆褐固氮菌,圆褐固氮菌代谢类型是？,异养需氧型,圆褐固氮菌能产生生长素，促进植株生长和果实的发育生物固氮的利用价值,将圆褐固氮菌制成菌剂，施到 土壤中，可提高农作物产量,2.对豆科植物进行根瘤菌拌种， 也能提高豆科作物的产量,3.用豆科植物做绿肥，可明显增加 土壤中氮的含量,磷素是作物生长发育所必需的营养元素之一虽然土壤中磷含量很高，但能被植物吸收利用的有效态无机磷却很低，土壤中绝大部分磷为无效磷 磷是许多发展中国家农业生产重要的限制因素，提高土壤中磷的利用效率将具有战略性意义3. 解磷菌肥料,解磷微生物菌剂 能分解土壤中难溶态磷的细菌制成的解磷细菌肥料，使解磷细菌在作物根际形成一个磷素供应较为充分的微区细菌解磷机制,解磷微生物溶解难溶性磷化物的机制可归结为以下几类： (1)分泌有机酸起作用：这些酸既能降低pH 值，又可与铁、铝、钙等离子结合，从而使难溶性磷酸盐溶解；通过代谢活动产生有机酸(细菌一般分泌乳酸、氨基酸、草酸、延胡索酸和柠檬酸等，真菌主要分泌草酸、丙二酸和乳酸等)，这些酸一方面直接溶解土壤中难溶性磷酸盐 (2)有机酸另一方面则是通过鳌合作用释放出土壤磷素：腐解植物残体而产生胡敏酸和富里酸。

这两种酸能与复合磷酸盐中的钙、铁鳌合，从而释放出磷酸根，与铁、铝及磷酸盐形成稳定的可溶性复合物，可以被植物吸收利用 (3)生物矿化作用即通过分泌植酸酶、核酸酶和磷酸脂酶等物质，分别将植酸、核酸和磷酸脂等有机磷降解巨大芽胞杆菌（ Bacillus megatherium var.phosphaticum ）,1. 菌体形态特征：此菌的菌体实在粗大，因而拉丁文学名称其为为巨大芽孢杆菌 2. 芽孢形态特征： 有大芽孢，椭圆形偏端或中位；孢囊多为背端生，芽孢内不着色，无色；成熟孢囊不膨大 3. 菌落形态特征：在专用培养基上菌落圆形，有同心圈，表面光滑；菌落不透明，由灰白色变棕黄色，边缘整齐；菌落扁平，微隆起微绉折 4. 生理生化特征：革兰氏染色阳性；在肉汤培养基中生长很快，有较强分解核酸和卵磷脂的能力，也能从难溶的无机磷灰石中释放出正磷酸盐解磷能力的测定,解磷能力是表征解磷微生物作用的重要指标，可采用定性法和定量法两种方法测定 定性法一般指的是平板溶磷圈法; 平板溶菌圈法：将溶磷菌株在含有难溶性磷酸盐或有机磷的固体平板培养基上培养，测定周围菌落产生透明圈的大小无机磷平板一般采用磷酸钙盐固体培养基，接种菌株培养数天后，以磷酸钙盐平板上菌落周围出现透明圈的视为有解无机磷能力的菌株。

有机磷平板一般采用卵黄平板培养基，以卵黄平板上菌落周围出现混浊圈的视为有解有机磷能力(卵磷脂被水解形成脂肪和磷酸)溶磷圈直径（D）和菌落生长直径(d)的比值(D/d)是表征解磷菌相对解磷能力的一个指标解磷微生物的种类,解磷细菌： 芽孢杆菌属(Bacillus) 欧文氏菌属(Erwinia) 假单孢菌属( Pseudomonas) 土壤杆菌属(Agrobacterium ) 沙雷氏菌属(Serratia ) 黄杆菌属( 。